초기 개발 중 바다 말미잘의 지질 형질이

Cnidarians는 해파리, 산호 및 바다 말미잘을 포함하는 동물의 다양한 그룹을 나타냅니다. 그(것)들은 세포외 매트릭스 (mesoglea)에 의해 분리되는 외엽과 내배엽으로 구성된 diploblasts입니다. Cnidaria는 초파리와 무스와 같은 전통적인 동물 모델이 1에 속하는 Bilateria를추측하는 자매 그룹입니다. 또한, Cnidaria-Bilateria 발산은 캄브리아기 이전 기간에 발생 한 것으로 생각된다². 이와 같이, cnidarians와 양자학자의 비교 연구는 그들의 가장 최근의 일반적인 조상의 생물학에 대한 통찰력을 얻기 를 위해 필수적입니다. 최근, 비교 유전체학은 cnidarians와 양자학자가 노치와 bHLH와 같은 많은 발달 툴킷 유전자를 공유한다는 것을 밝혔습니다, 그들의 일반적인 조상이 이미 이 유전자3가 있었다는 것을 암시하. 그러나, Cnidaria와 Bilateria의 마지막 일반적인 조상에 있는 이 발달 공구 키트 유전자의 역할은 비교적 적게 잘 이해됩니다. 이 문제를 해결하기 위하여는, 이 깊이 보존한 유전자가 cnidarians에 있는 어떻게 작동하는지 공부하는 것이 중요합니다.

신흥 세포주의 유전 모델 중 하나는 안토조안 네마토스텔라 정맥학입니다. 그것의 게놈은^3,및 모폴리노 매개 유전자 녹다운, meganuclease 중재한 기형성, 및 CRISPR-Cas9 중재한 유전자 녹진 및 녹아웃을 포함하여 다양한 유전 공구가 지금 이 동물에서 유효하게 유효합니다. 또한, 네마토스텔라 개발은 비교적 잘 이해된다. 배아 발생 시, 위분은 질4에 의해 발생하며, 배아는 자유 수영 플라눌라 유충으로 발전합니다. 플래눌라는 이후 입과 경부 촉수와 sessile 폴리페로 변환합니다. 용종은 성장하고 성숙에 도달합니다.

CRISPR-Cas9 매개 표적 돌연변이 발생은 이제 일상적으로 Nematostella 정맥염5,^6,7,^8,9에서 유전자 기능을 연구하는 데 사용됩니다. Nematostella에서녹아웃 돌연변이를 생성하기 위해, 궤적 특이적 단일 가이드 RNA와 endonuclease Cas9 단백질을 포함하는 칵테일은 먼저 일반적으로 보여주는 F0 창시자 동물을 생산하기 위해 비옥한 또는 기름지게 한 계란에 주입됩니다. 모자이크. F0 동물은 이후에 성숙도에 제기되고 F1 집단을 생성하기 위해 서로 교차되고, 그중 부분 집합은 녹아웃 돌연변이체일 수 있다 6. 또는, 성적으로 성숙한 F0 동물은 F1 이형 동물을 생성하기 위해 야생 형 동물과 교차 할 수 있으며, 관심의 궤적에 녹아웃 대립 유전자를 운반하는 F1 이형은 F2 자손을 생산하기 위해 서로 교차 할 수 있습니다, 1 분기 그 중 녹아웃 돌연변이 가 될 것으로 예상된다⁵. 두 접근은 유전으로 이질적인 인구에서 녹아웃 돌연변이를 확인하는 방법을 요구합니다. 폴립 촉수는 6,^7. 그러나 관심 있는 유전자의 발달 기능이 조사되고 돌연변이 배아가 폴립 단계에 도달하지 않는 경우(즉, 돌연변이와 관련된 애벌레 치사성으로 인해), 녹아웃 돌연변이는 초기에 확인되어야 합니다. 여기에 설명된 PCR 기반 프로토콜은 동물을 희생시키지 않고 가스트루라 단계에서 개별 동물을 유전자형으로 하는 것으로, 이는 배아의 유전적 이질적인 집단으로부터 녹아웃 돌연변이체의 식별을 가능하게 한다. 전체 지질 형질 검사 과정의 기간은 선별 될 배아의 수에 따라 다르지만 최소한 4-5 시간이 필요합니다.