Summary

Usando óxido de utério como ferramenta não invasiva e não letal para avaliar composição corporal e consumo de água em mamíferos

Published: February 20, 2020
doi:

Summary

Este artigo descreve a técnica de diluição de óxido de deutério em dois mamíferos, um insetívoro e carnívoro, para determinar a água total do corpo, a massa corporal magra, a massa de gordura corporal e o consumo de água.

Abstract

Sistemas de pontuação de condições corporais e índices de condição corporal são técnicas comuns utilizadas para avaliar o estado de saúde ou aptidão de uma espécie. Os sistemas de pontuação de condições corporais são dependentes e têm potencial para serem altamente subjetivos. Os índices de condição corporal podem ser confundidos com forrageamento, os efeitos do peso corporal, bem como problemas estatísticos e inferenciais. Uma alternativa aos sistemas de pontuação de condição corporal e índices de condição corporal é usar um isótopo estável, como óxido de deutério para determinar a composição corporal. O método de diluição de óxido de deutério é uma técnica quantitativa repetível usada para estimar a composição corporal em humanos, vida selvagem e espécies domésticas. Além disso, a técnica de diluição de óxido de deutério pode ser usada para determinar o consumo de água de um animal individual. Aqui, descrevemos a adaptação da técnica de diluição de óxido de deutério para avaliação da composição corporal em morcegos marrons grandes (Eptesicus fuscus) e para avaliar o consumo de água em gatos (Felis catis).

Introduction

Sistemas de pontuação de condições corporais e índices de condição corporal são técnicas comuns utilizadas para avaliar o estado de saúde ou aptidão de uma espécie1,2. Muitas espécies domésticas e zoológicas possuem sistemas únicos de pontuação de condição corporal (BCS) que são usados para avaliar o tecido gorduroso muscular e superficial de um animal3. No entanto, a avaliação do BCS depende do avaliador — o que significa que o BCS é uma medida objetiva ou semiquantitativa quando avaliada por um avaliador treinado. Em espécies de animais selvagens, os índices de condição corporal são comumente usados em vez de BCS e são baseados em uma proporção de massa corporal ao tamanho do corpo ou massa corporal ao antebraço2. Os índices de condição corporal são muitas vezes confundidos com os efeitos da forrageamento e podem ser confundidos pelo tamanho do corpo, bem como problemas estatísticos e inferenciais4.

Uma alternativa aos sistemas de pontuação de condições corporais e índices de condição corporal é usar um isótopo estável para determinar a composição corporal. Um isótopo estável comumente usado é o óxido de deutério (D2O), uma forma não radioativa de água na qual os átomos de hidrogênio são isótopos de deutério. O método de diluição de óxido de deutério descrito neste estudo pode ser uma técnica não subjetiva, quantitativa e repetitiva usada para estimar a composição corporal em humanos5 e uma ampla gama de espécies4,6,7. Essa técnica pode ser vantajosa para estudar a composição corporal na vida selvagem. Por exemplo, pode ser usado para avaliar mudanças longitudinalnais na composição corporal, como antes e depois de uma ação de gestão. No entanto, em algumas espécies de animais selvagens o óxido de deutério pode superestimar o teor real de água8. Portanto, ao adaptar a técnica para uma espécie, é importante validar o método comparando o método de óxido de deutério à análise de carcaças para espécies não ameaçadas de extinção. Para espécies ameaçadas e ameaçadas, um método não destrutivo, como a absorção de raios-X duplo (DXA), deve ser considerado como um método alternativo de comparação ao método destrutivo padrão-ouro da análise completa da carcaça.

Além da composição corporal, a técnica d2O de diluição pode ser usada para determinar o consumo de água de um animal individual9. Essa aplicação única de D2O pode ser usada para responder não apenas perguntas de pesquisa, mas pode ser útil para avaliar o consumo de água de animais individuais abrigados em grandes ambientes sociais.

Aqui, descrevemos a adaptação da técnica de diluição D2O para avaliar a composição corporal em um insetoivore, grandesmorcegos marrons ( Eptesicus fuscus), e para avaliar o consumo de água em um carnívoro, gatos (Felis catis).

Protocol

Todos os experimentos aqui descritos foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais da Universidade do Missouri e conduzidos a permissão de coleta científica do Departamento de Conservação da Vida Selvagem (MDC) do Missouri (Permit #16409 e #17649). 1. Preparação da solução de estoque estéril, isotônica, salinada D2O Faça uma solução de estoque de 50 mL de 9,0 g/L salinado D2O. Pesar 450 mg de NaCl de grau farmacêutico e transfer…

Representative Results

A técnica de diluição de óxido de deutério pode ser usada para avaliar a composição corporal de uma variedade de espécies. Para demonstrar a adaptabilidade, estamos relatando o primeiro uso da técnica de diluição de óxido de deutério em uma espécie de morcego insetívoro norte-americano, Eptesicus fuscus,o grande morcego marrom para resultados representativos. Um platô de cronometragem foi concluído tomando amostras de sangue de injeção pré e pós-D2…

Discussion

O uso de óxido de deutério para determinar a TBW tem sido usado desde a década de 1940e é usado em humanos e uma variedade de espécies domésticas e da vida selvagem4,6,7. Outras técnicas não destrutivas foram desenvolvidas, incluindo análise de impedância bioelétrica (BIA), DXA e ressonância magnética quantitativa (RQ). Cada método tem vantagens e desvantagens que devem ser consideradas ante…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Esta pesquisa foi apoiada pelo MDC Cooperative Agreement (#416), Us Forest Service Cooperative Agreement (16-JV-11242311-118), Academia Americana de Nutrição Veterinária e Waltham/Royal Canin, USA Grant (número de subvenção: 00049049), subsídio de treinamento do NIH (número de subvenção: T32OS011126) e o Programa de Estudiosos de Pesquisa Veterinária da Universidade do Missouri. Os autores agradecem a Shannon Ehlers por pré-revisar este manuscrito. Agradecemos ao Dr. Robert Backus por fornecer os padrões D2O e permitir o uso de seu laboratório.

Materials

0.2 micron non-pyrogenic disk filter Argos Technologies FN32S nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile
1.5 mL conical microcentrifuge tubes USA Scientific 1415-9701 1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap
10 mL sterile glass vial for injection Mountainside Medical Equipment MS-SEV10 clear, sterile glass injection unit
10 mL syringe Becton Dickinson 305219 sterile 10 mL syringe individually wrapped
100 mL sterile glass vial for injection Mountainside Medical Equipment AL-SV10020 clear, sterile glass injection unit
20 gauge needle Exel 26417 needles hypodermic 20g x 1" plastic hub (yellow) / regular bevel
22 gauge needle Exel 26411 needles hypodermic 22g x 1" plastic hub (black) / regular bevel
deuterium oxide Sigma-Aldrich 151882-25G 99.9 atom % D
isofluorane Vetone 3060 fluriso isoflurane, USP
OMNIC Spectra Software ThermoFisher Scientific 833-036200 FT-IR standard software
petroleum jelly Vaseline 305212311006 Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant
plastic capillary tubes Innovative Med Tech 100050 sodium heparin anticoagulant, 50 μL capacity, 30 mm length
Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell International Crystal Laboratory 0005D-875 0.05 mm Pathlength
sodium chloride EMD Millipore 1.37017 suitable for biopharmaceutical production
Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer ThermoFisher Scientific 269-169400 discontinued model, newer models available

Referenzen

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Hooper, S. E., Eshelman, A. N., Cowan, A. N., Roistacher, A., Paneitz, T. S., Amelon, S. K. Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals. J. Vis. Exp. (156), e59442, doi:10.3791/59442 (2020).

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