真空采血系统和眼镜放大镜从非麻醉小鼠尾静脉中修饰采血
Summary
本研究报告使用带有眼镜放大镜的真空萃取管系统从小鼠尾静脉中取样。我们的方法很容易练习, 可用于小鼠的重复采血。
Abstract
血样采集是实验动物研究的基础。为各种研究目的获得足够的血液样本是很重要的。小鼠的尾巴静脉较小, 有时很难通过常规的穿刺方法获得所需的血量。与传统的采血方法 (常规组) 相比, 本研究探讨了利用真空采血系统和眼镜放大镜 (实验组) 从小鼠尾脉中反复采集血液样本的优越性, 分别由初学者和专家表演。在眼镜放大镜的帮助下, 将蝶针尖插入实验组每只老鼠的尾部静脉。当静脉成功穿透时, 将蝶针的橡胶末端插入真空采血管, 将血液样本采集到真空收集管中。然后, 柱塞被用来收集血液, 而无需在传统组的眼镜放大镜的帮助下。实验组患者采集血液样本的成功率为70% 对 100% (p < 0.01), 常规组为35% 对 85% (p < 0.01)。对于初学者和专家来说, 与常规组相比, 实验组获得所需血液样本所需的穿刺时间明显较低 (2.40±0.75 对 2.90±0.31, p < 0.05; 1.55 ±0.37 vs. 1.55±0.76, p < 0.05)。总之, 所提出的血液取样技术是可行的, 易于实践, 并能够频繁采样足够的血量从非麻醉小鼠。
Introduction
从参与实验的动物身上采集血液是一项基本的研究技术。有一些可用于从小鼠血液采集的技术, 包括尾巴切割和心脏穿刺、眼眶后丛、颈静脉、尾端静脉和静脉。理想情况下, 应以微创方式采集血液, 对动物健康的影响最小。然而, 最常用的技术往往会给动物带来压力, 并可能影响研究成果1。从后眼眶神经丛中采集血液可用于从小鼠2中获得足够的血量。然而, 它可能会导致严重的组织损伤, 不允许在短时间间隔内反复获得血液3。
尾状静脉是采血的优越位置, 对小鼠的伤害最小。然而, 小鼠的尾脉很薄, 有时很难通过传统的穿刺技术获得足够的血液。在某些情况下, 需要反复穿刺才能获得所需的血量。麻醉也是通常建议促进从小鼠的尾巴静脉的血液取样。 此外, 可能需要手术刀、直刃剃须刀或锋利的剪刀来去除尾巴的两端, 以获得所需的血液样本4。我们以前报告过真空血液样本采集系统从非麻醉大鼠的尾静脉中成功采集血液, 从而降低了血液污染的风险, 避免了反复穿刺的需要 5。本研究报告了一种类似的采血方法在非麻醉小鼠。
Protocol
Representative Results
Discussion
本研究描述了一种易于学习的小鼠采血方法, 该方法优于传统技术。首先, 该方法可以很容易地掌握与高成功率。其次, 它基于真空负压原理, 允许连续抽血, 减少直接血液接触的风险, 这也减少了污染和溶血的机会 9.第三, 这种方法对于在短时间内频繁采集小鼠血液量是可行的, 用于各种研究目的。此外, 该程序只对小鼠造成最小的伤害, 血液采集可以在不使用麻醉剂的情况下进行;从而避免了应激反应和麻醉剂对血液样本的影响。
根据批准的方案7, 尾静脉是血液取样的优越位置。然而, 从血液流动不足的薄尾静脉中获得足够的血量并不总是容易的。在这种情况下, 皮肤通常被切开, 静脉被柳叶刀穿透, 或者尾巴的末端被剃须刀迅速取出。
该方案旨在改进使用真空采血系统从小鼠采集血液的方法, 该系统需要真空采血管、蝶针和眼镜放大镜。这种真空血液取样系统通常用于收集患者的血液样本, 在日常临床实践中 10。在眼镜放大镜的帮助下, 尾巴静脉的完美穿刺点更容易定位。当针头的尖端插入尾静脉时, 由于负压, 血液会自动流入真空管。从尾静脉取出针头后, 由于真空, 导管堵塞的血液会流入收集的真空管。
以下提示对于该方法的成功应用非常重要。首先, 每只老鼠的体重应达到或超过40克, 以减少穿刺和获得足够血液的难度。其次, 在血液收集失败的情况下, 实验者应尝试慢慢拔掉针头, 直到血液继续流出。第三, 重要的是要延长尾巴, 以避免血液采样过程中的任何运动。轻轻握住针头有助于保持针尖在静脉中, 因为老鼠尾巴移动。第四, 如果血液在采集过程中停止流出, 应及时调整针头角度。为了避免针刺中的凝血, 如果血液在15秒后停止流出, 则应选择另一个穿刺位置。最后, 建议两名操作人员在使用这一技术收集小鼠血液时进行合作。
总之, 采用真空采血方法在小鼠身上是安全、可行、易于实践的。这种方法可以频繁地从非麻醉小鼠身上取样有足够血量的血液。
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作得到了中国湖北省自然科学基金赠款的支持 [批准号: 2018cfb761]。
Materials
| Double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 20163151718 | 22G (0.7 mm x 25 mm) |
| Eyeglass magnifier | Vergroberung | 1.5x | |
| Normal salt diet for mice | Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study. | ||
| Plastic holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 35-45 g rat hoder | |
| SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. | |
| Syringe | Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China | 20160911A | 1 mL (Matching needle size: 0.45×16RW LB) |
| Vacuum blood collection system | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 20171222 | 1 mL (Φ12.4×L75) |
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