Basso costo protocollo di analisi dell'impronta e appendere casella Test per topi applicato lo Stress cronico ritenuta
Summary
Il protocollo di basso costo consistente di analisi dell’impronta e appeso prova box dopo lo sforzo del fermo è utile per valutare i disordini di movimento di modello del topo.
Abstract
Dispersione di andatura è osservata frequentemente in pazienti con disordini del movimento. In modelli murini utilizzati per disturbi del movimento, analisi del passo è importante test comportamentali per determinare se i topi imitano i sintomi dei pazienti. Deficit motori sono spesso indotte da stress quando nessun fenotipo motore spontaneo è osservato nei modelli del mouse. Pertanto, analisi del cammino seguito da carico sarebbe un metodo sensibile per la valutazione del fenotipo motore in modelli murini. Tuttavia, i ricercatori devono affrontare il requisito di un apparecchio costoso per ottenere risultati quantitativi automaticamente da analisi del passo. Per lo stress, lo sforzo di caricamento con metodi semplici senza costosi apparati necessari per scosse elettriche e costretto in esecuzione è auspicabile. Di conseguenza, introduciamo un protocollo semplice e a basso costo, costituito da analisi dell’impronta con carta e inchiostro, appeso test box per valutare la funzione di motore e carico di stress definiti da fermo con un tubo conico. Il deficit del motore dei topi sono stati correttamente rilevati dal presente protocollo.
Introduction
Disordini di movimento sono definiti come disturbi del sistema nervoso mostrando un eccesso o scarsità di movimenti volontari o automatico1. In particolare, disturbi dell’andatura sono frequentemente documentato tra i pazienti con i disordini di movimento2,3,4. Pertanto, l’analisi del passo è un idoneo test comportamento per la validazione di modelli animali di disordini di movimento. Nei topi, sono state effettuate analisi automatizzata di andatura per camminare a velocità naturale5 ed a velocità regolabile da tapis roulant6,7. Queste analisi forniscono risultati quantitativi di andatura automaticamente. Un metodo alternativo per rilevare la dispersione di andatura è chiamato analisi dell’impronta. Dopo l’etichettatura le parti inferiori dei piedi con inchiostro, topi cammino sulla carta, e le impronte vengono analizzate. Inizialmente, vaselina e polvere di carbone sono stati utilizzati per visualizzare l’ impronta8e quindi sono stati sostituiti da inchiostro il poligrafo carta9 e dello sviluppatore fotografico su carta fotografica10. Un metodo più economico e meno tossico utilizzando inchiostro e carta rispetto agli altri metodi rimane ad oggi11. Analisi dell’impronta sono meno costoso rispetto con analisi automatica5,6,7 e sarebbero utile per valutare i disordini di movimento in modelli murini per i ricercatori senza fondi di ricerca abbondante .
L’impiccagione prova box è una sorta di quattro test di attaccatura degli arti mediante filo gabbia coperchio12 e rete metallica schermata13. La scatola è un apparato con coperchio girevole maglia sulla parte superiore del riquadro lungo una barra centrale. Oltre alle analisi del passo, il test può essere a buon mercato e facilmente eseguito. Di conseguenza, abbiamo condotto l’impiccagione test box per valutare la forza prensile ed equilibrio, inoltre per l’analisi dell’impronta in questo protocollo.
Lo stress induce i sintomi di disturbi di movimento14,15. I deficit del motore sono spesso indotte da diversi stress cronico anche quando nessun fenotipo motore spontaneo è osservato nei modelli del mouse di un disordine di movimento16,17,18. Moderazione è uno dei metodi comunemente usati per lo sforzo di caricamento nei topi, perché l’animale non è fisicamente danneggiato19 e il costo è inferiore rispetto ad altri metodi come scosse elettriche con apparecchio dedicato e costretto in esecuzione con l’uso di un tapis roulant. Ritenuta da un tubo, che è eseguito da confinare un topo in una provetta conica forata 50 mL, è più facile di altri metodi come filo maglia colino, arto nastrata e avvolgimento di animale con garza (Recensito il20). In questa carta, riassumiamo i protocolli dell’impronta analisi e il riquadro sporgente test dopo ritenuta da un tubo. Questo protocollo ci aiuterebbe ad utilizzare modelli murini di disordini di movimento senza fenotipo motore spontanea.
Protocol
Representative Results
Discussion
L’analisi dell’impronta e il riquadro sporgente di test sono test comportamentali semplici e poco onerose per la funzione motoria dei topi. I fenotipi di neurobehavioral in diversi modelli di mouse sono stati rilevati con successo da queste prove. Ad esempio, accorciato la lunghezza della falcata nella sclerosi laterale amiotrofica24, maggiore lunghezza della falcata asimmetrica all’atassia-telangiectasia25, maggiore lunghezza di sovrapposizione nella malattia di Huntington…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato supportato da JSP (Japan Society for Promotion of Science) KAKENHI (sovvenzione per Scientific Research C), concedere numero 18K 07373 (A.S.) e sovvenzioni per le Università Private.
Materials
| Hanging box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/ | |
| Marking pen | ZEBRA | MO-120-MC-BK | |
| Goal box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ | Accessory for apparatus of balanced beam test |
| Boxes | O’hara & Co. | – | Side wall of runway |
| Black ink | Shin-asahi | – | |
| Red ink | Maruyamakogyo | BC-6 | |
| Disposable Petri Dish | Corning | 351008 | Petri dishe (35 mm in diameter) |
| Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 | Askul | 701-712 | White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm) |
| 50 mL Conical tube | Corning | 430829 | |
| Square drill | KAKURI Corporation | DIY FACTORY (K32-0313) |
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