体外检测评估神仙体头三个月滋养细胞细胞系的迁移、入侵和增殖

胎盘发育是建立妊娠的关键一步, 影响孕产妇和胎儿的健康。然而, 这一过程发生的机械基础并不完全了解。细胞迁移是一个重要的生物过程, 有助于怀孕期间胎盘的建立和功能。囊胚植入后, 滋养细胞分化为绒毛滋养细胞, 覆盖绒毛膜的表面, 参与气体和营养交换, 以及从绒毛中迁移出来的外生滋养细胞 (evt)并侵入母体和血管 1.evt 的迁移对于重塑产妇螺旋动脉和建立子宫胎盘循环以支持胎儿生长^{至关重要 2}。妊娠期间滋养细胞入侵不足会导致胎盘发育异常, 并可能导致妊娠并发症, 如先兆子宫炎、妊娠期高血压、子宫内生长受限和早产^{3, 4}. 我的工作是什么？因此, 了解影响滋养细胞运动的因素对于确定正常胎盘所需的途径至关重要。

滋养细胞迁移是由一个复杂的信号分子网络控制的, 包括生长因子、细胞因子、激素和血管生成因子⁵。由于在体内研究胎盘的局限性, 利用永生人类滋养细胞系进行体外检测对于确定导致滋养细胞运动的因素至关重要。划痕和入侵检测已被广泛用于定量评估单个分子在滋养细胞迁移^中的作用 6^{,7, 8.}然而, 虽然同时研究细胞入侵的变化可能会导致迁移的变化, 但这两种检测并没有考虑到可能导致细胞迁移率改变的其他机制。例如, 细胞增殖率的降低可能会导致可供迁移的细胞减少。

在这里, 我们描述了使用划痕、细胞增殖和细胞入侵检测来评估滋养细胞迁移的体外定量方法。在划痕试验中, 在细胞单层中创建一个均匀的伤口, 并通过对伤口内细胞的大小和密度进行自动延时成像来测量细胞的迁移以填补缝隙。细胞增殖分析的基础是计算每个时间点的细胞与已知的细胞起始量的比率。在细胞浸润试验中, 细胞被播种在细胞外基质包膜细胞培养插入室 (如 tranwell) 上, 并计算出通过细胞外基质侵入的细胞数量对趋化剂的反应。

划痕检测是一个简单而有效的工具, 可用于确定不同的环境条件如何影响细胞迁移。增殖和入侵检测随后可用于确定细胞增殖和入侵对细胞迁移总体变化的贡献。这些检测方法总体上提供了对生物过程的可靠测量, 这些过程可能有助于细胞的运动。在所述检测中使用了两个不朽的头三个月滋养细胞细胞系: swan.71 (Swan.71) 和 htr-8/svneo^9,10。然而, 这些检测也可以优化用于其他细胞类型, 以识别细胞迁移和入侵的关键模块。