多重蛍光免疫組織化学染色、イメージング、およびリンパ腫の組織学的試料中の分析

リンパ系腫瘍はリンパ球の無秩序の悪性増殖によって引き起こされます。これらの細胞は、免疫システムの重要なコンポーネントし、骨髄、リンパ節、脾臓、その他粘膜関連リンパ系など、プライマリとセカンダリの免疫臓器にローカライズします。リンパ腫瘍は、機能、形態、イムノフェノ タイプ、遺伝的特徴、臨床症状などの星座に基づいて分類される無秩序の異質グループです。各パラメーターは、役割を果たしている、リネージュ定義の特徴のまま、B 細胞、T 細胞および自然なキラー (NK) 細胞¹から派生した腫瘍を認識する WHO 分類体系のための基礎を形作る。

リンパ腫の分類にキーは、白血球リンパ球²のさまざまなサブタイプの表面マーカーに対する抗体の評価をされています。免疫組織染色 (IHC) は伝統的にそのようなマーカーの分析のために使用されているし、^{顕微鏡的に視覚化できる細胞・組織ベースの分子を検出する抗体抗原認識の原則に基づいて3}ですしかし、従来明視野発色多重 IHC によって 1 枚のスライドに複数のターゲットの同定、制限単一ティッシュ セクションで複数の色信号を確実に区別するために困難なことが多いため、特に。非常に低い式⁴抗原の視感評価と染色の定量化は、主観的、分析およびデータ解釈⁵の変動を引き起こすことができます。

そのため、ホルマリン固定のパラフィン埋め込まれた (FFPE) サンプルに従来の IHC はリンパ腫のような多様な免疫学的疾患の複数のターゲットを同時検出するため不可能です。さらに、周囲の免疫細胞から腫瘍性リンパ球を区別する正確ではありません多くの場合です。これはリンパ腫における新規バイオ マーカーの関連性を見て研究を妨げています。多重蛍光 IHC (mf IHC) をこのコンテキストではそれにより抗原共発現の定量的評価と限定を節約しながら、精度の高い空間的な関係のサンプル^6,に有望な代替手段を提供しています^7.このイメージング技術は、デジタル画像解析ソフトウェアと提携して、データ解釈はさらに効率的、腫瘍微小環境の不均一性^8,9の研究が容易になります。このプロトコルの多重化通信方式パスチラミドシグナル ベースの蛍光 (IF) 信号を増幅するのに適用され、あらゆるホスト種であっても同じ種^5,7の開発から IHC 検証抗体と互換性のあります。^,10. パスチラミドシグナル ベースのプロトコルは、興味のティッシュに fluorophore の直接接合複数汚れの逐次適用を可能にする、各ステップの後、一次および二次抗体を取り除くことができますので、なし抗体の交差反応します。

多重化された戦略は、ターゲットとリンパ腫におけるバリアント免疫学的パターンを特定することにより予後の治療成績を予測するため役に立つでしょう。多重蛍光 IHC の T および B リンパ球のマーカーと T 濾胞ヘルパー T 細胞血管免疫芽球性リンパ腫 (AITL)、マーカー パネルの調査のため研究室に適用されている積極的なによって臨床的に特徴づけられる末梢性 T 細胞リンパ腫のサブタイプ行動と腫瘍の不均一性の¹¹。このメソッドの有用性を示したびまん性大 B 細胞リンパ腫 (DLBCL)、ブルートンのチロシンキナーゼ阻害の潜在的な治療上の使用を示唆している同時 C-MYC と BCL 2 式と B 細胞受容体の信号を増加しました。¹².

ここで適切な管理組織の選択に抗体検証から全体のプロトコルについて述べるし、リンパ腫 FFPE を用いた多重スキャンを使用して染色スライドの最終的な分析と組織自動定量病理学画像システム。