הבנת את תגובות התנהגותיות של השעיה של ביואלו-מזיני משתנים סביבתיים, כגון חמצן מומס, יכול להסביר כמה תהליכים במערכת האקולוגית. פיתחנו צג מד מתח זול, מבוססי המעבדה, (SGM) כדי למדוד את התגובות gape שסתום של צדפות, Crassostrea virginica, כדי רכיבה והולכת היפוקסיה ו- pH מחזורית.
צג gape שסתום זולה, מבוססי המעבדה, מד מתח (SGM) פותחה כדי לפקח על אופן הפעולה של שסתום gape של רכיכות של ביואלו בתגובה היפוקסיה רכיבה והולכת. גשר ויטסטון היה מחובר מאבחנים המתח חוברו המעטפת של צדפות (Crassostrea virginica). האותות מוקלטות המותר עבור פתיחת וסגירת של צדפות שיירשמו ברציפות במשך יומיים תקופות המושרה בניסוי רכיבה והולכת והתקפת רכיבה והולכת שינויים ב- pH. כאן, אנו מתארים פרוטוקול לפיתוח צג מד מתח זול, לתאר, בניסוי מעבדה דוגמה, איך השתמשנו בו כדי למדוד את התנהגות gape שסתום במזרח צדפות (virginica ג), בתגובה על אופניים והולכת היפוקסיה ו שינויים מחזוריים ב- pH. שסתום gape נמדדה על צדפות נתון מחזורית חמורות מחוסר חמצן (0.6 מ ג/ליטר) מומס תנאים חמצן עם או בלי שינויים מחזוריים pH, מחזורי מתון ובשפתיים (1.7 מ ג/ליטר) התנאים ותנאי normoxic (7.3 mg/L). נדגים כי כאשר צדפות מפגש מחזורים והולכת חוזרות ונשנות, הם במהירות מקליפתם בתגובה היפוקסיה חמורה ולהסגר עם פער-זמן כדי היפוקסיה מתונה. כאשר normoxia משוחזר, הם במהירות לפתוח שוב. צדפות לא הגיב בתנאי pH מחזורית יונחו על והולכת על אופניים היפוקסיה חמורה. -תנאים חמצן מופחתת, יותר משליש הצדפות סגור בו זמנית. נדגים צדפות להגיב רכיבה והולכת היפוקסיה, אשר יש לקחת בחשבון בעת הערכת ההתנהגות של צדפות כדי התפרקה חמצן. השסתום SGM יכול לשמש כדי להעריך את התגובות של רכיכות של ביואלו שינויים חמצן מומס או מזהמים. מאבחנים המתח gape שסתום של מי הים איטום טכניקות כדי חותם טוב יותר צריך שיפור נוסף כדי להגדיל את תוחלת החיים של החיישנים.
היפוקסיה, קרי, התפרקה ריכוז חמצן [] מספיק נמוך כדי להשפיע לרעה ביולוגית, תהליכים אקולוגיים אבל לעתים קרובות באופן פונקציונלי מוגדרת כ [עושה] של < 2 mg / L1ו אנוקסיה (פונקציונלית מוגדרת גם [עושה] של 0.0-0.2 mg/L) מתרחשות בתדירות גבוהה יותר, באופן חמור במים לאורך החוף של העולם, שפכי נהרות,2,עמוק באוקיינוס3 , הם לעיתים קרובות הכבידו על ידי הגדלת אאוטריפיקציה4,5. עם מידה אריאל גדל והולך של היפוקסיה ו אנוקסיה, macrofauna אינם מושפעים לרעה ולאבד בית גידול בהיקף ובאיכות בית גידול. שינוי האקלים הוא חזה להחמיר אנוקסיה והתקפת6.
שפכי נהרות מרובדת, מזין מועשר רבות כגון ארצות הברית, מפרץ צ’ספיק, היפוקסיה עונתיות מתמיד תתגלה, יכול להתרחש שנה אחרי שנה2. בנוסף, והולכת-רכיבה על אופניים של היפוקסיה תכופים, שפכי נהרות כמו מפרץ צ’ספיק ובמקומות אחרים, מתרחשת מאוחר במהלך הלילה או בשעות הבוקר המוקדמות ב-7,הקיץ8.
רוב המחקרים התמקדו על ההשפעה של חשיפה מתמשכת של אורגניזמים נמוך [עושה] ועל הסובלנות שלהם אנוקסיה והתקפת9,10,11,12,13,14 . יתר על כן, מחקרים יש הביט משמרת בקנה מידה גדול בהרכב המינים הפצות, abundances ו מינים בתגובה המורחבת נמוך [עושה]4,15. לעיתים קרובות מינים רגישים מאוד נמוך [?], מתים בגושים,16 הסטה המינים הנותרים פאונה צעיר, קטן-מימדים, קצרת ימים כמו, לדוגמה, נמצאו על המערכת האקולוגית לואיזיאנה-טקסס מדף4.
שינויים התנהגותיים לפניהן בדרך כלל הקהילה התמוטטות17 , מחקרים דיווחו על תגובות התנהגותיות של האורגניזמים המורחבת נמוך [עושה]4,16,17,18,19 ,20,21,22,23,24,25. מחקרים אלו, עם זאת, לא להתמקד על התגובות של אורגניזמים רכיבה והולכת חשיפות של היפוקסיה, אופי המשתנות [עושה] זמינות בשפכי נהרות.
רכיבה והולכת היפוקסיה, שפכי נהרות רדודים קיבל מודעות גוברת והולכת כמו לימודי לפקח [עושה] יותר לעתים קרובות במהלך ימים עם sondes שפכי נהרות16,26. המים יכולים להישאר ובשפתיים שעות בסוף הלילה או בשעות הבוקר המוקדמות בקיץ כאשר אין פוטוסינתזה ביצירת חמצן במהלך הלילה אבל הצורכים חמצן גבוהה נשימה אירובית7,16. גם נמצא כי הגאות והשפל מושפעים והולכת של רכיבה על אופניים מהתנאים לעשות נמוך עם הכי קיצוני קיצון נצפו כאשר הגאות והשפל נמוך בד בבד עם סוף הלילה27. רק לאחר מספר שעות של היפוקסיה [עושה] לחזור. normoxia7,16,28 במחזור יומי.
כדי לקבוע את התגובה ההתנהגותית של virginica ג רכיבה והולכת היפוקסיה ו- pH לנו פיקוח על פתיחת וסגירת המסתמים של צדפות נחשפים מעבדה המושרה והולכת אופניים של [עושה] ו מחזורית pH. חיוך התגובות של צדפות שימשו לגלות בתנאי סביבה קיצוניים. שסתום סגר של צדפות בתגובה מזהמים29,30,31, אצות רעילות32,33,34, זיהום תרמי35,36 , 37,38,39,40מאכיל המשטר39,41,37,emersion42, photoperiod43 להקטין את כמות המזון , 44,45,pH46, ו pH משולבת, חמצן מומס47 נמדדו. טכניקות gape, לדוגמה, כללו תצפיות ישירות48,49,13, מדידות רציף באמצעות מתגים ריד, מגנטים (צג Dreissena)50, או סיבים אופטיים חיישנים 51 דורשים מים צלולים. בנוסף, מגנט, שדה מגנטי חיישנים הול כוח שימשו ללמוד מאסל gape זווית52,53,54,55, ומערכת השראה אלקטרומגנטית בתדירות גבוהה כי ניתן למדוד המרחק בדרגות שונות בין שני סלילים חשמליים המודבקות על השסתומים כבר בשימוש56,–57,–58,–59. מקור מתח גבוה נדרש עבור מערכת השראה אלקטרומגנטית, כוח חייב להימסר לשני הצדדים מעטפת52. מערכת זו היא גם זמינים מסחרית כמו “MOSSELMONITOR” (http://mosselmonitor.nl/).
על תקציב הדוק מחקר, אנחנו נבנה צג מד מתח זול (SGM) למדוד באופן רציף את הצדפה gape מעל והולכת הנוצרות על-ידי מעבדה רכיבה על אופניים של [עושה] ו- pH, תחת תנאי ראות נמוכה. המערכת שלנו הוא גם הרבה יותר. מערכות מתחרות, המאפשר חיות רבות להיות מעקב במהלך ניסוי פשוט. אנחנו רוצים לקבוע את תגובות התנהגותיות של virginica ג והולכת רכיבה על אופניים חמור ([] = 0.6 מ ג/ליטר) היפוקסיה עם שליטה pH (pH = 7.8) ו- pH אופניים (pH = 7.8-7.0), בהתאמה, gape התגובות מתון ([] = 1.7 מ ג/ליטר) היפוקסיה. יתר על כן, רצינו לקבוע אם צדפות מסוגלים להגיב במהירות לשינויים [] מעל והולכת אופניים, איך הם מגיבים normoxia יחזור לאחר אירוע ובשפתיים. אולי צדפות המותאמים בצורה אופטימלית לסביבת המשתנות במהירות המצויה שפכי נהרות רבים16,27 איפה הם גרים. בעוד צגים gape שסתום מורכבים יותר זמינים, SGM מציעה טכניקה זולה המאפשר מדידות רציפה של שסתום gape במים גם בתנאי ראות נמוכה.
איור 1. גשר ויטסטון עבור המנגנון gape שסתום. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
חיישנים מד המתח המשמש לניטור של ביואלו gape הם סרטים resistive בדפוס בפיתול על פוליאימיד גיבוי. כמויות קטנות של זן לווסת את ההתנגדות של החיישן. ביואלו הגמשת gage את המתח כאשר זה בולט החוצה גרימת שינוי ההתנגדות של החיישן. אנחנו מועסקים גשר ויטסטון nulling, מאוזן, לכל ערוץ של ביואלו כמוצג באיור 1 כדי למדוד את השינוי בהתנגדות החיישן. גשר ויטסטון nulled מאת נגד משתנה ומאפשר רווח גבוהה למדי להיות מועסק על ידי אוגר נתונים. גשר ויטסטון הוא שיטה סטנדרטית למדידת במדויק על התנגדות לא ידוע באמצעות יחס של התנגדות ידוע סטנדרטי, מודד. ההיסטוריה של טכניקה זו הישנה מאוד הנדונה Ekelof (2001)60. אנחנו השתלב 12 ערוצים, כל אחד עם גשר ויטסטון משלו nulling נגד משתנה, יחידת מד המתח צג (SGM).
מחקרים טיפוסי פוקוס על הרציף, מורחב פרקי זמן של חמצן נמוכה תנאים ואת התגובה, לעיתים קרובות הנמדדת של ההישרדות, של בעלי חיים. אולם, כיום, הבנתנו תגובות התנהגותיות של חיות רכיבה והולכת היפוקסיה היא מינימלית63. לכן, מחקרים נוספים צריכים להתמקד אופן הפעולה של אורגניזמים בתגובה היפו…
The authors have nothing to disclose.
אנו מודים מלינדה Forseth על לקיחת תמונות של צדפות ומדידת שלהם רוחב gape ImageJ. אנו מודים דניס Breitburg לגישה באקווריום עם והולכת רכיבה על אופניים היפוקסיה ותנאי pH מחזורית. אנו מודים המרכז לחקר הסביבה הסמית’סוניאן, אדג’ווטר, מרילנד, על שטח של הניסויים. הניסויים היפוקסיה, במימון של לאומי אושיאניק ואת האטמוספירה המינהל – מרכז למענק במימון מחקר האוקיינוס החוף לא. NA10NOS4780138, הקרן Hunterdon הסמית’סוניאן כדי דניס Breitburg. השסתום gape מדידות במהלך היפוקסיה הניסויים היו ממומן על ידי מענק שיפור סגל על ידי וושינגטון לקולג. אלקה טי פורטר.
Campbell CR 10x data logger | Campbell Scientific, Logan, Utah | Or other data logger. At Campbell the CR 10X has been replaced with the CR 1000 | |
Campbell CR 10x multiplexer | Campbell Scientific, Logan, Utah | Data logger needs to have space for 12 channels | |
Dsub connector male crimp pins | TE Connectivity | 205089-1 | pins for gape sensor leads |
PCA tape | Micro Measurements Corp, NC | To seal the strain gauge | |
Duro Quick Gel | Ace Hardware | Superglue | |
SG13/1000-LY43 or LY41 | Omega Engineering Inc., Stanford, CT | Strain gauges | |
32 AWG (7/40) teflon Alpha wires | AlphaWire, Elizabeth, NJ | 2840/7 | Sensor cables, different colors are available |
1/16" heat shrink tubing | Qualtek | B01A3QKKO6 | To seal the leads of the sensor cable |
Weller WES51 Analog Soldering Station | Amazon | Lots of soldering, need a good soldering iron. https://www.amazon.com/Weller-WES51-Analog-Soldering-Station/dp/B000BRC2XU/ref=sr_1_23?s=hi&ie=UTF8&qid=1505654295 &sr=1-23&keywords=soldering+iron |
|
Rosin Soldering Flux Paste | Amazon | Needed for soldering | |
60-40 Tin Lead Rosin Core Solder Wire | Amazon | Needed for soldering | |
Aquarium sealant | Home Depot | Attach sensors to bivalve | |
PC Laptop | Any old PC to run Campbell gape program | ||
heat gun | Amazon | shrink shrink tubing | |
Drill | Hardware store, Amazon | for twisting wires to make sensor cables | |
AC to DC power module | Acopian | DB15-30 | Wheatstone bridge power supply |
Poteniometer | Clarostat | 733A | Wheatsone bridge nulling |
isolating BNC connector | Sterren Electronics | "200-148 | Wheatstone bridge output for multimeter |
Fused AC receptical panel module | Adam technologies | IEC-GS-1-200 | Wheatstone bridge power supply connector |
976 ohm 1% resistor | Vishay Dale | CMF50976R00FHEB | Wheatstone bridge resistor |
1 kohm 1% resistor | Vishay Dale | CMF501K0000FHEB | Wheatstone bridge resistor |
Potentiometer scale dial | Kilo International | 462 | 10 turn dial for nulling potentiometer |
DB25 male panel connector | TE connectivity | 1757819-8 | Data logger connector on Wheatstone bridge |
DB25 female panel connector | TE connectivity | 1757819-8 | Sensor connector to Wheatstone bridge |
perforated circuit board | Vector electronics | 64P44WE | circuit board for mounting of bridge components |
enclosure | Hammond Manufacturing | 1444-29 | Enclosure for sensor readout electronics |