絞扼性損傷マウス自動歩行分析
Summary
動物モデルでは神経因性の痛みの反応の正確な評価は、痛みの病気の病態を調査し、新しい鎮痛薬の開発に不可欠です。後肢足自動歩行解析システムによって齧歯動物の感覚機能は、機密かつ客観的手法を提案します。
Abstract
Von Frey テストは、神経因性疼痛の動物の感覚の機能を調べるため広く使用されている古典的な方法です。ただし、熟練した、経験豊富な実験者の要件と主観的データなどいくつかの欠点があります。さまざまな変更まで、von frey 毛方法の改善が、それはまだいくつかの制限があります。最近の報告では、歩行分析が神経因性動物からより正確で客観的データを生成することを示唆しています。このプロトコルはマウスの神経因性疼痛の程度を判断する自動歩行分析を実行する方法を示します。馴化の数日後、マウスは自由に足跡を照らすためのガラスの床の上を歩くを許されました。足印刷、スイング時間足等の角部などの様々 な歩行パラメーターの自動解析とビデオ クリップを足跡と歩行の定量化を行ったし、
本研究の主な目的は、自動歩行分析の方法論を記述して、簡単に von Frey フィラメントを使用して古典的な感覚のテストからのデータを比較することです。
Introduction
外傷、代謝異常、炎症、感染症、虚血による神経系の病理学的変化や病変や疾患の直接的な結果として生じる痛みとして定義されている神経因性疼痛の時折発生する自己免疫疾患1体性感覚系に影響を与えます。神経因性疼痛は通常、我慢、残念なことに、従来の鎮痛薬一般的に生産しない十分な痛み救済2。神経因性疼痛の主要な機能には、自然と刺激に対する反応 (すなわちアロディニア、痛覚過敏) の痛みが含まれています。アロディニアは、軽いタッチや暖かい刺激などの通常非痛み刺激に発生した侵害受容応答です。痛覚過敏は、有害な機械および/または熱刺激3に強化された痛み応答を示します。これらの 2 症状の両方は非常に患者さんの生活の質を損なう、穏やかな触覚刺激により誘発される機械的アロディニアが最も悪化症状ソフト コンタクトは日常生活の中で避けにくいので。
調べるための基本的なメカニズムと神経因性疼痛の治療のための新しい鎮痛薬、痛み反応の精密測定が不可欠です。多数の神経因性疼痛モデル動物が開発した後肢に侵害受容反応その高いアクセシビリティ4,5,6、7のための地域の足。したがって、ほとんど痛み応答評価されてきた、後肢の足底または背側表面に von Frey フィラメントなどの特殊な器具を使用して機械的刺激を適用することによって。最もよく使用される方法の 1 つは、アップ、ダウン ・ ディクソンによって記述方法8と後変更バージョン9,10。しかし、非常に熟練した、経験豊富な実験者は von Frey テストを実行する必要が、結果は主観的な可能性があります。
自動歩行解析システムは、齧歯動物を自由に移動で歩くの様々 なパラメーターを測定することにより、神経疾患、神経筋疾患を調べることができます。神経損傷モデル動物の様々 な侵害受容性といくつかの治療の鎮痛効果は、痛み刺激11,12,13,を追加することがなく評価できます。14. この解析システムなど静的および動的歩行パラメーターの検出することができます: 印刷領域 (床と接触する完全な足印刷の領域) の足、足の強度 (足との接触面積の平均強度)、ストライド長 (同じ足の連続配置間の距離)、姿勢相 (単一の後肢の接地の期間)、ステップ シーケンス (順序で、4 つの足が床に配置されます)、(遊脚相の期間)、スイング、スイング速度 (計算ストライド長期間をスイングと 1 秒あたりのピクセル数で表されます)。本稿では、分析システムの使用方法を示し、絞扼性損傷 (CCI) 神経因性マウスを用いた von Frey テストとデータの簡単な比較を提供しています。
Protocol
Representative Results
Discussion
現在、von Frey フィラメントを用いた機械的アロディニアの測定は、最も広く触覚過敏症を示す痛みの動物モデルでメソッドを使用です。神経因性疼痛の動物モデルが開発され続けている、よう改良された8,9,10,15感覚機能の評価の方法論もされています。これらのレポートに、これらの変更は、古?…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は忠南大学、韓国研究所の東洋医学 (KIOM) と韓国健康技術総合研究所の助成金によって支持された & 開発プロジェクトを通じて、韓国保健産業開発研究所 (KHIDI)、厚生省によって資金を供給& 福祉、大韓民国 (許可番号: HI15C0007)。
Materials
| 0.9% Saline | JW Pharmaceutical | N/A | Vehicle for drugs |
| 1ml syringe | BD Plastipak | 300013 | Injecting device |
| 2, 2, 2-tribromoethanol (97% purity) | Sigma | T48402 | Anesthetic |
| 2-methyl-2-buthanol (99% purity) | Sigma | 152463 | Solvent for 2, 2, 2-tribromoethanol |
| Catwalk Automated gait analysis system | Noldus | N/A | Automatic analysis software of aniaml gait |
| Chromic catgut (4-0 thickness) | AILEE | C442 | Ligature to make chronic constriction injury on the sciatic nerve |
| Gabapentin | Sigma | Y0001280 | Analgeisc, Used as a positive control drug in this study |
| Graefe Forceps | F.S.T | 11051-10 | Surgical instrument |
| Heating Pad | DAESHIN ELECTRONICS | M-303AT | Regulation of body temperature |
| ICR Mouse | Samtaco | N/A | Experimental animal |
| Mersilk (3-0 thickness) | ETHICON | W598H | Suture material for surgical closure of skin |
| Micro-Mosquito | F.S.T | 13010-12 | Surgical instrument |
| Micro-scissors | F.S.T | 14090-09 | Surgical instrument |
| Needle holder | F.S.T | 12002-12 | Surgical instrument |
| Povidone Iodine | Firson | N/A | Disinfectant to prevent infection after surgery |
| Scalpel blade | F.S.T | 10010-00 (#10) | Surgical instrument to make an incision |
| Scalpel handle | F.S.T | 10003-12 (#3) | Surgical instrument to make an incision |
| Von-Frey filaments | North Coast | NC12775-99 | Measurement device to test sensory function for mechanical stimulation |
Referenzen
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