Environmental Screening von Aeromonas Hydrophila, Mycobacterium spp. und Pseudocapillaria Tomentosa im Zebrafisch-Systeme

Einschränkungen der Techniken, wichtige Schritte und Fehlerbehebung:

Alter, Geschlecht, Belastung und Dauer der Exposition der Wächter sind nicht standardisiert. Dies ist in Tabelle 1dargestellt. Es gibt sehr wenig Screening von Fischen unter 6 Monate alt oder Alter Fisch. Möglicherweise gibt es einige Krankheitserreger, die Jungfische zu beeinflussen, da gibt es einige Krankheitserreger, die häufiger in der älteren Bevölkerung^10,18,19,20sind. Ebenso gilt das Geschlecht nicht in der Auswahl einiger Sentinel-Gruppen trotz einige berichten, gibt es eine Gender-Bias für einige Krankheitserreger²¹. Die vorgeschlagene Technik versucht, diese Probleme anzugehen, obwohl die Wahl der Sorte nach einem spezifischen Erreger erfolgen könnte, um zu überwachen. Z. B. TU ließe sich mit der Erkennung von Mycobacterium spp.^12,22, aber besteht die Gefahr, die die Wächter dann als ein Reservoir oder Anzeige klinische Zeichen fungieren würde. Hinsichtlich der Dauer der Exposition erhöht der Ansatz der Zebrafisch International Resource Center¹⁰ die Chancen, Krankheitserreger zu erkennen, die mit einer unzureichenden Kontamination entgehen lassen könnte. Die Notwendigkeit einer über längere Zeit impliziert, dass Wächter nicht verfügbar sind. Die Zugabe von der Umweltproben ermöglicht eine gewisse Flexibilität und die Vermehrung von Screening-Veranstaltungen. Zum Beispiel kann Probenahme alle zwei Monate mit einem 4-monatigen Intervall zwischen jeder Screening-Methode erfolgen. Dadurch kann dem Ablauf der Zeit, bis ein neu eingeführten Erreger erkannt wird.

Die Umwelt Screening-Techniken beruhen auf der Nachweis von Krankheitserregern in der Umwelt. Die Erreger sind Schuppen der Fische und daher im System Wasser verdünnt. Die Möglichkeit der Erfassung der Krankheitserreger durch Wasser-Filtration-²³ wurde nicht geprüft. Die Methoden, die wir beschreiben, sind nur wirksam, wenn Krankheitserreger genügend Zeit gegeben werden, zu Fisch und Biofilm zur Erreichung einer Schwellenwerts der Kontamination Detektion ermöglicht vermehren. Diese Einschränkung der Techniken wird durch eine kritische Auswahl der Probenahmestellen minimiert: der Schlamm im Tank wird anstatt des Ölwanne Schlamms abgetastet und das Wasser und Biofilm sind an der Oberfläche der Ölwanne und nicht in einem Tank oder Nachfiltrierung probieren. Die Proben aus dem gleichen System sind jedoch unwahrscheinlich, dass die gleichen Ergebnisse. Positive Ergebnisse für p. Tomentosa können bestätigt werden, mithilfe einer anderen Assay (Histopathologie, PCR oder Schlamm-Analyse). Mykobakteriellen PCR-positive Ergebnisse können durch Kultur oder von einem anderen diagnostischen Labor bestätigt werden. Jedoch sind bei der Festlegung einer Gesundheitszustands weiter Proben empfohlen, negative Ergebnisse aus einer ökologischen Siebtechnik bestätigen.

Bedeutung der Technik in Bezug auf bestehende/Alternative Methoden:

Mycobacterium spp. sind häufig in die Umwelt und ihre Anwesenheit im Sumpf nicht vorhersagen, ihre Pathogenität¹². Mocho⁹ zeigte, dass Überwachung Sterblichkeitsraten Schlüssel für die Entwicklungen von gesundheitlichen Problemen zu befragen. Die Verwendung von tierischen Proben bleibt unverzichtbar, eine tierärztliche Untersuchung. Systemüberwachung Erkennung aller gängigen Erreger in einer Einrichtung bedeutet, und dies kann nicht mit die alleinige Nutzung der Umwelt Screening Techniken erreicht werden. Dennoch kann ein Mangel an Sensibilität der Diagnosetools verzögern oder verhindern eine genaue Beschreibung des Gesundheitszustandes. Während der Verwendung der Wächter die Zahl der Fische erforderlich reduziert, eine Mikrobe weit verbreitet in der Bevölkerung zu erkennen, verleiht der Mangel an Sensibilität Gewicht mit einer Kombination von Methoden, einschließlich Umwelt Screening^5,23. In der Tat ist der spezifische Erreger freie Status in der Regel als das Fehlen einer Spezies in der Anlage so definiert, dass Umwelt- und Tierschutz Proben negativ^24,25testen müssen.

Die Ölwanne Tupfer Ergebnisse Ermittlung Mycobacterium spp. zeigen, dass unter Berufung auf Fische, die Proben zu einem falsch negativen gesundheitlichen Status führen können. Die 6 getesteten mykobakteriellen Arten werden beschrieben als Pathogene oder Potenzial Pathogene im Zebrafisch¹⁵ und einige würden nicht behoben werden, indem Ei Flächendesinfektion mit Chlor²⁶ in Quarantäne so routinemäßig durchgeführt. Daher müssen die falsche-negativ einige Konsequenzen für die Mitarbeiter, die Linien zu importieren. Z. B. M. Fortuitum wurde mittels PCR auf Fisch Probe verpasst, aber mehr als die Hälfte der Ölwanne Tupfer PCR es erkannt. Man bedenkt, dass diese Mykobakterien widerstandsfähiger gegenüber Chlor als andere, und ihre Fähigkeit zu wachsen in den Wassersystemen²⁷sind, ist es ein Risiko für die unbelastete einführenden Anlage. Um den Import von Linien zu ermöglichen, müssen Manager Vertrauen und die Gesundheitsberichte der ausführenden Anlage mit den ihrigen zu vergleichen. ICLAS Performance Evaluation Program²⁸ ist der Schlüssel zu diesem Prozess bei Nagetieren. RESAMA Netzwerk meldet den Nachweis von M. Gordonae und M. Mucogenicum in französischen D. Rerio¹¹. Diese Mykobakterien sind nicht in den Feldern der kommerzielle Labors vorgeschlagen, die wir verwenden. Es wäre sinnvoll, das ICLAS-Programm zu erweitern und die diagnostische Assays sowie die Liste der pathogenen Arten²⁹zu harmonisieren.

A. Hydrophila ist auch ein Erreger, die das Potenzial hat, eingeführt werden, bei der Einfuhr von Tieren, obwohl seine Anfälligkeit für Chlor³⁰ ihre Beseitigung während der routinemäßigen Ei Flächendesinfektion wahrscheinlicher macht. Die Ölwanne, Tupfer und Schlamm-Ergebnisse zeigen, dass ökologische Screening verwendet werden kann, um diese Erreger zu erkennen. Andere Bakterien wie Mycobacterium spp. wurden im Klärschlamm durch PCR²³festgestellt. Diese Art der Probe ist besonders relevant, da es den Nachweis von Krankheitserregern Schuppen erlaubt. Eine weitere neue Anwendung ist beispielsweise die Schlamm-Analyse, importierte Fische in Quarantäne für p. TomentosaBildschirm. Der Parasit ist eine Bedrohung des Tieres Gesundheit¹³ und Neoplasie Modelle¹⁶. Darüber hinaus sind Chlorkonzentrationen in Routine Zebrafisch Ei Flächendesinfektion verwendet nicht effizient³¹. Aus diesem Grund scheint die Fähigkeit, die importierte Tiere mit einem einwöchigen Umsatz und ohne irgendwelche Fische Euthanasie Bildschirm sehr attraktiv. Diese Technik kann die Quarantäne und Biosicherheit Regeln beeinflussen, indem Sie erlauben eine Selektierung der Einfuhren. Ein Prozess der Entscheidungsfindung ist dann entsprechend die vorherrschende Erreger in der ausführende Einrichtung, die erkannten Erreger in Proben aus den importierten Fischen und das Risiko einer Beeinträchtigung des Gesundheitszustands des einführenden Anlage¹⁰entworfen.

Zukünftige Anwendungen oder Richtungen nach Beherrschung dieser Techniken:

Auch wenn Routine Quarantäne Behandlung der gewählten Variante ist, kann die Wirksamkeit von solchen Medikamenten^{32,33,34,35,36} mit der Zucht Gerät Schlamm Analyse beurteilt werden. Ganz allgemein könnte die Umwelt Screening verwendet werden, um Verbindungen gegen Bakterien und Parasiten testen zu beseitigen, und namentlich im Fisch Biotop. Eine weitere Nischenanwendung der Umwelt Screening ist zur Überwachung der Erreger Bevölkerung im live feed^37,38. Obwohl die Anwendung dieser Techniken als eine wertvolle Ergänzung zu der Diagnose-Toolbox für die Gesundheitsüberwachung im Zebrafisch-Einrichtungen ist. Durch eine genauere, Kosten und Zeit effizient Definition des Gesundheitsstatus, Sumpf-Tupfer und Schlamm Analyse sind komplementär zu der Sentinel-Surveillance und der routinemäßigen Quarantäne-Praxis. In der Tat ist die Zukunft dieser Techniken ein routinemäßiger Bestandteil jeder aquatischen Laborbericht Gesundheit sein.