Выделение и Обогащение печени подмножествах идентифицированных-предшественников маркером Комбинация Novel поверхности

регенерации печени чаще всего ассоциируется с самообновлению мощностью гепатоцитов. Тем не менее, хронические повреждения печени возникают при активации клеток – предшественников и расширения, которые были связаны с их способностью дифференцироваться в гепатоциты и холангиоцитах ^{1, 2, 3, 4.} Это особенно актуально, так как, во время хронических травм, пролиферации гепатоцитов не является эффективным. Несмотря на многочисленные исследования генетической трассировки , ориентированных на клетки – предшественники, их роль в регенерации печени остается спорным ^{5, 6, 7, 8.} Кроме того, активация клеток – предшественников , было связано с увеличением фиброзной реакции в печени, что вызывает вопросы об их точной роли во время травмы ⁹, ^10.

Гетерогенный характер клеток – предшественников купе уже давно было предложено экспрессии генов исследований, изолированных клеток – предшественников , выражающие одну поверхностный маркер с помощью микродиссекции или клетки методов сортировки на основе ^{1, 11.} Действительно, в последнее время , новая комбинация маркер поверхности с помощью gp38 (podoplanin) однозначно связаны предыдущие одиночные маркеры клеток – предшественников различных подмножеств ^12. Важно отметить, что эти подмножества не только отличались по экспрессии поверхностных маркеров , но также демонстрируют функциональные изменения во время травм ^12.

Несколько моделей на животных были использованы для исследования активации клеток-предшественников и регенерации печени. Кажется , что различные виды травм способствуют активации отличаясь подмножеств клеток – предшественников ^12. Это могло бы объяснить фотenotypic дивергенция протоками реакции , наблюдаемой у человека ^4. Таким образом, сложные фенотипические и функциональный анализ клеток-предшественников являются ключевыми для понимания их роли в травмах и истинное значение протоками реакции при заболеваниях печени.

Кроме комбинаций поверхностных маркеров, решающие различия в протоколах выделения клеток еще больше осложнить выводы , основанные на предыдущих исследованиях ^2. Значительное количество исследований было посвящено роли клеток – предшественников , которые значительно различаются по их протоколу изоляции (например, диссоциации печени (комбинацией ферментов и длительность процесса), средней плотности и скорости центрифугирования) ^2. Оптимизированный метод выделения, обеспечивая лучшую жизнеспособность популяций редких клеток и отражает подмножество состава, была разработана и опубликована недавно ^12. Цель данной статьи состоит в том, чтобы обеспечить более йеболело протокол этой процедуры выделения клеток печени и анализа подмножества для обеспечения надлежащего воспроизведения техники. Кроме того, протокол включает в себя сравнение с предыдущим методом изоляции, чтобы продемонстрировать различия по сравнению с новым протоколом.