果蝇美容行为的量化

果蝇黑腹果蝇 （ D. melanogaster ）是一种强大的天生行为，涉及到多个独立运动程序的协调¹ 。果蝇清除身体的灰尘，微生物和其他可能抑制正常生理功能如视力和飞行的病原体，或导致显着的免疫挑战。在感测和响应机械²和免疫激活^3时 ，苍蝇重复地将腿部在一起或在目标身体区域上摩擦，直到其足够清洁并且梳理进行到身体的另一部分。苍蝇执行在不同的较量疏导运动在很大程度上发生在刻板图案^1,4。优先考虑信号，行为层次变得明显。电路和活动模式已被确定为支持ofa模型，首先发现层次顶部的修饰程序，并抑制随后修饰的身体区域的平行信号⁵ 。最重要的是给头，然后是腹部，翅膀，最后是胸部⁵ 。

黑腹果蝇的修饰程序是研究神经回路，调节分子信号和神经递质的理想系统。例如，神经纤维瘤功能^6的损害， 果蝇脆弱的X型精神发育迟滞蛋白（ dfmr1 ） ^7的损失和双酚A（BPA） ^8的暴露都会导致过度的梳理和类似于神经纤维瘤病的离散人类症状的脆弱X综合征和自闭症谱系障碍和注意缺陷多动障碍（ADHD）的方面。修饰行为也可以是习惯在突变菌株^2上差异化，将该运动程序提供给行为可塑性的研究。可以用果蝇建模的神经学现象的广度需要一种新颖的比较方法来测量苍蝇自身修养的能力。

囊泡单胺转运体和多巴胺和身体中的其它生物胺的相对丰度的联合作用已被证明介导果蝇梳理行为^9,10。八聚胺和多巴胺刺激斩首苍蝇中可比的后腿修饰活性，而八胺的前驱酪胺也触发了较少的梳理⁷ 。四多巴胺受体已经在果蝇 ^{11，12，13，14}被确定</sup>。通过使用本方案中描述的修饰测定方法，我们确定了I型家族多巴胺受体DopR（ DopR，dDA1，dumb ）在后腿修饰行为中的作用¹⁵ 。

疏导可以通过查看清洁度通过该动物可以用标记染料或荧光灰尘^5,16喷粉整个身体后充分培训的程度来间接定量。残留在身体上的剩余灰尘可以用作总体行为的相对标记。经过足够的时间培养后，尘土飞逝，可能会在修饰行为中表现出特定的赤字。随着梳理调查变得更加广泛，方案已经将诸如斩首加入颈部连接神经^10的措施 ，刷毛的触觉刺激以引起修复反应² ，和录像的行为¹⁵ 。修饰的直接观察可以通过使用视觉观察和手动记录特定事件疏导⁴的频率和持续时间来容易地研究。

我们设计了一个十五分钟的梳妆室，可以用3D打印机或激光切割机构造，蓝图设计可用于复制¹⁵ 。该设计使用两个连接的中心板，其具有通过网格分开的开口和分开的两个另外的滑动顶部和底部平板，从中分别装载飞行物和/或染料。经过粉尘飞行时间后，我们将其沉积在乙醇中以溶解染料，并测量该溶液在染料波长处的吸光度。平板读数器可用于多个平行样品，或者单次读取分光光度计可用于单个样品。这种方法最大限度地减少了由处理引起的误差低成本测试法以更小，更具成本效益的规模运行。这种方法是由Julie Simpson和Andrew Seeds率先推出的方法衍生和修改的，他们使用带加热元件的较大梳妆室进行温度敏感电路操作⁵ 。以下方案展示了全身梳理的量化，并显示了用于定量各个身体部位的染料积累的替代方法。我们还提供了WT和DopR突变体之间的样本比较数据，以及用于计算修饰行为的简单性能指标的方法。