Preparazione e valutazione di^99m Tc marcato tridentate chelati di pre-targeting Utilizzando Bioorthogonal Chimica

^99m Tc rimane il radioisotopo dominante utilizzato in medicina nucleare diagnostica, con oltre 50 milioni di procedure di imaging condotti ogni anno in tutto il mondo ^{1, 2, 3.} La maggior parte degli agenti ^99m Tc usati clinicamente sono di tipo perfusione radiofarmaci. Ci sono un numero limitato di composti mirati attivamente in cui ^99m Tc è diretto ad associare un biomarker specifico mediante legatura ad un costrutto targeting. La creazione di ^99m mirata Tc radiofarmaci è spesso ostacolato dalla influenza di ^99m complessi Tc-ligando sulla capacità della molecola targeting impegnare la biomarker di interesse, o gli isotopi emivita non è sufficiente per l'utilizzo con elevate biomolecole peso molecolare come gli anticorpi. Quest'ultimo richiede tipicamente diversi giorni prima immagini sono acquisite in modo che la biomolecola cancellare da non bersaglio tiss UES. Pre-targeting offre un approccio alternativo per superare queste sfide.

Pre-targeting combinato con la chimica bioorthogonal ha dimostrato di essere un modo efficace per sviluppare nuove sonde imaging molecolare sia per fluorescenza e radio imaging ^{4, 5, 6, 7, 8.} La domanda di elettroni inversa Diels-Alder (IEDDA) reazione tra 1,2,4,5-tetrazina (Tz) e derivati -cyclooctene trans (TCO), come mostrato nella Figura 1, ha dimostrato di essere particolarmente efficace ^6. La reazione IEDDA con questi componenti può esibire una rapida cinetica in PBS (k ₂ ≈ 6.000 M ^-1 s ^-1) e alta selettività, che lo rende ideale per in vivo pre-targeting applicazioni ^{9, 10.}

e_content "> L'approccio più comune utilizzato implica la gestione di un vettore targeting TCO-derivati e dopo un periodo di ritardo sufficiente, un tetrazina radioattivo viene somministrato. tetrazines radioattivo sulla base di ¹¹ C, ¹⁸ F, ⁶⁴ Cu, ⁸⁹ Zr, e ¹¹¹ sono stati segnalato ^{11, 12, 13, 14, 15.} al contrario, c'è solo un rapporto di un ^99m Tc-etichettato Tz, che è stato preparato utilizzando un tipo ligando HYNIC richiedere l'uso di co-ligandi per prevenire legame proteico e la degradazione in vivo ^16. in alternativa, riportiamo qui la sintesi di ^99m Tc (I) etichettato tetrazines utilizzando una famiglia di leganti che formano complessi stabili con tridentati ^[99m Tc (CO) _3] ⁺ nucleo.

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Figura 1: La reazione IEDDA bioorthogonal tra tetrazina e -cyclooctene trans. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

La famiglia di leganti preparati contengono chelati tridentati che variano in polarità e la natura del gruppo linker tra la regione di legame del metallo e Tz (Figura 2). L'obiettivo era quello di individuare una ^99m Tc-tetrazina costrutto che potrebbe efficacemente localizzare e reagire con i siti TCO-etichettati in vivo e rapidamente chiaro non collegate, al fine di produrre alta target-to-non-bersaglio rapporti. Per testare i ligandi, un TCO-derivato di un bisfosfonato (TCO-BP) è stato utilizzato ^17. Abbiamo dimostrato in precedenza che il TCO-BP localizza alle aree di metabolismo osseo attivo e può reagire contetrazines radiomarcati in vivo ^18. È un reagente conveniente per testare nuove tetrazines, perché può essere preparato in un'unica fase e gli esperimenti può essere eseguita in topi normali dove localizzazione luogo soprattutto nelle articolazioni (ginocchia e spalle).