套筒技术在主动脉移植小鼠模型中的应用-教学视频
Summary
本文采用套筒技术对小鼠原位主动脉移植模型进行了研究。它是一种非常快速的吻合方法, 可用于血管疾病的研究。
Abstract
采用袖套技术的原位主动脉移植可减少10-20% 的失败率, 降低主动脉的损伤。使用套筒法吻合小鼠主动脉的时间较短, 易于平均20分钟, 允许对同种异体移植进行研究。下面的文章介绍了主动脉移植术在我们的实验室中的应用。小鼠用1.5% 容积异氟醚和100% 氧气的混合物在面罩中麻醉。此时, 肾动脉与其分支之间的动脉段与腔静脉分离, 自由制备, clampedat 近端和远端段, 单丝缝合。在主动脉切除之前, 将含肝素的盐水溶液注入下腔静脉。然后在钳夹之间切断主动脉, 用生理盐水肝素溶液冲洗腔内。采用单丝缝合袖套技术, 在原位移植腹主动脉。
Introduction
正如先前的一项研究指出的, 对小鼠主动脉移植模型给予了极大的关注, 这种模式允许在移植物本身引起的特定血管反应和与 arteriogenic 环境有关的某些系统因素之间进行区分。1,2,3. 在这里扮演关键角色的主要因素是淘汰赛和转基因小鼠的可用性。他们参与这种模式提供了确定和确定新的病理生理学途径的可能性与发展的退行性血管疾病, 如动脉粥样硬化和动脉瘤形成4,5。
值得注意的是, 在移植过程中, 血管内的缺血/再灌注损伤可能会出现。因此, 在术后期间发生的具体问题与移植完整性或意想不到的炎症反应不能排除可能解除退行性血管疾病的病理生理改变3 ,4,5,6,7。套管吻合是一种替代的 end-in-end 方法, 用于动脉吻合直径小于一毫米的血管, 并已成功应用于大鼠的肾和心脏移植, 随后适应主动脉小鼠移植的 Dambrin et al.8,9,10,11。
主动脉损伤使用袖状移植技术是最小的, 技术故障率非常低, 由于它只持续20分钟平均。我们以前的研究结果表明, 在移植使用套筒技术1后, isograft在体内具有优异的功能和结构特性。Dambrin et al.描述在短学习曲线之后, 成功率超过 78%10。并发症, 如血栓形成是罕见的, 例如 Engelbrecht et al.没有观察到血栓形成使用套筒技术在肾移植在大鼠8。
小鼠主动脉移植模型与套筒吻合是一种快速、简便的研究同种异体移植血管反应的工具。这段视频说明了在我们实验室进行的主动脉移植手术。这种移植模型可能有助于确定血管退行性疾病的潜在病理机制, 并可能有助于进一步评价分子和药理干预措施12。
Protocol
Representative Results
Discussion
在本研究之前, 对小鼠其他各种移植模型进行了全面分析3,6,7,10,13,14。采用 Dambrin et al.修饰的袖状技术进行主动脉移植的模型选择, 因为它符合我们的标准, 并显示了与传统的端部缝合方法相比, 套管吻合的高可靠性1,10。
这种技术在许多方面都是有利的, 阻断时间大大减少了手术期间对主动脉损伤的最小化。此外, 还观察到血栓形成率低的情况, 以避免捐赠者和受赠人之间的血管口径可能不匹配。上述观察使该技术非常适合于研究小鼠主动脉移植中的血管疾病。
在一项随访研究中, 超声在移植后8周内进行, 未发现明显的变化。这证实了在手术中对主动脉的任何损伤都是最小的1。
本文提出的嫁接过程保证了移植物完整性和功能的不损害。因此, 这一实验性移植模型可以作为对基因工程小鼠退行性血管病的分子和药理学研究的重要工具。
我们认为, 视频指南可以作为教学材料, 说明使用这个简单的动动脉模型, 它将有助于进一步丰富的辩论中的许多重要问题的血管病理。这种快速吻合的方法可用于研究基因工程小鼠的血管疾病。它也可作为一种改良的动脉瘤模型结合移植。
在过程中有关键点。缝合线本身的放置是最关键的一步。外科医生必须小心, 以避免任何扭转的主动脉通过适当的协调捐助者和受体。在检查吻合口后, 要小心地取下夹具。远端钳位应始终首先释放导致低压保持墙壁在一起之前, 在近端高压侧释放。不正确地跟随释放序列的后果将是流血。
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们要感谢罗马维乔雷克和彼得 Kurdybacha 的出色编辑协助, 以及里昂. 德克尔和乌利 Heuter 的出色技术援助。
Materials
| Halsey Needle Holder | Fine Science Tools | 12001-13 | |
| Dumont #5-45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
| Dumont #5 Forceps – | Fine Science Tools | 11254-20 | |
| Lexer-Baby Scissors | Fine Science Tools | 14079-10 | |
| Castroviejo Micro Needle Holder | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Vannas Scissors | Aesculap, Germany | Typ OC498R | |
| Castroviejo Suture Forceps | Geuder, Germany | 19015 | |
| 6-0 silk black (Silk) | Deknatel, Research Triangle Park NC, USA | 18020-60- FST | |
| 11-0 monofilament (Ethilon) | Ethicon, Norderstedt, Germany | EH7438G | |
| 3-0 polyglycolic acid suture (Serafit) | Serag-Wiessner, Naila, Germany | 60203214 | |
| Isofluorane | Any genericon | ||
| Heparin | Any genericon | ||
| 0.9% saline | Any genericon | ||
| Buprenorphine | Any genericon | ||
| Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
| Microscop | Zeiss | Opmi MDO/S5 | |
| Vaporiser | Eickemeyer | TEC3 | |
| Ultrasound | Vevo, Canada | 770,2100 |
Referenzen
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