Eine einfache Fluoreszenztest zur Quantifizierung von Canine Neutrophil Extracellular Einklemmschutz

Es gibt mehr als 70 Millionen Hunde allein in den USA ^1. Wie bewertet Familienmitglieder, oft sind diese Tiere erhalten Schneiden medizinische Versorgung Rand. Ebenso , weil sie unsere Umwelt teilen, können Hunde geben Einblicke in die Pathogenese und Behandlung menschlicher Krankheiten ^1. Doch ob Entdeckungen in der Humanmedizin in tierärztliche Behandlungen oder umgekehrt zu übersetzen, ist es wichtig, gründlich Spezies Variationen charakterisieren auch in hochkonservierten Systeme wie die angeborene Immunantwort. Beispiele für Unterschiede zwischen dem Eckzahn und menschlichen angeborenen Immunsystems sind die hohe Expression CD4 auf Hund Neutrophilen ^2; das Fehlen eines funktionellen Homolog des zytoplasmatischen Flagellin Sensor IPAF in dogs ³ und die Expression eines Caspase 1/4 Hybrid in Fleischfressern ^4.

Neutrophile extrazelluläre Fallen (NETs) sind eine relativ kürzlich entdeckte Komponente der angeborenen Immunität ^5. NETs sind Netzwerks von DNA, nukleare und granular Proteine in Reaktion auf eine Vielzahl von entzündlichen oder infektiösen Reizen ⁶ freigegeben. Netzartige Strukturen wurden in vielen Spezies , einschließlich Hühner ⁷ gezeigt Fisch ^{8, 9} und Mollusken acoelomates ^10, aber es gibt Speziesvariationen. Zum Beispiel reagieren Maus – Neutrophilen langsamer NETosis Stimuli als menschliche Neutrophilen und bilden weniger diffuse NETs ^11. Es gibt einen großen Körper von Beweismitteln aus mehreren Arten , die NETs entrap Mikroben und umstrittener direkt bei der Abtötung von Krankheitserregern ^12,13 beteiligt sein können. NET – Komponenten auch Gewebeschäden jedoch verbessern, Thrombose und Tat fördern als ^14,15 Autoantigene. Die Balance zwischen den nützlichen und schädlichen Wirkungen von NETs können zwischen verschiedenen Krankheiten und verschiedenen Arten variieren, was darauf hindeutet, ist es wichtig, NETs zu untersuchen, sowohl in der Art und Zustand von Interesse.

Hier sind wirbeschreiben ein einfaches Protokoll für die Induktion und die Freisetzung von NETs durch Hunde- Neutrophilen zu messen. Dieses Verfahren ist ähnlich zu denjenigen verwendet , um Neutrophile ¹⁶ und induzieren NETosis in anderen Arten, aber die Bedingungen , wie beispielsweise Agonist – Konzentration und Inkubationszeit isolieren haben canine Neutrophilen optimiert. Eine ähnliche NET Quantifizierung DNA – Freisetzungstest wurde auch bei anderen Spezies beschrieben worden , aber das hier vorgestellte Verfahren ist auch für Hunde ^8,17,18 optimiert.