Não agitada polimerização precipitação fornece uma abordagem de prototipagem rápida, reprodutível para a síntese de estímulos-Sensitive poli (N -isopropylacrylamide) microgéis de distribuição de tamanhos estreita. Nesta síntese protocolo, luz caracterização dispersão e rastreamento de partículas de fluorescência única dessas microg�s em uma configuração de microscopia de campo amplo são demonstrados.
Estímulos sensíveis poli (N -isopropylacrylamide) (PNIPAM) microg�s têm várias aplicações práticas potenciais e usa na investigação fundamental. Neste trabalho, usamos única partícula de rastreamento microg�s PNIPAM de fluorescente etiquetado como uma vitrine para ajustar o tamanho da microgel por um procedimento de precipitação rápida polimerização não se mexeu. Esta abordagem é adequada para prototipagem novas composições e condições de reacção ou para aplicações que não necessitam de grandes quantidades de produto. síntese do microgel, tamanho de partícula e a determinação da estrutura por difusão de luz dinâmica e estática são detalhados no protocolo. Mostra-se que a adição de comonómeros funcionais pode ter uma grande influência sobre a nucleação e a estrutura das partículas. acompanhamento de uma única partícula por microscopia de fluorescência de campo amplo permite uma investigação sobre a difusão de microgéis tracer rotulados de uma matriz concentrada de microgéis não marcado, um sistema que não é facilmente investigado pelaoutros métodos, tais como dispersão de luz dinâmica.
Estímulos sensíveis poli (N -isopropylacrylamide) (PNIPAM) microg�s 1,2 têm atraído o interesse contínuo sobre as últimas duas décadas devido ao seu potencial em várias aplicações inteligentes. Casos de uso demonstrados incluem estabilizadores comutáveis emulsão 3-8, microlentes 9, substratos de cultura de células para facilitar a colheita de células 10,11 e transportadores inteligentes para compostos de baixo peso molecular e outros biomédica utiliza 12. De um ponto de pesquisa fundamental de vista estas partículas têm provado ser útil para investigar temas como interações coloidais 13-15 e interações polímero-solvente 16-18.
O uso bem sucedido de microgéis PNIPAM e seus derivados em qualquer dada aplicação, tipicamente requer o conhecimento sobre o tamanho de partícula médio e a largura da distribuição de tamanho de partícula. Para a correta interpretação dos resultados experimentais envolvendo PNIPAM microgeles, a estrutura da partícula, que pode ser afectada por comonómeros funcionais, tem de ser conhecida. Estática e dinâmica de espalhamento de luz (DLS e SLS, respectivamente) são excepcionalmente adequado para adquirir esta informação porque esses métodos são rápidos e relativamente fácil de usar; e eles sondar as propriedades de partícula de forma não invasiva no seu ambiente nativo (dispersão). DLS e SLS também coletar dados de grande número de partículas evitando o viés decorrente de pequenos tamanhos de amostra, típicos para métodos de microscopia. Portanto, o primeiro objetivo deste trabalho é apresentar boas práticas em matéria de dispersão de luz para os profissionais novos para a caracterização coloidal.
Tipicamente, a precipitação a polimerização é realizada em escala laboratorial e encontrando as condições de reacção adequadas para as propriedades específicas de partículas pode ser trabalhoso e requerem muitas repetições de síntese. Em contraste com a síntese do lote grande, a polimerização não é agitada precipitação 19,20 ARAPID procedimento no qual os lotes de composição reagente diferente pode ser polimerizado simultaneamente partículas rendimento de distribuição estreita de tamanhos. polimerização simultânea minimiza a variação experimental e grande produção significa que as condições de reação adequadas podem ser encontradas rápida para upscaling a reação. Por isso, o nosso objectivo é a segunda demonstrar a utilidade da polimerização não-precipitação agitada em prototipagem e em aplicações que não requerem uma grande quantidade de produto.
Diferentes aspectos da síntese e caracterização se reúnem no exemplo de aplicação da marcação fluorescente microgéis PNIPAM em investigação interacção coloidal. Aqui usamos rastreamento única partícula de alta precisão para investigar a difusão de microgéis tracer rotulados na dispersão de microgéis de matriz não marcados em uma ampla faixa de concentração da matriz e resolver o efeito gaiola em dispersão coloidal concentrado. microscopia de fluorescência de campo amplo é bem adequado for este propósito, uma vez que pode caracterizar o comportamento específico de algumas moléculas marcadoras entre um grande número de diferentes espécies potencialmente matriz. Isto está em contraste com técnicas tais como DLS, SLS e reologia, que medem as propriedades média do conjunto de sistemas e, portanto, não é possível resolver o comportamento de pequeno número de partículas de sonda num sistema de grande. Além disso, neste exemplo específico métodos de dispersão de luz convencionais não podem ser utilizados também, devido à alta concentração de partículas, o que leva a uma forte dispersão múltipla invalidando a análise standard. Uso de tratamento automatizado de dados e métodos estatísticos permitem a análise do comportamento do sistema geral também para rastreamento de uma única partícula, quando a média ao longo de grandes tamanhos de amostra.
A adição de pequenas quantidades de co-monómero funcional pode ter um efeito significativo sobre o tamanho das partículas e da estrutura dos microgéis PNIPAM derivado. Simultânea em pequena escala tubo de ensaio de polimerização é um bom método para contabilizar tais mudanças, e ajuda a localizar rapidamente as composições de reagentes adequados para o tamanho de partícula alvo para redimensionar o reacção conforme necess…
The authors have nothing to disclose.
The Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) is acknowledged for financial support within the Sonderforschungsbereich SFB 985 “Functional Microgels and Microgel Systems”.
Acetone | VWR Chemicals | KRAF13455 | |
Bisacrylamid | AppliChem | A3636 | |
n-Hexane | Merck | 104374 | |
N-Isopropylacrylamide | Fisher Scientific | AC412785000 | recrystallized from n-hexane |
Methacryloxyethyl thiocarbamoyl rhodamine B | Polysciences | 23591 | |
Potassium peroxodisulfate | Merck | 105091 | |
Silicone oil 47 V 350 | VWR Chemicals | 83851 | |
Toluene | Sigma Aldrich | 244511 | |
F12 Refrigerated/heating circulator | Julabo | 9116612 | |
Microscope | Olympus | IX83 | |
XY(Z) Piezo System | Physik Instrumente | P-545.3R7 | |
100x Oil immersion objective | Olympus | UPLSAPO | |
QuadLine Beamsplitter | AHF Analysentechnik | F68-556T | |
Cobolt Jive 150 laser | Cobolt | 0561-04-01-0150-300 | |
Multimode Fiber | Thorlabs | UM22-600 | |
iXON Ultra 897 EMCCD camera | Andor | DU-897U-CS0-BV | |
Laser goniometer | SLS Systemtechnik | Mark III | |
CF40 Cryo-compact circulator | Julabo | 9400340 | |
Laser goniometer system | ALV GmbH | ALV / CGS-8F | |
Multi-tau corretator | ALV GmbH | ALV-7004 | |
Light scattering electronics | ALV GmbH | ALV / LSE 5004 | |
Photon counting module | PerkinElmer | SPCM-CD2969 | 2 units in pseudo cross-correlation mode |
633 nm HeNe Laser | JDS Uniphase | 1145P | |
F32 Refrigerated/heating circulator | Julabo | 9312632 |