Относительно проводимости устьиц листьев, чтобы функциональных признаков

1. Устьичная проводимость Измерения проводимости устьиц ПРИМЕЧАНИЕ: Авторами использование простого типа стационарном порометре (Decagon SC1). Дизайн Порометр имеет преимущество небольшого размера, интуитивно понятный ручной работы и высокой надежностью. При измерении проводимости устьица в области, убедитесь, что для минимизации расстояния между измеренным лиц для повторного цикла измерения, чтобы быть наиболее эффективным возможным. Выберите листья различных видов и особей в соответствии с воспроизводимым рисунком (той же высоте, так же воздействия, так же, позиции в рамках завода, если это возможно только с того же узла, и только из одной категории; солнце или в тени листьев, и т.д.). Только мера уходит в здоровых, не поврежденных и полностью развитой состоянии. Отметить листья на физических лиц (например, с помощью кабельных стяжек или цвета ленты), чтобы убедиться, что повторные измерения производятся на том же листе. ПРИМЕЧАНИЕ: измЗЛЫ устьичной проводимости должны быть сделаны только на поверхности листьев, избегая жилки листьев и сильные вены. Начните измерения в ранние утренние часы до восхода солнца, принимая от пяти до десяти повторных измерений до значения проводимости устьичных не показывает явный спад в полдень. ПРИМЕЧАНИЕ: суточный ход измерений будет поставлять хорошие данные для анализа отношений между ДДП и проводимости устьиц. ДДП измерения С каждым г измерения S, запись температуры и относительной влажности воздуха предпочтительно с портативных регистраторов непосредственно измерить условия на положение того же листа. Для расчета дефицита давления паров использовать формулу август-Рош Магнуса 15. = давление насыщенного водяного пара Е С [гПа] <p clзадницу = "jove_content"> Т = температура [° C] Модель г S – ДДП ответ Сейчас участок видов мудрый все г S данные против ДДП, сочетающие все ежедневные курсы отдельных листьев в одном анализе на виды. Извлечение максимального значения наблюдаемого из устьичные данных проводимости, ища максимального значения. Для масштабирования модели видового мудрый сопоставимости, разделяют наблюдаемых значений через максимальное значение наблюдаемой для этого вида (г S / G Smax). Для каждого вида регрессия логит о г S (г S / г SMAX) для ДДП и квадратичной срок ДДП с использованием обобщенной линейной модели с биномиального распределения ошибок (а, Ь, с представляют параметры регрессии): <img alt="фигура 1" src="/files/ftp_upload/52738/52738fig1highres.jpg" width = "700" /> Рисунок 1. Пример из построенных ценностей и подогнанной модели г S -. ДДП Устьичная проводимость в виде функции дефицита давления паров для вида Liquidambar formosana. Пусто точки представляют наблюдаемые значения. (А) Максимальная устьичную проводимость, то ДДП на максимальной проводимости устьиц и означает проводимости устьица экстрагировали из абсолютного, таким образом, не масштабируется проводимости устьиц (г) данных. (Б) Чешуйчатые данные устьичного проводимости (г S / г SMAX) были построены, чтобы извлечь соответствующие параметры (показано заполненных точками) 20. Повторная печать с разрешением от 20. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры. <img alt="Рисунок 2" src="/files/ftp_upload/52738/52738fig2highres.jpg" width = "400" /> Рисунок 2. Все встроенные модели для всех видов. Модель графики для устьичные данных проводимости в ДДП регрессии для всех видов. Вечнозеленые виды представлены черными линиями, лиственных пород красными линиями 20. Повторная печать с разрешением от 20. Примечание: Используя логит вместо регрессии г S непосредственно VPD, приводит к тому, что максимальные значения моделируемого не превышает г Smax и г S приближается к 0 при высокой VPD. Выписка параметр регулирования устьиц для каждого вида Рассчитать абсолютные значения г моделируется Smax (MaxFit на рисунке 1В). Чтобы сделать это, рассчитать ДДП на максимальной проводимости устьиц от создания первой производной 1.4.2 к нулю, что дает ДДП gsMaxFit = -b / 2a. Вставьте ДДП gsMaxFit в формулу 1.4.2 и поднять к власти е, чтобы получить MaxFit. Рассчитайте мEAN всех измерений проводимости на вид (рис 1А). ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте статистическое программное обеспечение R (http://www.r-project.org). Для расчета относительных значений по масштабной модели (г S / G Smax), извлечь проводимости устьица и ДДП значения для следующих двух пунктов: (1) проводимости устьица и ДДП в максимуме модели (MaxFit) и (2) ДДП во второй точке перегиба кривой (рис 1B). Умножьте эти значения от г SMAX получить абсолютные значения г S для этих точек. Смотрите Рисунок 2 для полного наложения отдельных моделей всех 39 видов анализируемых. 2. Измерения устьичной Черты Возьмите образцы предпочтительно от одних и тех же листьев, которые были использованы для измерений проводимости устьиц. Если это не возможно, используют ту же процедуру выбора, который был применен, чтобы выбрать листьядля устьичные измерений проводимости, предпочтительно на тех же лиц. Нанесите тонкий слой бесцветных, быстро сушки лака для ногтей (тест различных марок, некоторые из них более подходящим, чем другие) в свежего образца. Если образцы не могут быть обработаны немедленно, хранить их в 70% спирте. После лак для ногтей высох, осторожно очистите впечатление от листа и приступить к микроскопического анализа, а с нормальным образцом листьев. ПРИМЕЧАНИЕ: В случае листьев с высокой плотностью трихом предшествующий этап применения гидроксида натрия или 1: 1 раствор кислоты и перекиси кислорода уксусной может привести к лучшим результатам. Оптические аналитика микроскоп Подключите камеру к оптическим микроскопом, способным увеличениях между 40Х до 400X. После подключения камеры к микроскопом, матч фотографии, сделанные в оптического увеличения и разрешения изображения, например, с помощью шкалы. Используя исходный я открываюмаг программное обеспечение для обработки, как ImageJ 16 проанализировать эти фотографии. Нарисуйте фигуру с помощью инструмента формы от инструмента анализа изображений на изображении в районе с не грязь, большой палец отпечатков, поврежденных участков, или больших жилок листа. Граф устьица в этой области и в общей сложности не менее 50 000 мкм 2 на образце. Измерьте длину клеток устьиц охраны и длину пор. Рассчитать количество устьиц на 2 мм. Рассчитать индекс устьичного как отношение плотности устьичного чтобы эпидермального количество клеток на мм 2. 3. Оценка Leaf Vein Черты ПРИМЕЧАНИЕ: Для оценки листьев вены черт, модифицированный протокол из Сак и Scoffoni 17 был безработным. Базовые приготовления Примечание: Чтобы оптимизировать видимость жилок листа, листья сначала беленой и затем окрашивали сафранин и малахитового зеленого. Для отбеливания leavES, оставить им, по крайней мере 72 ч в 50% раствор decolorizer (тестовые различных марок, опять кто-то может работать лучше). Кроме того, использование 5% NaOH раствор или 10% раствор КОН или 25% раствора H 2 O 2. Раствор нагревают до 30 ° С или комбинировать различные решения с шага 3.1.1 для лучшего эффекта. Промыть несколько раз в воде после этого. Адаптировать процесс отбелки для конкретного вида, в зависимости от их характеристик листа. ПРИМЕЧАНИЕ: толстые листья, возможно, потребуется более длительные периоды раствора ванны и или более агрессивных растворов. Более тонкие и нежные листья больше может быть беленой в удовлетворительном степени менее чем 72 ч. Чтобы цвет листьев поместить их в 100% этанола. Цвет их в течение 2 – 30 мин в 1% -ном растворе сафранин. Для усиления окраски, добавить дополнительное лечение с 1% раствором малахитового зеленого только в течение нескольких секунд. Адаптация протокола к каждого вида с точки зрения сроков и интенсивности, чтобы достичь оптимальных результатов. Промыть себеVeral раз в воде после этого. Если листья глубоко окрашенные, некоторое время в этаноле или decolorizer может помочь. Анализ проб Сканирование листья с подсветкой сканера с разрешением 1200 точек на дюйм ок. Подходим сканы, предпринятые для разрешения изображения, например, с помощью шкалы, чтобы убедиться, что длина пиксель может быть прослежена до абсолютных мер длины отсканированного листа. Измерьте площадь, окружность, длину и ширину листьев. Рассчитать несколько индексов, например, длина / ширина и окружность 2 / область. Вырезать 1 по 1 см прямоугольник из середины изображения. Измерьте диаметр вен первого и второго порядка (не включают основную среднюю вену). Измерьте длину всех жил первого порядка в этой Квадрат (плотность вен). 4. Оценка других листьев Черты ПРИМЕЧАНИЕ: ослы типичные лист черты, такие как конкретныеплощадь листьев (SLA), лист содержание сухого вещества (LDMC), площадь листьев, содержание элементов, лист привычка, лист pinnation, лист соединение типа, лист типа маржа и т.д. в соответствии с установленными протоколами 18,19. Наблюдательные лист черты Оценка лист pinnation, листовой тип соединения, листовой тип маржи и наличие extrafloral нектарники 18,19 через наблюдение в этой области. Аналитические лист черты Соберите образцы свежих листьев, желательно на тех же лиц, которые используются для других измерений, для определения удельной площади листьев (SLA), площади листьев и листьев сухого вещества (18,19) LDMC. После 48 часов в сушильном шкафу при 80 ° С, измерить содержание элементов и отношения, желательно на тех же листьев.