モデルマメに初期胚発生の調節を研究するための接合体と体細胞胚を得るためのプロトコル<em>のMedicago truncatula</em

収穫面積と総生産¹で穀物に2つ目の豆類は、約20,000種およびマメ科（またはマメ科）家族と高等植物の第三位のファミリーです。大豆は第三位の栽培作物です。穀物豆類は、人間の消費の²のための食事性タンパク質と植物油の三分の一の約3分の1を提供します。それらのN ₂の固定容量のマメ科植物はまた、持続可能な農業システムに貢献しています。 のMedicago truncatula、大豆のように、その種子の子葉にタンパク質と油を格納し、かなりの遺伝的およびゲノム資源^3,4との遺伝的およびゲノムマメ科モデルです。 M.一方、 truncatulaは ​​、それがますますマメ科植物の種子生物学^5-7と胚^8,9を研究するために採用されているマメ科植物根粒共生^4の理解の進歩を可能にしました。シロイヌナズナの胚発生は広範囲に私は^10,11を研究し、それされていますSA非マメ及び胚発生の詳細はMedicagoに^8,10と同じではありません。 Mの接合体胚発生truncatulaは ​​独特の多下垂、endoployploid懸垂帯および基底転送セル⁸と、興味深い機能を備えています。

体細胞胚形成（SE）は、一般的に、植物^12を再生するために使用されます。マメ科モデルMのtruncatulaは ​​、シードラインJemalong 2HA（2HA）は体細胞胚形成¹³率の高さを持っている親Jemalongから開発されてきました。生産胚の数は、最近確立された実質的に長い媒体¹⁴にジベレリン酸（GA）およびアブシジン酸（ABA）の両方を添加することによって増加しています。 GAとABAは通常拮抗^14を作用することが与えられた珍しい相乗的にこの場合はGAとABAの作用します。カルスから生産胚は、胚発生の段階が容易にvisuallを決定することができる表面上で開発しますY、容易に回収しました。胚形成（2HA）と非胚形成されている同質遺伝子系統（Jemalong）の近くに持つことは、体細胞胚形成の調査を容易にし、 インビボおよびインビトロ系の両方持つことは、種々の実験の可能性を提供します。

胚発生の細胞および分子メカニズムを理解することは、種子及び植物の開発を理解するために不可欠です。マメ科植物では、他の双子葉植物のように、それは、ヒトの栄養のために使用される製品を保存胚の子葉です。初期胚は、急速な細胞分裂、正しい胚のパターン形成を伴います。受精後約8日、Mのtruncatula胚は、初期の子葉段階に達します。形態学的特徴を正確に温室条件下で受精後日数で示されていません。このように、発生中の胚の段階を示すために、効率的な標準化されたアプローチは、遺伝的regulの研究に貴重なものです初期の接合体胚のエーション。

本稿では、マメ科植物のモデルMに胚発生の生物学的研究のために開発した胚を収集するために、2つの標準化されたプロトコルを提供しますtruncatula。第1は、第二は、簡単にアクセス大きな胚番号を提供するために、培養葉移植片を介して、体細胞胚形成の間、胚発生およびポッド形態を関連付けることにより、接合胚を収集することです。