Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrates are often used to monitor and assess water quality. An efficient protocol involves collections of Chironomidae surface-floating pupal exuviae (SFPE). Here, techniques for field collection, laboratory processing, slide mounting, and identification of Chironomidae SFPE are described.
بروتوكولات bioassessment السريعة باستخدام تجمعات macroinvertebrate القاعية استخدمت بنجاح لتقييم التأثيرات البشرية على نوعية المياه. للأسف، وأساليب أخذ العينات اليرقات القاعية التقليدية، مثل تراجع صافي، يمكن أن يكون مضيعة للوقت ومكلفة. بروتوكول بديل ينطوي على مجموعة من الوامئات العائمة سطح العذراء سلخ (SFPE). الوامئات هي عائلة الأنواع الغنية من الذباب (ذوات الجناحين) والتي تحدث عادة في الموائل المائية مراحل غير ناضجة. chironomids الكبار على الخروج من الماء، وتركهم جلود العذراء، أو سلخ، تطفو على سطح الماء. سلخ غالبا ما تتراكم على طول البنوك أو خلف العوائق من خلال العمل من الرياح أو المياه الجارية، حيث يمكن جمعها لتقييم التنوع chironomid وثراء. Chironomids يمكن استخدامها كمؤشرات البيولوجية الهامة، حيث أن بعض الأنواع أكثر تسامحا للتلوث من غيرها. ولذلك، فإن النسبي وفرة الأنواع وتكوين تم جمعها SFPE تعكسالتغيرات في نوعية المياه. هنا، يتم وصف الطرق المرتبطة الجمع الميداني، وتجهيز المختبرات، وشريحة متزايدة، وتحديد chironomid SFPE في التفاصيل. وتشمل مزايا طريقة SFPE الحد الأدنى من اضطراب في منطقة أخذ العينات والفعالية والاقتصاد جمع العينات وتجهيز المختبرات، وسهولة تحديد وتطبيق في البيئات المائية كلها تقريبا، وتدبير يحتمل أن تكون أكثر حساسية للإجهاد البيئي. وتشمل القيود عدم القدرة على تحديد استخدام موئل دقيق اليرقات وعدم القدرة على تحديد سلخ العذراء إلى الأنواع إن لم تكن قد ارتبطت مع الذكور البالغين.
برامج الرصد البيولوجية، والتي تستخدم الكائنات الحية لتقييم صحة البيئة، وغالبا ما تستخدم لتقييم نوعية المياه أو مراقبة نجاح برامج استعادة النظام الإيكولوجي. وكانت البروتوكولات bioassessment السريعة (RBP) باستخدام تجمعات macroinvertebrate القاعية شعبية بين الوكالات للموارد المائية دولة منذ عام 1989 1. طرق التقليدية لأخذ العينات macroinvertebrates القاعية لالممارسات التجارية التقييدية، مثل تراجع صافي، Surber العينات، وهيس العينات 2، يمكن أن يكون زمنيا المستهلكة، ومكلفة، ويمكن قياس فقط تجمعات من معين موئل دقيق 3. و، RBP بديلة فعالة لتوليد المعلومات البيولوجية عن هيئة مياه خاص يتضمن مجموعة من الوامئات العائمة سطح سلخ العذراء (SFPE) 3.
والوامئات (الحشرات: ذوات الجناحين)، والمعروف باسم البراغيش غير العض، هي الذباب كاملة الانسلاخ التي تحدث عادة في البيئات المائية قبل الناشئة مثل البالغين 60؛ على سطح الماء. الأسرة chironomid هي الأنواع الغنية، مع ما يقرب من 5000 نوع وصفها في جميع أنحاء العالم. ومع ذلك، يقدر أن ما يصل إلى 20000 الأنواع في الوجود 4. Chironomids هي مفيدة في توثيق المياه ونوعية الموائل في العديد من النظم البيئية المائية بسبب تنوعها وارتفاع مستويات التلوث التسامح متغيرة 5. وعلاوة على ذلك، فإنها غالبا ما تكون macroinvertebrates القاعية الأكثر وفرة واسعة النطاق في النظم المائية، وهو ما يمثل عادة 50٪ أو أكثر من الأنواع في المجتمع 5،6. بعد ظهور الكبار الأرضي، وسلخ العذراء (يلقي الجلد العذراء) لا تزال تطفو على سطح الماء (الشكل 1). تتراكم سلخ العذراء على ضفاف أو خلف العوائق من خلال العمل من الرياح أو المياه الجارية، ويمكن بسهولة وبسرعة جمعت لإعطاء عينة شاملة من الأنواع chironomid التي ظهرت خلال ساعة 24-48 السابقة 7.
ntent "> والوفرة النسبية والتكوين التصنيفي للتم جمعها SFPE يعكس جودة المياه، معتبرا أن بعض الأنواع التلوث جدا متسامح، في حين أن البعض الآخر حساس جدا 5 أسلوب SFPE لديه العديد من المزايا أكثر من التقنيات التقليدية اليرقات أخذ العينات chironomid بما في ذلك: (1) الحد الأدنى ، إن وجدت، يحدث اضطراب الموائل في منطقة أخذ العينات؛ (2) عينات لا تركز على جمع الكائنات الحية، وإنما الجلد غير الحية، لذلك لا يتأثر مسار ديناميات المجتمع؛ (3) تحديد لجنس، و في كثير من الأحيان الأنواع، هو نسبيا سهلة نظرا مفاتيح وأوصاف 3 المناسبة؛ (4) جمع وتجهيز وتحديد العينات غير فعالة واقتصادية بالمقارنة مع الطرق التقليدية لأخذ العينات 3،8،9؛ (5) سلخ المتراكمة تمثل الأنواع التي نشأت من مجموعة واسعة من بلوغ الموائل الصغيرة 10؛ (6) طريقة قابلة للتطبيق في البيئات المائية كلها تقريبا، بما في ذلك الجداول والأنهار ومصبات الأنهار ولاكوفاق، البرك، برك الصخور، والأراضي الرطبة؛ و(7) SFPE ربما يكون مؤشرا أكثر حساسية من صحة النظام الإيكولوجي حيث أنها تمثل الأفراد الذين قد أكملت جميع مراحل غير ناضجة وظهرت بنجاح مثل البالغين 11.طريقة SFPE ليس نهجا جديدا لجمع المعلومات عن المجتمعات chironomid. واقترح استخدام SFPE أول مرة من قبل Thienemann 12 في وقت مبكر 1900s في وقت. مجموعة متنوعة من الدراسات قد استخدمت SFPE لمسوحات التصنيفية (على سبيل المثال، 13-15)، والتنوع البيولوجي والدراسات البيئية (مثل 7،16-19)، والتقييمات البيولوجية (على سبيل المثال، 20-22). بالإضافة إلى ذلك، تناولت بعض الدراسات الجوانب المختلفة لتصميم العينة، حجم العينة، وعدد من الفعاليات العينة المطلوبة لتحقيق مستويات الكشف عن مختلف الأنواع أو الأجناس (على سبيل المثال، 8،9،23). وتشير هذه الدراسات إلى أن نسبة عالية نسبيا من الأنواع أو الأجناس يمكن الكشف مع جهد! المعتدلتي أو حساب ترتبط مع تجهيز العينات. على سبيل المثال، وأندرسون وFerrington 8 قرر أن يعتمد على عينة فرعية 100 العد، ويتطلب وقتا 1/3 الثالثة أقل لاختيار العينات SFPE مقابل تراجع صافي العينات. حددت دراسة أخرى أن 3-4 عينات SFPE يمكن فرزها وتحديد لكل عينة وتراجع صافي وان كانت عينات SFPE أكثر كفاءة من العينات وتراجع صافي في الكشف عن الأنواع كما زاد ثراء الأنواع 3. على سبيل المثال، في مواقع مع ثراء الأنواع قيم 15-16 الأنواع، بلغ متوسط تراجع صافي كفاءة 45.7٪، في حين كانت عينات SFPE 97.8٪ كفاءة 3.
الأهم من ذلك، تم توحيد طريقة SFPE في الاتحاد الأوروبي 24 (المعروفة باسم تقنية chironomid العذراء سلخ (CPET)) وأمريكا الشمالية (25) لتقييم البيئي، ولكن لم يتم وصف طريقة بالتفصيل. وقد وصفت تطبيق واحد لمنهجية SFPE التي كتبها Ferrington، وآخرون. <sتصل> 3. ومع ذلك، كان التركيز الأساسي لهذه الدراسة لتقييم الكفاءة والفعالية، والاقتصاد في طريقة SFPE. والغرض من هذا العمل هو لوصف جميع الخطوات من طريقة SFPE في التفاصيل، بما في ذلك جمع العينات، وتجهيز المختبرات، وشريحة متزايدة، وتحديد جنس. ويشمل الجمهور المستهدف طلاب الدراسات العليا والباحثين والمهنيين المهتمين في توسيع نطاق جهود مراقبة جودة المياه التقليدية في دراستهم.
أهم الخطوات لنجاح جمع SFPE العينة، واختيار، والفرز، والشريحة المتزايدة، وتحديد ما يلي: (1) تحديد مجالات تراكم عالية SFPE داخل منطقة الدراسة خلال الجمع الميداني (الشكل 2A). (2) مسح ببطء محتويات طبق بيتري للكشف عن كافة SFPE خلال عينة قطف. (3) وضع ما يلزم من البراعة اليدوية…
The authors have nothing to disclose.
وقدمت التمويل لتأليف ونشر هذه الورقة من خلال المنح المتعددة وعقود لمجموعة الوامئات البحوث (LC Ferrington الابن، PI) في قسم علم الحشرات في جامعة مينيسوتا. وبفضل ناثان روبرتس لتبادل الصور الميداني تستخدم أرقام في الفيديو المرتبطة مع هذه المخطوطة.
Ethanol | Fisher Scientific | S25309B | 70-95% |
Plastic wash bottles | Fisher Scientific | 0340923B | |
Sample jar | Fisher Scientific | 0333510B | Glass or plastic, 60-mL recommended |
Testing sieve | Advantech | 120SS12F | 125-micron mesh size |
Larval tray | BioQuip | 5524 | White |
Stereo microscope | |||
Glass shell vials | Fisher Scientific | 0333926B | 1-dram size |
Plastic dropper | Thermo Scientific | 1371110 | 30 to 35 drops/mL |
Fine forceps | BioQuip | 4524 | #5 |
Petri dish | Carolina | 741158 | Glass or plastic |
Multi-well plate | Thermo Scientific | 144530 | Glass or plastic |
Glass microslides | Thermo Scientific | 3010002 | 3 x 1 in. |
Glass cover slips | Thermo Scientific | 12-519-21G | Circular or square |
Euparal mounting medium | BioQuip | 6372B | |
Pigma pen | BioQuip | 1154F | Black |
Probe | BioQuip | 4751 | |
Kimwipes | Kimberly-Clark Professional™ | 34120 |