強迫性障害のラットモデルとして信号の減衰

注：すべての実験プロトコルは、テルアビブ大学、イスラエルの制度的動物実験委員会のガイドラインに、とNIHのガイドラインに適合。すべての努力は、使用される動物の数およびそれらの苦痛を最小限にするために行われた。 1.動物の準備 12時間の明/暗サイクルの部屋でハウスラット。 実験手順の間、自由に利用できる水との22時間の食物制限スケジュールにラットを維持する。 それらの体重は、（増殖曲線に基づいて、自由摂食ラットの重量の90％未満に低下しないことを確実にするために週に2回、ラットを計量し、例えば、ハーラン、 http://www.harlan.com/models/spraguedawley。 ASP ）。その体重減少したラットを除外します。 2.セットアップ隣接する二つの部屋を使用してください。一つは「待合室」fのように使用されるまたは行動試験の前にラットを保持し、そして、手順を実行するための他の。この部屋はオペラントチャンバーを収容します。 注：待合室でラットをオペラントチャンバーで生成されたトーンにさらされていないことを確認してください。 格子床とヒンジ付きパースペックスパネルを介してアクセス可能な1 45 mgの食品ペレットを提供する食品の雑誌、とオペラントチャンバーを使用してください。 注：ヒンジの開口部はマイクロスイッチを作動させる。 3のW光は、食品の雑誌を照明する。 2リトラクタブルレバー（4センチ幅は、側壁2.8 cmの食品雑誌の各辺7.5 cmであり、床から5cmに配置）。チャンバーを照らすために天井に位置して家の光。音声信号装置は80デシベル、2.8 kHzトーンを生成する。 換気ファンの音が減衰ボックスにオペラントチャンバーを座席は、各ボックスの側面に取り付けられた。 正確なセッションパラメータを使用して実験開始に先立ち、事前にプログラムは、すべての訓練の段階指定されたソフトウェアを使用して、各段階に関連するS、どのコンピュータ·コントロールとオペラントチャンバーを活性化させるだけでなく、自動的に実験の実行中に蓄積されたすべての関連データを記録します。 注：各トレーニング段階のパラメータ（マガジン、レバー押しのトレーニング、信号減衰、テストは）完全に以下に詳述する。これらのパラメータは事前​​にプログラムされた正確な様式は、使用中のソフトウェアとハ​​ードウェアに依存する。 3.取扱い及び食事制限 5日前に実験手順の初めに、毎日約2分間のラットを処理します。 取り扱いの最初の日に始まる22時間の食物制限のスケジュールを起動します。ラットは取り扱い/行動訓練の終了後にはすぐに半時間よりも彼らのホームケージで2時間食料へのアクセスを許可しません。 注記：ラットは水を自由ホームケージで、特に2時間のfeedi中にあることを確認してください彼らは水なしで適切に食べないように、ピリオドをngの。 小さなトレイに30食物ペレット及びラットのホームケージにトレイを置く – 取り扱いの最後の3日には、20を配置。各ラットは、少なくとも二つのペレットを消費することが観察された後にのみケージからトレイを取り外す。 注：その後、オペラント訓練のための補強材としてのペレットを使用しています。 4.トレーニング手順ラットのための注文がテスト環境に順応見るには、待合室で行動試験の少なくとも15分前にホームケージにラットを輸送する。 マガジン（日1から3）。 彼らはラットに表示されるように雑誌の訓練の第一日目には、食品の雑誌で食物ペレットの十分な量を置く。 注：これを行うための一つの方法は、彼らが少し開いたままにヒンジパースペックスパネルの原因となるようにペレットを配置することです。 雑誌のトレーニングプログラムを計算するように家のLIG同時にマガジン光と音からなる化合物の刺激の開始と、htを、各試験の開始時に自動的にオンにされ、単一の食物ペレットを5秒の可変遅延次の食品の雑誌に滴下する。 ラットの頭が食の雑誌（収集トライアル）またはいずれか早い方15秒（未収集トライアル）、後に入った後オフにする化合物の刺激と家の光を計算します。試行間間隔30秒続いされる各トライアルを定義します。 オペラント室にラットを置き、5分後に、ラットのすべてがペレットを収集していることを手動で確認してください。もしそうであれば、トレーニングプログラムをアクティブにします。そうでない場合は、余分な5分を可能にします。 プログラムの実行を停止する雑誌のトレーニングセッションラットは30収集試験を完了した後、または40の試験の合計が達成された後のいずれか。 雑誌の訓練の3日目にラットは32トンの合計のうち30収集の試行を行うことを確認してくださいせいぜいリアル。訓練日の終わりに別のフルトレーニングセッションのためにオペラントチャンバーにこの基準を達成するために失敗したラットを返します。 注：レバープレス訓練の初日の朝に雑誌訓練の最終日に余分なセッション以下、この基準に達しない実行ラット。基準に達しないラットを除外する。 レバープレストレーニング-プレトレーニングステージ（4日目）：フリーオペラントのスケジュールでレバープレス。 オペラントチャンバーにラットを配置する前にトレーニングプログラムを起動します。補強されたレバーがチャンバ内に存在し、家の光が全トレーニングセッション中及び非強化レバーが常​​に後退することになるようにプログラムを計算する。 注：ラット間で（左/右）レバーの側面を相殺し、実験手順を通じて各ラットについて一定に保つ。 レバー上のいくつかのペレットを入れて、中にラットを置く室。 、ペレットを収集し、単一の食品ペレットの配信と複合刺激の開始をトリガしながら、それは偶然にレバーを押すまで、ラットがレバーエリアを探索できるようにします。 複合刺激がいずれか早い方、ラットの頭が食の雑誌に入った後にオフ（完成トライアル）または15秒（未完トライアル）の後になるようにプログラムを計算します。 ラットは30完成した臨床試験に達した後に実行を停止するセッションをプログラムします。 レバー4のペレットとをさらに20分間待つ – ラットが30分以内に、この基準に達しない場合は、3を置く。ラットは30試験を完了するために失敗した場合、訓練日の終わりに追加のトレーニングのためにオペラントチャンバーに戻す。 注：レバープレス訓練の初日の朝に再び余分な事前トレーニングセッションを以下この基準に達しない実行ラット。基準に達しないラットを除外する。一般に、ほとんどすべてのラTSは、レバーを押す前研修の3つのセッションの後に（ほとんどが最初のセッション内で行う）を取得する。しかし、動物はレバーを押し、利用整形を取得する際に多くの困難を持っている場合。 成形中、オープン音が減衰ボックスの扉を維持し、オペラントチャンバー内にラットを観察します。ラットが近づくとレバーは、食品ペレットの配信と複合刺激の開始をアクティブにするためにソフトウェアを使用しています。繰り返し行ってください。 初めに、それはレバーの近傍にあるときに、ラットを強化するが、それは、レバーと、実際の物理的接触する場合にのみ徐々に補強開始し、最終的にはそれだけを押ししようとする強化する。 注：シェーピングは、しばらく時間がかかる場合があります。できるだけ静かに。 レバーを押す訓練（日5から7）：個別の裁判スケジュールでレバープレス。 各試験の開始は、後に、両方の家の光と5秒の開始によって通知されるように、プログラムを計算しますレバーは、チャンバ内に導入される。 一緒に化合物刺激の提示と、雑誌への単一の食品ペレットの配信をトリガー非強化レバー（NRL）に応答が強化されたレバーには、プログラムされた結果とプレスを持っていないことを確認してください。 ラットの頭部がフードマガジンに入るまたは15秒が経過した後に、レバーが後退された後に、化合物の刺激及びハウスライトがオフになっている。 それは試行間間隔30秒が続いているように、各試行を定義します。レバープレストレーニング（5日目）の化合物刺激を定義するの初日にレバー押し応答の取得を容易にするために、15秒後にオフされる。次の2日間（日6から7）上でその雑誌のエントリは密接にレバー押し応答を、以下の確保するために、唯一の10秒を持続するために、複合刺激を定義する。 オペラントチャンバーにラットを置き、その後、トレーニングプログラムをアクティブにする。 <li>プログラムの実行を停止するためのレバー押しのトレーニングセッションラットが強化されたレバー（RL）を押すと食品ペレット（完成トライアル）を40回収集または60の試験の合計が達成された後にしているいずれかの後に。 レバープレス訓練の最終日には、最大で42の総試験の合計のうち、40試行を確認したラットが完了する。ラットがこの基準に達しない場合は、一日の終わりに追加のトレーニングセッションのためのオペラントチャンバーに戻す。 注：レバープレス研修の最終日に余分なセッション以下、この基準に達しないラットを除外します。 すなわち 、レバープレス訓練記録の最終日、各試行で報わレバー押しの数には、RL（余分なレバープレス）上の最初の応答以下の押下回数。 ランダムに実験群にラットを割り当てる。 例えば、研究で（テスト段階の時に実験的操作を行う場合分析する）は、薬物の急性効果を試験する）、（）操作なしで操作/と操作の主な要因で、分散分析（ANOVA）を使用し、手順（ポストトレーニング信号減衰、PTSA /定期的な絶滅、RE、 セクション4.5を参照してくださいペレットコレクションに続いて、過剰なレバー押しの数（名前の過度のレバープレス – 完成した、ELP-C）と信号減衰ステージの開始前にレバープレス研修の最終日に押されていない状態の試行。 この測定で群間に統計的に有意な差がないことを確認してください。 注：一般的に、そこに余分なレバープレスの数が多いと、わずか数匹のラットがあるので、これらのラットせずにグループを比較する。また、余分な訓練を受けたラットは、できるだけ均等にグループ間で配布されていることを確認してください。 信号減衰/レギュラー絶滅（日8から10）。 IDEでの手順を実行します1日目にマガジンにntical方法 – 2つの例外を除いて、3： 食物ペレットは、複合刺激の開始以下の食品雑誌に配信されないように、ペレットディスペンサーを空にします。 プログラムは、関連するステージ化合刺激は15秒後、10秒後にオフとされないように。 RLとNRLの両方がトレーニングセッション中に後退残ることを確認してください。 30トライアルで構成するために、各信号の減衰トレーニングセッションを確認してください。研修の最終日に確認したラットは、食物ペレット（ すなわち、化合物の刺激の開始以下の食品の雑誌に自分の頭を挿入）を超えない14回を収集しようとする。 一日の終わりに追加のトレーニングセッションのためにオペラントチャンバーにこの基準を達成するために失敗したラットを返します。 注：この段階で基準に達しないラットを除外しないでください。 への定期的な絶滅を受けたラットを持参「待合室」とは、信号減衰ステージの平均期間に相当期間のホームケージでそれらを残す。 信号の3つのセッションに完成した試行回数を分析するために – （3 1セッション）と手順（PTSA / RE）とセッションの反復測定因子（操作なし/操作で）操作の主な要因と混合ANOVAを使用してください減衰ステージ。 テスト段階での性能の違いは、以前の違いの結果ではないことを確認してください。 テスト（11日目）：レバー押しの訓練と同一の方法で、プロシージャを実行しますが、絶滅の条件の下で、 すなわち、化合物刺激のプレゼンテーションでのRLの結果を押すと、ない食べ物がペレットのための食品の雑誌に配信されていないディスペンサーは空で​​す。 通常、女性はまだRESPOので、男性の50試験や、女性のための60試行から成るようにテストセッションを計算しますND 50試行の後。男女ともに同じ研究（推奨）で使用されている場合は、すべての被験者に60トライアルを与える。 雑誌のエントリが続いていないし、過度のレバー押し回数（名前付き過度のレバープレス-未完了、ELP-U）を収集。マガジンエントリ（ すなわち、ELP-C）によって追跡した過度のレバー押し回数。 NRL上のレバー押しの数。そして鼻ポークの数（ すなわち、回数は、ラットは、食物マガジンにその頭を挿入する。 （操作なしで操作/との）操作の主な要因との分散分析（ANOVA）を使用して、テスト段階でのラットのパフォーマンスを分析し、手順（PTSA / RE）はELP-C、ELP-U、数の数に対して実行完成した、未完了と押されていない臨床試験、および非強化レバー鼻ポークとプレスの数。 処置群のWiを比較する事後解析との有意な相互作用に従ってください非処理/対照群番目、各プロシージャ内。 注：操作の正確なパラメータは知られていない場合（ 例えば、関連する薬剤投与量、電気刺激のパラメータ）とPTSA手順における操作の効果を、動物の数を減少させる試験するためには、別の使用パラメータ（ 例えば、いくつかの薬物の投与量を使用して）。 応答行動廃止することなく、最適なパラメータ、つまり、ELP-Uの数に最大の効果を発揮するパラメータを検索してから、完全な実験計画（PTSAとRE）を実行します。