颈动脉和颈静脉导管在有意识大鼠模型进行血流动力学措施，输液和血液采样

下面介绍的程序进行批准的临床中心的动物护理和使用委员会在美国国立卫生研究院的协议的一部分。 1.准备手术燃气导管消毒和器械。 2.准备导管同花顺肝素甘油（250 IU肝素/ 1毫升的丙三醇）的导管，以确保通畅，避免泄漏。塞与金属塞子（20 GA 15毫米）至保留肝素甘油导管的末端。 3.准备无菌工作站用70％的酒精喷工作站和仪表盘。使用无菌悬垂覆盖手术台和仪表盘和地点仪器的托盘上。 4，大鼠准备外科手术地方大鼠分别在有机玻璃室，并暴露于麻醉剂;异氟烷（3-5％）的混合编氧气，直到昏迷。从腔室中取出大鼠和从颈部的前部和后部区域剃毛皮。涂抹润滑油膏眼睛。 5.导管植入将麻醉的大鼠（由脚趾捏确认）到手术加热表中腹的位置;把它的鼻子到鼻锥为维持麻醉自发性呼吸（异氟烷，3.5％）。轻轻擦洗手术区3次交替使用聚维酮碘和70％的酒精。使使用外科剪刀的肩甲骨之间的0.5厘米中线皮肤切口。 重新定位大鼠在仰卧位;轻轻抑制腿部用橡皮筋表中的每一侧;维持麻醉。放置在颈部2推出无菌纱布的4×4小幅hyperextend更好的曝光。使在使用手术刀锁骨水平颈部的中线的2厘米腹侧颈部皮肤切口权利。 6.右键颈内静脉穿刺置管使用止血钳，直截了当地解剖右颈静脉，分离出唾液腺和淋巴组织可视化和隔离容器的一个5毫米部分。用4-0丝线缝合，放置在容器的两个头部和尾部端部的松动领带最大化容器的曝光。用微型手术剪做一个切口足够大以通过导管，管线与两个连字之间的容器中，并配合在容器周围的颅结扎。 将静脉导管插入朝向与微解剖钩和镊子的辅助心脏的容器中，并推进该导管，直到所有的PU 3F段是在容器中。使用连字在头部和尾部端以固定导管的容器中。 7.左颈动脉插管用止血钳，直言解剖肩胛舌骨肌纵向暴露左侧颈总动脉和我Alcalase碱性蛋白酶容器的5毫米部分。确保迷走神经（白色的），从动脉完全分离。小心不要切碎或破坏神经。 用4-0丝线缝合，放置在容器的尾端的松散的领带，领带关闭容器的颅端和尾端放置缝合上述哈巴狗夹停止血流以下的切口。用微型手术剪，使一个切口，大到足以与两个连字之间的容器通过导管，管线。将朝心脏动脉导管与微观解剖钩钳的帮助。 使用无锁的平滑针保持器除去牛头犬钳紧之前保持在容器内的导管的所述部分。推进导管有一对镊子的同时松开针保持器慢慢直到导管的整个聚氨酯2F段是在该容器中。配合宽松的尾部结扎导管周围和血管确保，但不能因此紧固密封吨，以堵塞，导管。 8.使用直止血，隧道5cm的管皮下回耳后，并通过肩胛骨之间的切口。 Exteriorize导管通过管和取出管。 9.关闭腹切口三种不锈钢绕线夹，以及背侧切口用4-0丝线缝合固定导管外置到位。 10.手术后监测和护理以下导尿，终止麻醉，并恢复在卧位大鼠中与纤维素寝具一个笼子。观察大鼠在2小时的时间间隔为至少4小时，或直到表示疼痛的迹象，然后每天一次。得到酮洛芬[5毫克/千克，皮下注射（SQ）]立即张贴程序和每12小时，如果大鼠显示疼痛或困难的症状。根据我们的经验，没有老鼠都需要以下初始额外镇痛疼痛升注射。观测到的特性，将额外的剂量镇痛诱发考虑包括但不限于：姿势异常;增加/减少呼吸速率，unthrifty / ungroomed，感染/切口部位的炎症，眼分泌物，竖毛（“加标haircoat”），降低活性响应于听觉或触觉刺激。 注：大鼠恢复72小时即获得从前期导尿重“10 g将纳入研究。 11.连接到血液动力系统以下恢复，报名参加该研究的健康大鼠（体重增加> 10克）。放置大鼠的Lucite腔和麻醉如前所述。 将无菌的悬垂在手术台上用无菌止血钳，微型镊子1毫升注射器用钝针连接。 注：该止血钳的尖端应覆盖有橡胶，以避免损坏导管。将麻醉大鼠的手术表中的腹侧的位置和地点鼻子到鼻锥维持麻醉（3-5％）具有自发呼吸。 钳动脉并用一对橡胶封止血略低于金属插针的静脉导管。用一对镊子除去金属销在导管的端部，并附加一个1ml注射器填充有肝素盐水附有一钝针。反过来，取出止血，收回0.1毫升，以确保导管的专利。 再夹紧导管，取出针，并为此附加到一个较长的导管（预冲洗用肝素盐水），在连接到一个旋转，并拴在鞋盒笼子的顶部。连接这些导管的换能器的数据采集和记录，取样，或输注。 注：所有导管保护，螺旋簧管足够长的时间，使动物的全套动作的笼子里。 下面导管连接，终止麻醉在恢复与纤维素床上用品笼子里的胸骨位置动物。为了保持动脉导管通畅，人工冲洗和0.05 ml肝素盐水（50 IU / ml）的每1小时24小时这与动物的定期评估一致的线。 12.采血，压力监测和药物管理局附加空注射器活塞连接到动脉导管，收回0.6毫升在线冲洗。附加样品注射器，取样品，并返回0.6毫升在线冲洗后0.7毫升肝素生理盐水冲洗。 使用数据采集硬件和软件来测量和记录MAP和心脏率不断。 自动给药系统（ADDS）连接到静脉导管。 注：将调节血管加压输注速率（高，低，或0剂量）的基础上检测到正常生理范围内维持压力在MAP。