हम opioid प्रेरित hyperalgesia और चूहों में सहिष्णुता के विकास की जांच के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन. भोले और अफ़ीम का इलाज पशुओं की थर्मल और यांत्रिक nociceptive प्रतिक्रियाओं के माप के आधार पर यह दर्द संवेदनशीलता (hyperalgesia) में वृद्धि यों और जीर्ण नशा प्रशासन के साथ जुड़े पीड़ानाश (सहिष्णुता) में कमी करने के लिए अनुमति देता है.
Opioid प्रेरित hyperalgesia और सहिष्णुता गंभीर रूप से पशुओं और मनुष्यों में दर्द के रूप में opiates के नैदानिक प्रभावकारिता को प्रभावित. दोनों घटनाएं अंतर्निहित आणविक तंत्र अच्छी तरह से समझ नहीं रहे हैं और उनकी व्याख्या पशु मॉडल के अध्ययन से और उचित प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के डिजाइन से लाभ चाहिए.
हम यहाँ, उत्प्रेरण रिकॉर्डिंग और जंगली प्रकार चूहों में पूंछ विसर्जन और पूंछ दबाव परीक्षण का उपयोग कर, एनाल्जेसिक सहिष्णुता साक्ष्य के लिए और साथ ही अफ़ीम प्रेरित hyperalgesia बढ़ाता के लिए एक methodological दृष्टिकोण का वर्णन. वीडियो में दिखाया गया है, प्रोटोकॉल पांच अनुक्रमिक चरणों में बांटा गया है. हैंडलिंग और आदी होना चरणों जानवरों के बेसल nociceptive प्रतिक्रिया का एक सुरक्षित निर्धारण की अनुमति. दोनों थर्मल और यांत्रिक संवेदनशीलता में वृद्धि के रूप में दिखाया द्वारा पुरानी अफ़ीम प्रशासन, महत्वपूर्ण hyperalgesia लाती है, जबकि बाद पीड़ानाश समय पाठ्यक्रमों की तुलना में तीव्र या प्रतिनिधिeated अफ़ीम उपचार स्पष्ट रूप से एनाल्जेसिक प्रतिक्रिया आयाम में गिरावट से प्रकट सहिष्णुता के विकास को दर्शाता है. इस प्रोटोकॉल इसी nociception और अफ़ीम पीड़ानाश के मॉडुलन में व्यक्तिगत जीन की भूमिका का मूल्यांकन करने के क्रम में आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है. यह भी नशा एनाल्जेसिक प्रभावकारिता में सुधार के लिए संभावित चिकित्सीय एजेंटों की प्रभावशीलता की जांच के लिए एक मॉडल प्रणाली प्रदान करता है.
Opioid प्रेरित hyperalgesia (OIH) और एनाल्जेसिक सहिष्णुता पशुओं और मनुष्यों 1-3 में opiates के नैदानिक प्रभावकारिता को सीमित. समर्थक भड़काऊ 4,5 या समर्थक nociceptive (एंटी opioid) 6,7 सिस्टम की भागीदारी फिलहाल परिकल्पना का पता लगाया जाता है. OIH और सहिष्णुता अंतर्निहित तंत्र की व्याख्या उचित पशु मॉडल, प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल और आणविक उपकरणों का उपयोग, vivo में इन विट्रो दृष्टिकोण में से एक संयोजन जरूरी है.
व्यवहार औषध विज्ञान प्रयोगशाला पशुओं में एनाल्जेसिक और hyperalgesic राज्यों पर नजर रखने और यों को प्रभावी प्रतिमान (चूहों, चूहों) है. पशु का एक सुविधाजनक शरीर के अंग (hindpaw, पूंछ) को एक हानिकारक प्रोत्साहन (थर्मल, यांत्रिक या रासायनिक) के आवेदन को आसानी से रन बनाए जा सकते हैं कि एक nocifensive वापसी की ओर जाता है.
हम OIH, उत्प्रेरण रिकॉर्डिंग और बढ़ाता के लिए यहां एक methodological दृष्टिकोण का प्रस्ताव है औरपूंछ विसर्जन और पूंछ दबाव परीक्षण का उपयोग कर जंगली प्रकार चूहों में सहिष्णुता,. प्रक्रिया चूहों में थर्मल और यांत्रिक nociceptive प्रतिक्रिया मूल्यों का एक आसान, संवेदनशील और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने के लिए दृढ़ संकल्प की अनुमति देता है. वीडियो प्रोटोकॉल में प्रदर्शन के रूप में, C57BL 6 / चूहों पुरानी अफ़ीम प्रशासन निम्नलिखित महत्वपूर्ण hyperalgesia अनुभव और कई दिनों के लिए यह बनाए रखें. दोनों थर्मल और यांत्रिक nociceptive मूल्यों में काफी भोले जानवरों पर आधारभूत माप की तुलना में कम कर रहे हैं. इसके अलावा, हमारे प्रयोगात्मक सेट अप OIH, अफ़ीम (सहिष्णुता) को एनाल्जेसिक प्रतिक्रिया की गिरावट के विकास के अलावा, पर नजर रखने के लिए अनुमति देता है. प्रस्तुत आंकड़ों यह साहित्य 1,10-12 में विवादित है, हालांकि hyperalgesia और सहिष्णुता, आम सेलुलर और आणविक तंत्र 8,9 शामिल हो सकता है कि देखने का समर्थन है. अंत में, इस प्रोटोकॉल इसी MODULA में व्यक्तिगत जीन की भूमिका का मूल्यांकन करने के क्रम में आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों के लिए अनुकूलित किया जा सकता हैदर्द की tion. यह भी नशा एनाल्जेसिक प्रभाव में सुधार के लिए संभावित चिकित्सीय एजेंटों के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए एक मॉडल प्रणाली प्रदान करता है.
गंभीर कदम
Nociception माप के लिए पशु मॉडल के विकल्प
चूहों उपभेदों में nociceptive और एनाल्जेसिक संवेदनशीलता में परिवर्तनशीलता उनके एटियलजि में भिन्न विभिन्न दर्द मॉडल का उपयोग (समीक्षा 14-16) समीक्षा जांच की गई है (nociceptive, सूजन, न्यूरोपैथिक), साधन (थर्मल, रासायनिक, यांत्रिक), अवधि (तीव्र, टॉनिक, पुरानी) और प्रशासन की साइट (त्वचीय, चमड़े के नीचे, आंत). अन्य उपभेदों की तुलना में जब वे एक उच्च बेसल nociceptive संवेदनशीलता 17,18 और opiates 14,19 को एक उदारवादी एनाल्जेसिक प्रतिक्रिया का प्रदर्शन के रूप में, C57BL/6J चूहों (जैक्सन प्रयोगशाला के लिए "जम्मू") दर्द के अध्ययन के लिए एक लोकप्रिय पशु मॉडल बन गया है. पुरानी अफ़ीम उपचार के बाद, वे भी महत्वपूर्ण एनाल्जेसिक सहिष्णुता 20,21, hyperalgesia 21,22 और निर्भरता 20,23 विकास.
NT "> यहां, प्रयोगों C57BL/6N टीएसी चूहों पर किया गया बी -6 वंश की एक अलग शाखा के हैं जो (" Taconics खेत के लिए टीएसी '"राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान और के लिए" एन). C57BL 6 / चूहों लंबा किया गया है विनिमेय, हाल के अध्ययनों से C57BL/6J और C57BL/6N 24 उपभेदों में महत्वपूर्ण व्यवहार मतभेदों की ओर इशारा रूप में माना जाता है. विशेष रूप से, थर्मल दर्द तीव्र करने के लिए (टीएसी एक सहित) तीन C57BL/6N substrains के निचले संवेदनशीलता एक के रूप में माना जा सकता है इस phenotype के परीक्षण के लिए लाभ.नर चूहों किशोर पुरुषों 25 पर प्रदर्शन कर रहे हैं, पशु मॉडल के रूप में चूहों का उपयोग कर, दर्द के अध्ययन के विशाल बहुमत के रूप में चयन किया गया था. देखने के पीड़ानाश या hyperalgesia अंक से जांच की है जब हमारे हाथ में, वे मजबूत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य डेटा प्रदान की है. कभी कभी, हम C57BL/6N महिलाओं तैसा और टीपीटी परीक्षण में दोनों, अधिक चर प्रतिक्रियाओं प्रदान करने के लिए एक प्रवृत्ति देखा. इस अवलोकन सकता है, हालांकिमहिलाओं के हार्मोन के स्तर से जुड़ा हुआ प्राकृतिक बदलाव को प्रतिबिंबित, दर्द और analgesia में सेक्स मतभेद अंतर्निहित समग्र तंत्र अभी भी विवाद का विषय बने हुए हैं. इस गर्म बहस के कुछ पहलुओं को संक्षेप अनुभाग अगले 'तकनीक की सीमाएं' में प्रस्तुत किया जाएगा.
पशु आदी होना
चूहे पहले एक सप्ताह के दौरान जानवरों की सुविधा के आदी पाने के लिए अनुमति दी गई थी. किसी भी अन्य व्यवहार के अध्ययन के लिए इसी प्रकार, परीक्षण 3 दिन के अभ्यस्त अवधि (चित्रा 1, कदम के लिए एक) के बाद किया गया था. Nociceptive परीक्षण तनाव के प्रति संवेदनशील हैं, पहली उपायों विशेष रूप से गैर आदी चूहों 26,27 में, बाद में लोगों की तुलना में अब सुप्तावस्था दे सकता है. आदी होना कदम भी एक ही दिन के भीतर और दिनों के बीच और अधिक स्थिर nociceptive प्रतिक्रिया मूल्यों की obtention 2 और 4 आंकड़े देता है. Nociceptive और एनाल्जेसिक पर circadian प्रभाव को कम करने के लिएसंवेदनशीलता 28,29, सब testings 10:00-4:00 आयोजित की गई.
Nociceptive परीक्षण का चयन
Nociceptive परीक्षण थर्मल, यांत्रिक, रासायनिक या बिजली उत्तेजनाओं (समीक्षा 26,27,30. अलग nociceptive तौर तरीकों अलग nociceptors और फाइबर 18,31,32 के माध्यम से कार्रवाई की जा सकती है के रूप में उनके चुनाव महत्वपूर्ण है या तो उपयोग करें.
हम थर्मल के उदाहरण के रूप में रान्डेल और Selitto 35 से अनुकूलित पूंछ विसर्जन टेस्ट (तैसा) 33, डी 'प्रणय और स्मिथ 34 द्वारा विकसित की शास्त्रीय पूंछ झटका परीक्षण का एक संशोधित संस्करण है, और पूंछ दबाव परीक्षण (टीपीटी), चयनित और चूहों में अफ़ीम प्रेरित पीड़ानाश, hyperalgesia और सहिष्णुता का अध्ययन करने के लिए यांत्रिक तौर तरीकों. दोनों परीक्षण व्यापक रूप से चूहों में इस्तेमाल किया गया है. एक काट समय व्यवस्थित ढंग से ऊतकों को नुकसान के जोखिम से बचने या सीमित करने के लिए परिभाषित किया गया था.
अफ़ीम inducएड पीड़ानाश, hyperalgesia और सहिष्णुता
यह एक शक्तिशाली एनाल्जेसिक और OIH-inducer है के रूप में अफ़ीम, आद्य म्यू नशा agonist, मनुष्यों और चूहों 1,2,36 में दोनों, यहाँ का चयन किया गया. अफ़ीम एनाल्जेसिक शक्ति चूहों में तनाव, प्रशासन के मार्गों और nociceptive तौर तरीकों के साथ अलग अलग करने के लिए जाना जाता है. C57BL 6 / चूहों में, विश्वसनीय पीड़ानाश आमतौर पर 1-20 मिलीग्राम / किग्रा खुराक सीमा 14,21 में अफ़ीम के चमड़े के नीचे इंजेक्शन के बाद प्राप्त होता है. तदनुसार, हम थर्मल Nociception 19,21 से आकलन किया उसके प्रवर्तन निदेशालय 50 मूल्य (7-20 मिलीग्राम / किग्रा) के करीब 5 मिलीग्राम / किग्रा, में अफ़ीम की एक भी प्रशासन (अनुसूचित जाति) निम्नलिखित तीव्र पीड़ानाश अध्ययन करने के लिए चुना है.
दोहराया अफ़ीम प्रशासन अक्सर और hyperalgesia (दर्दनाक STIMUL को एक exacerbated संवेदनशीलता (खुराक प्रतिक्रिया वक्र की दाहिनी ओर बदलाव से या एक एनाल्जेसिक प्रतिक्रिया आयाम या अवधि में कमी से या तो इसका सबूत) एनाल्जेसिक सहिष्णुता के साथ साथ हैमैं) बेसल nociceptive मूल्य में कमी से इसका सबूत. दोनों प्रतिकूल घटना उपचार की अवधि पर और nociceptive तौर तरीकों पर 21 नशा चयन किया जाता है जो मिश्रित और इसकी खुराक, की प्रकृति पर, कृंतक उपभेदों पर निर्भर करते हैं. उदाहरण के लिए, सहिष्णुता और hyperalgesia अध्ययन करने के लिए प्रयोगात्मक मानदंड उच्च और निरंतर (प्रति दिन 20 से 40 मिलीग्राम / किग्रा) की 22 या (अप करने के लिए 50 या 200 मिलीग्राम / किग्रा) 20,21 अफ़ीम खुराक तना का दैनिक प्रशासन में मिलकर बनता है. एक 8 दिन की अवधि में, उसके अनुसार, हम दैनिक अफ़ीम प्रशासन (SC 5 मिलीग्राम / किग्रा) के माध्यम से C57BL 6 / चूहों में hyperalgesia और सहिष्णुता के विकास को बढ़ावा दिया. यह मध्यम अफ़ीम खुराक बेहतर नकल क्लिनिक उपयोग करने के लिए अधिक लोगों को अधिक पसंद किया गया था.
तैसा परिचालन खिड़की का सेट अप
तैसा में एक संभावित ख़तरा कृन्तकों 26,37 के तापमान में पूंछ की भूमिका से संबंधित हो सकता है. परिवेश के तापमान nocicept में एक महत्वपूर्ण कारक है के रूप मेंप्रतिक्रिया विविधताओं ive, यह प्रयोगों 38 के दौरान (यहां 21 डिग्री सेल्सियस पर) स्थिर रखा जाना चाहिए. हीट तीव्रता आमतौर पर 5 से 10 सेकंड 27 के भीतर एक nociceptive प्रतिक्रिया का पता लगाने के लिए निर्धारित है. छोटे लोगों परीक्षा का अंतर शक्ति को कम कर सकते हैं, जबकि वास्तव में, अधिक से अधिक सुप्तावस्था, nociceptive प्रोत्साहन के लिए असंबंधित पशु आंदोलनों की निगरानी के लिए खतरा बढ़ सकता है. हम 48 डिग्री सेल्सियस के एक निश्चित तापमान पर तैसा माप प्रदर्शन टेल वापसी सुप्तावस्था 9 सेकंड (बेसल nociceptive मान) के करीब है और 25 सेकंड के लिए 4 सेकंड (hyperalgesia) से अलग थे (अधिकतम पीड़ानाश; काट). व्यावहारिक कारणों के अलावा, एक निश्चित तापमान पर nociceptive प्रतिक्रिया मूल्यों की माप एक प्राथमिकताओं जिससे डेटा व्याख्या की सुविधा, nociceptors और सर्किट का एक ही प्रदर्शनों की सूची शामिल हो सकता है.
संभावित संशोधन
पीड़ानाश और OIH measureme को तैसा परिचालन खिड़की का अनुकूलनपड़ोसी देशों की यात्रा योजना
एक एनाल्जेसिक प्रतिक्रिया पर ध्यान केंद्रित करते हैं, कम आधारभूत मूल्यों (उच्च गर्मी तीव्रता) प्रतिक्रिया में देरी का पता लगाने के पक्ष में हो सकता है. 4 चित्रा तेजी से प्रतिक्रिया का पता लगाने की सुविधा हो सकती, बारी में, एक दर्दनाक उत्तेजना का परिणाम या OIH के विकास, उच्च आधारभूत मूल्यों (यहाँ 48 डिग्री सेल्सियस कम गर्मी तीव्रता) पता करने के लिए.
अफ़ीम प्रेरित पीड़ानाश,: (महत्वपूर्ण कदम पहले उल्लेख किया है के रूप में हम 5 मिलीग्राम में अफ़ीम पाया हालांकि / एक मजबूत एनाल्जेसिक प्रतिक्रिया चित्रा 3 प्रेरित करने के लिए और (दोहराया प्रशासन पर) महत्वपूर्ण hyperalgesia चित्रा 4 बढ़ावा देने के लिए एक सुविधाजनक खुराक किलो, इसकी खुराक अनुकूलित किया जा सकता है hyperalgesia और सहिष्णुता). उदाहरण के लिए, कम मात्रा अधिक मात्रा hyperalgesia शुरुआत में तेजी लाने और इसके आयाम को बढ़ाने के लिए चुना जा सकता है, जबकि (जिससे कट ऑफ सीमाओं से परहेज) पीड़ानाश आयाम को कम करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
OveRall, 'nociceptive खिड़की' के अनुकूलन के अध्ययन के तहत चूहों की आनुवंशिक पृष्ठभूमि को अनुकूलित और खाते में nociceptors और सर्किट की अलग सरणियों की भागीदारी के लिए संभावना ले जाना चाहिए.
वैकल्पिक नशा agonists (fentanyl, remifentanyl)
सबसे चिकित्सकीय इस्तेमाल opiates agonists के रूप में म्यू opioid रिसेप्टर लक्ष्य हालांकि, वे इन विट्रो और इन विवो दोनों में उनके औषधीय गुणों के लिए सम्मान के साथ काफी भिन्न होते हैं. उदाहरण के लिए, remifentanyl और fentanyl के लिए, अफ़ीम से चिह्नित इसके विपरीत, के रूप में पूर्ण agonists व्यवहार करते हैं और म्यू opioid रिसेप्टर्स 39 के internalization को बढ़ावा देने. Remifentanyl कई मिनट 41 की एक अल्ट्रा कम आधा जीवन है, जबकि अफ़ीम और fentanyl के रूप में नशा दर्दनाशक दवाओं, घंटा 40 की सीमा में आधा जीवन है. मनुष्यों में, OIH के लिए सबसे अच्छा सबूत कम अभिनय ग सहित, सर्जरी के दौरान opiates जो मिला रोगियों से हैऐसे remifentanyl 2,42 रूप ompounds. इस प्रकार, fentanyl और remifentanyl तैसा और टीपीटी मानदंड के तहत, चूहों में hyperalgesia और सहिष्णुता के विकास का अध्ययन करने के लिए बहुत कीमती उपकरण हो सकता है.
OIH के शामिल होने के वैकल्पिक साधनों (तीव्र प्रशासन बनाम पुरानी)
OIH बहुत कम या बहुत उच्च dosages 1,2 में, चाहे नशा प्रशासन का एक परिणाम के रूप में मानव और पशु मॉडल में देखा जाता है. हम अफ़ीम के उदारवादी खुराकों के साथ चूहों के जीर्ण इलाज के बाद OIH विकास पर यहाँ रिपोर्ट. . C57BL/6N चूहों के उपचार के कई दिनों के 4 रोज़ अफ़ीम इंजेक्शन पर्याप्त रूप से प्रत्यारोपित अफ़ीम छर्रों से बदला जा सकता है एक स्पष्ट और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य hyperalgesic राज्य चित्रा सबूत के लिए जरूरी थे: उनके हटाने पर, थर्मल hyperalgesia और यांत्रिक परपीड़ा दोनों पहले से ही चूहों में सूचित किया गया है 43. एक माइक्रो आसमाटिक पंप के माध्यम से opiates के आसव एक और संभावना है 44. कृन्तकों में, लंबे समय से स्थायी hyperalgesia भी प्राप्त मानव सर्जरी 36,45,46 में इस म्यू opioid agonist के उपयोग की नकल उतार एक प्रोटोकॉल का उपयोग fentanyl की तीव्र प्रशासन पीछा कर रहा है.
तकनीक की सीमाएं
दर्द के लिए जानवरों की प्रजातियों और मॉडल
कई माउस उपभेदों के तुलनात्मक अध्ययन 4 दिनों अफ़ीम इलाज 22 निम्नलिखित दर्दनाक उत्तेजनाओं 17,31,47 को nociceptive प्रतिक्रियाओं में और OIH स्तर में महान विविधताओं के लिए सबूत प्रदान की है. पशु मॉडल (चूहों और चूहों) में दर्द प्रसंस्करण और मॉडुलन अंतर्निहित तंत्र पुराने दर्द के रोगियों के लिए प्रासंगिक हैं चाहे एक मौलिक और खोला सवाल बना हुआ है. इस प्रकार, बहुत सावधानी मनुष्यों 16 के लिए पशु डेटा की व्याख्या करने के लिए और उनके भविष्य कहनेवाला वैधता को भुगतान किया जाना चाहिए.
दर्द और analgesia में सेक्स मतभेद
ntent "> दर्द के लिए पशु मॉडल पर सबसे preclinical अध्ययन यह चयन पूर्वाग्रह के बावजूद, उभरते विचार opioid विकसित करने के लिए नशा दर्दनाशक दवाओं 49,50, कम संभावना को बेहतर responders के रूप में पुरुषों पर विचार करना था. पुरुष कृन्तकों 16,25,48 पर आयोजित किया गया है hyperalgesia 51,52 और उनकी महिला समकक्षों (समीक्षा 54) की तुलना में अफ़ीम पीड़ानाश 53 को और अधिक सहिष्णु प्रेरित. हालांकि, nociception और एनाल्जेसिक दवाओं प्रभावकारिता के संबंध में सेक्स मतभेद ऐसे में फिर से शुरू नहीं है प्रतिमान 'एक एक आकार सभी फिट बैठता है'. दरअसल, डेटा का खजाना अब कई चर ऐसे opioid दवा प्रभावकारिता और चयनात्मकता, nociceptive परख, आनुवंशिक पृष्ठभूमि, उम्र, gonado हार्मोनल स्थिति या सामाजिक संपर्क 48,54 के रूप में सेक्स मतभेदों के परिमाण और दिशा को प्रभावित कर सकते हैं कि इंगित करता है. मनुष्यों में, नैदानिक दर्द महिलाओं में अधिक प्रचलित है लेकिन इस तथ्य को वास्तविक सेक्स मतभेदों को दर्शाता है कि क्या बहस 48,55,56 का विषय बना हुआ है. एफओमेटा विश्लेषण करती महिलाओं को 57 में काफी अधिक opioid प्रभावकारिता की ओर इशारा रोगियों नियंत्रित विषयों पर प्रदर्शन किया जबकि आर उदाहरण, पचास नैदानिक परीक्षणों की वैश्विक विश्लेषण लिंग के बीच एनाल्जेसिक गुणों में कोई महत्वपूर्ण मतभेद का संकेत दिया. स्पष्ट रूप से किया गया है क्या विरोधाभासों के साथ जो बाद के अवलोकन, कृन्तकों में पाया, फिर इस तरह के मतभेदों 16,48,55,57 के लिए उत्पत्ति के बारे में कई सवाल उठाती है. कुल मिलाकर, पीड़ानाश में सेक्स मतभेद मौजूद है और योग्यता आगे अंतर्निहित तंत्र और चिकित्सीय प्रभाव पर ध्यान केंद्रित.Nociceptive परीक्षणों के बारे में
पूंछ वापसी परीक्षण एक रीढ़ की हड्डी में पलटा है लेकिन यह supraspinal प्रभावों 58 के अधीन किया जा सकता है. तैसा चूहों पर प्रदर्शन करने के लिए अपेक्षाकृत आसान है, लेकिन चूहों में अधिक विशेषज्ञता की आवश्यकता है. एक संभावित कठिनाई अवांछित तनाव उत्प्रेरण के बिना एक सही मुद्रा में माउस को बनाए रखने की है. प्रस्तावित प्रोटोकॉल के अनुसार समायोजित किया जा सकता हैपलटन आकार. 16 जानवर (8 नियंत्रण और 8 इलाज) आसानी से जहाँ तक उनके बेसल nociceptive प्रतिक्रिया मूल्यों की माप के रूप में (पहले तैसा का उपयोग, तो चूहों की पूरी श्रृंखला के लिए टीपीटी) चिंता के दायरे में है प्रबंधित कर रहे हैं. पीड़ानाश समय पाठ्यक्रमों की निगरानी के लिए दी समय अंतराल (यहां 30 मिनट) के भीतर एक सटीक समय अनुसूची की स्थापना और (तब पहली तैसा, टीपीटी) का परीक्षण किया जा सकता है कि पशुओं के लिए अधिक से अधिक संख्या के मूल्यांकन की आवश्यकता है. जानवरों की पूरी पलटन इस प्रकार प्रयोगकर्ता गतिज सीमाओं का सम्मान करने के लिए अनुमति देने के लिए उपसमूहों में विभाजित किया जा सकता है.
मौजूदा / वैकल्पिक तरीके के संबंध में तकनीक का महत्व
OIH माउस बनाम चूहों में
चूहे बड़े पैमाने पर तीव्र या पुराना नशा प्रशासन 46,59-61 निम्नलिखित, opioid analgesia, hyperalgesia और सहिष्णुता का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. दरअसल, कई व्यावहारिक कारणों के लिए, वे बेहतर करने के लिए विचार किया जा सकता हैदर्द प्रयोगों 16,61 के लिए एक पशु मॉडल के रूप में चूहों. हालांकि, हाल ही में जब तक, आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों की पीढ़ी एक सरल प्रक्रिया नहीं था. कई आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपभेदों पहले से ही उपलब्ध हैं, हमारे मॉडल चूहों में OIH और सहिष्णुता के विकास में कई व्यक्तिगत जीनों का योगदान अध्ययन करने का अवसर प्रदान करता है.
अन्य nociceptive परीक्षण बनाम तैसा और टीपीटी
तैसा पूंछ झटका परीक्षण, उत्तेजना के क्षेत्र में किया जा रहा सबसे स्पष्ट अंतर का एक प्रकार है. दीप्तिमान गर्मी के साथ इसके विपरीत, गर्म पानी में पूंछ का विसर्जन इसके तापमान में एक त्वरित और वर्दी वृद्धि हो जाती है. थर्मल Nociception परीक्षण (गर्म थाली या Hargreaves परीक्षण) के अन्य रूपों की तुलना में, तैसा भर में और विषयों के भीतर दोनों काफी प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम प्रदान करता है.
टीपीटी शायद शामिल है जो यांत्रिक nociception 26,27,35 के अध्ययन के लिए एक बहुत लोकप्रिय परीक्षण हैअलग nociceptive फाइबर और आणविक ट्रांसड्यूसर तब तैसा 32. यह त्वरित और विश्वसनीय माप 59 प्रदान करता है, लेकिन प्रयोगकर्ता और बड़े जानवर साथियों से कुछ विशेषज्ञता की आवश्यकता है. वर्तमान अध्ययन, अन्य प्रक्रियाओं या उपकरण में इस्तेमाल किया analgesimeter के लिए एक विकल्प के रूप में तनाव गेज पर निर्भर (समीक्षा 27) मौजूद है. टीपीटी वॉन फ्रे filaments आमतौर पर यांत्रिक परपीड़ा (समीक्षा 27) का मूल्यांकन करने के लिए लिया जाता है जबकि यांत्रिक hyperalgesia के अध्ययन के लिए सबसे उपयुक्त है.
इस तकनीक के माहिर के बाद भविष्य के अनुप्रयोगों या निर्देश
हम यहां पेश प्रयोगात्मक OIH / सहिष्णुता मॉडल इसी दर्द के मॉडुलन में व्यक्तिगत जीन की भूमिका का मूल्यांकन करने के क्रम में आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है. यह भी पुराने दर्द को दूर करने के लिए संभावित चिकित्सीय एजेंटों की प्रभावशीलता की जांच के लिए एक मॉडल प्रणाली प्रदान करता है.
The authors have nothing to disclose.
हम डॉ. जीएल धन्यवाद. Galzi (UMR7242 CNRS, Illkirch, फ्रांस) अपने समर्थन के लिए.
इस काम CNRS, INSERM, Université डी स्ट्रासबर्ग, Alsace BioValley द्वारा और Conectus, एजेंस राष्ट्रीय डी ला Recherche (ANR 08 EBIO ०१४.०२) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया Conseil क्षेत्रीय d'Alsace (Pharmadol), Communaute Urbaine डी स्ट्रासबर्ग (Pharmadol), ICFRC (Pharmadol), OSEO (Pharmadol), दिशा जेनरल des Entreprises (Pharmadol).
Name | Company | Catalog Number | Comments/description |
C57BL/6N Tac mice | Taconic, Ry, Denmark | C57BL/6N Tac B6-M | Male mice (25-30g) |
Morphine hydrochloride | Francopia, Paris, France | CAS n° 52-26-6 | Delivered with special authorization |
Syringes (Terumo) | Dutscher, Brumath, France | 050000 | Polypropylene; Sterile; Volume : 1 ml |
Needles (Terumo) | Dutscher, Brumath, France | 050101 | G26 ½ (Terumo reference : NN2613RO1) |
Mouse restrainer | Home-made | – | Two metallic grids (5x11cm) assembled with adhesive tape and staples. |
Thermostated water bath GR150 | Grant Instruments, Cambridge, UK | GP 0540003 | |
Analgesimeter | Panlab, Barcelona, Spain | LE 7306 | |
Kaleidagraph software | Synergy software, Reading, PA, USA | Kaleidagraph 4.03 | Scientific graphing |
STATview software | Free download; Statistics |