Summary

Traçar medo condicionado em ratos

Published: March 20, 2014
doi:

Summary

No experimento seguinte, descrevemos um protocolo para traço medo condicionado em ratos. Este tipo de memória associativa inclui um período de traço que separa o estímulo neutro eo estímulo incondicionado.

Abstract

Neste experimento, apresentamos uma técnica para medir a aprendizagem ea memória. No protocolo condicionado traço medo aqui apresentada há cinco sorteios entre um estímulo neutro e um estímulo incondicionado. Há um período de rastreio de 20 segundos que separa cada ensaio condicionado. Na próxima congelamento dia é medido durante a apresentação do estímulo condicionado (CS) e período de vestígios. No terceiro dia, há um teste de 8 minutos para medir a memória contextual. Os resultados representativos são de camundongos que foram apresentados com o estímulo incondicionado aversivo (choque) em comparação com ratos que receberam as apresentações de tom, sem o estímulo incondicionado. Rastreamento medo condicionado foi usado com sucesso para detectar déficits e melhorias sutis de aprendizagem e memória em ratos que não são encontrados com outros métodos de medo condicionado. Este tipo de medo condicionado é considerada dependente da ligação entre o córtex pré-frontal e o hipocampo medial. Uma controvérsia atual é saber se este método é acreditado para ser independente de amígdala. Portanto, é necessário outro teste medo condicionado para examinar os efeitos de aprendizagem e memória dependente de amígdala, como através do atraso medo condicionado.

Introduction

Com medo condicionado um estímulo neutro (NS) está emparelhado com um estímulo incondicionado aversivo (EUA). O NS é normalmente um tom e se torna um estímulo condicionado (CS) através de sorteios repetidos com os EUA. O CS pode então induzir uma resposta condicionada (CR), tal como a congelação, na ausência do aversivo EUA. Um protocolo de condicionamento do medo utilizada é atraso condicionado. Neste protocolo o início do NS e os EUA é contíguo ou com alguma sobreposição na apresentação do estímulo. Mesmo que demora medo condicionado é um dos tipos mais usados ​​de condicionamento associativo temporais, existem vários outros tipos de arranjos temporais condicionamento associativo: condicionamento simultâneo, condicionado para trás, e traço condicionado 1. No rastro do medo condicionado há um intervalo livre de estímulo entre o NS e os EUA de vários segundos, resultando em um período de "trace".

Vários estudos relataram déficits em rastreio de condicionamento de medo quando as lesões neurotóxicas são produzidas nas estruturas de entrada em que as hipocampo 2-5 ou quando os agentes farmacológicos são utilizados para bloquear a função do receptor no hipocampo. Lesão aos resultados hipocampo os défices traço e no condicionamento contextual, mas não prejudica atraso medo condicionado 8. Existem várias vantagens de se utilizar traço medo condicionado. O protocolo de condicionamento ao medo pode ser alcançado depois de um período de teste de três dias e permite a memória dependente do hipocampo que não é espacialmente dependente. Traçar medo condicionado pode ser usado como um exame complementar para o labirinto Morris água, romance teste de reconhecimento de objeto, ou outros testes de labirinto em investigar a memória dependente do hipocampo.

Protocol

Os ratos utilizados no experimento seguinte foram gerados e alojados na Universidade de Baylor em uma temperatura ambiente de 22 ° C, com uma luz de 14 horas e 10 horas escuro (20:00-06:00 hr) ciclo diurno. Os ratinhos foram fornecidas ad libitum acesso a comida e água. Todos os procedimentos para os ratos estavam em conformidade com os Institutos Nacionais de Saúde Diretrizes para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório e do protocolo de animais foi aprovado pela Universidade de Baylor Animal Care e do C…

Representative Results

Para os resultados representativos são apresentados dados de ratos adultos da estirpe C57BL/6J de controlo que receberam os emparelhamentos de estímulo neutro com o estímulo não condicionado (choque condição) em comparação com os ratos que receberam o estímulo neutro, mas não receberam o estímulo não condicionado (nenhum estado de choque). É importante executar esta condição quando a primeira criação deste teste comportamental para determinar se o protocolo foi realizado corretamente. <p class="jove…

Discussion

Houve vários estudos que têm elucidado o circuito neural que subjaz traço medo condicionado. Traçar medo condicionado é acreditado para envolver CA1 do hipocampo 12-14. Existe também evidência de que o córtex pré-frontal medial (CPFm) desempenha um grande papel no rastreio do pestanejar condicionado 15, e o CPFm foi encontrado para ser envolvido no rastreio de condicionamento de medo. Um estudo descobriu que os neurônios mPFC fornecer atividade sustentada durante o período de rastreio, p…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabalho é apoiado por uma bolsa do Conselho de Pesquisa da Universidade de Baylor e de uma bolsa de pesquisa da Fundação de Epilepsia.

Materials

FreezeFrame Coulbourn
30% Isopropanol Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30%
70% Ethanol
Amp-meter Med-Associates ENV-420 Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only)
Digital Sound Level Meter 33-2055
Vanilla Extract McCormick Pure Vanilla Extract
Sticky Notes Post-it 3X3 inch

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Lugo, J. N., Smith, G. D., Holley, A. J. Trace Fear Conditioning in Mice. J. Vis. Exp. (85), e51180, doi:10.3791/51180 (2014).

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