Bakteriyel Prostatit bir fare modelinde Dokunsal allodini Ölçümü
Summary
Prostat enfeksiyonu kronik prostatit pelvik ağrı arabuluculuk katkıda bulunan bir faktör olabilir. Biz standardize edilmiş bakteriyel inokulum, zamanla farelerde dokunsal allodini ölçmek için erkek farelerde ve metodoloji üretra içine bakteri instilasyon hazırlama prosedürü açıklanmaktadır.
Abstract
Üropatojenik Escherichia coli (UPEC) idrar yolu enfeksiyonları ve bakteriyel prostatit 1 önemli bir rol oynamaktadır patojenlerdir. Biz son zamanlarda UPEC kronik pelvik ağrı 2, Kronik prostatit / kronik pelvik ağrı sendromu (CP / CPPS) 3,4 bir özelliği başlatılmasında önemli bir role sahip olduğunu göstermiştir. Klinik UPEC ile prostat enfeksiyonu doku hasarı ve otoimmünite 5 mekanizmalarının başlatılması içerebilir mekanizmalar yoluyla kronik ağrı başlatmak ve kurabilir.
Prostat UPEC patogenezini anlamak için bir meydan okuma manipülasyon prostat bezinin nispi erişilememesi olduğunu. Böylece de prostat bir artan enfeksiyon oluşturma erkek farelere UPEC bir klinik suşu vermek üzere, daha önce anlatılan intraüretral enfeksiyon yöntemiyle 6 kullanılmıştır. Burada, biz ba standartlaştırılması için protokoller tarifgibi bakteri perfüze anestetize erkek fareler catheterizing için işlem olarak cterial inokulum 7.
CP / CPPS öncelikle dokunsal allodini 4 varlığı ile karakterizedir. Davranış testleri ifade viseral ağrı 8-10 kaynaklanan kutanöz hiperaljezi kavramına dayanmaktadır. Visseral dokularda bir irritabl odak normal olmayan ağrılı uyaranlar (allodini) için abartılı bir tepki veren Kutanöz ağrı eşikleri azaltır. Yatan visseral ağrının şiddeti ile artış eğilimindedir anormal yanıtları cilt sonucu normal kuvvet uygulanması. Bu UPEC bakteri ile bir tek enfeksiyonuna yanıt olarak zaman içinde dokunsal allodini ölçmek için von Frey lifler kullanmak NOD / ShiLtJ farelerde yöntemi açıklanmaktadır.
Protocol
Representative Results
Discussion
UPEC ile fare prostat enfeksiyonu bakteriyel prostatit, CP / CPPS patogenezinde veya kronik inflamasyon bir predispozan olay olarak dahil olabilir olayların in vivo modelleme için sağlar. Yöntemler kadın idrar yolu enfeksiyonu 7,14 in UPEC modellerde edebiyat büyük bir gövde üzerine bakteriyel hazırlanması ve instillasyon beraberlik için nitelendirdi. Modeli potansiyel aşı adayları ve immün modülasyon mekanizmalarının test patogenezinde çalışmak için geniş uygulanabilirliği v…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu araştırma NIH / NIDDK hibe 1K01DK079019A2 (PT) tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
Referenzen
- Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
- Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
- Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
- Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
- Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
- Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
- Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
- Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
- Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
- Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
- Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
- Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
- Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
- Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
- Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
- Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).
