Medida de la alodinia táctil en un modelo murino de la prostatitis bacteriana
Summary
La infección de la próstata puede ser un factor contribuyente en la mediación de dolor pélvico en la prostatitis crónica. Se describe el procedimiento para la preparación de inóculo estandarizado bacteriana, la instilación de bacterias en la uretra de ratones machos y metodología para medir la alodinia táctil en ratones con el tiempo.
Abstract
Uropathogenic Escherichia coli (UPEC) son patógenos que juegan un papel importante en infecciones del tracto urinario y prostatitis bacteriana 1. Recientemente hemos demostrado que UPEC tienen un papel importante en la iniciación del dolor pélvico crónico 2, una característica de la prostatitis crónica / síndrome de dolor pélvico crónico (CP / CPPS) 3,4. La infección de la próstata mediante la UPEC clínicamente relevante puede iniciar y establecer el dolor crónico a través de mecanismos que pueden implicar daño en los tejidos y la iniciación de los mecanismos de autoinmunidad 5.
Un desafío a la comprensión de la patogénesis de la UPEC en la próstata es la relativa inaccesibilidad de la glándula prostática a la manipulación. Hemos utilizado un método previamente descrito infección intrauretral 6 para entregar una cepa clínica de UPEC en ratones machos estableciendo así una infección ascendente de la próstata. A continuación, describimos nuestros protocolos para la normalización de la bacterial inóculo 7 así como el procedimiento para la cateterización anestesiados ratones machos para la instilación de bacterias.
CP / CPPS se caracteriza principalmente por la presencia de alodinia táctil 4. Las pruebas de comportamiento se basa en el concepto de la hiperalgesia cutánea resultante de 8-10 refiere dolor visceral. Un foco irritable en los tejidos viscerales reduce los umbrales de dolor cutáneas que permitan una respuesta exagerada a la que normalmente no dolorosos estímulos (alodinia). La aplicación de fuerza normal a la piel resultado en respuestas anormales que tienden a aumentar con la intensidad del dolor visceral subyacente. Se describe metodología en los ratones NOD / ShiLtJ que utilizan von Frey fibras para cuantificar la alodinia táctil en el tiempo en respuesta a una sola infección con bacterias UPEC.
Protocol
Representative Results
Discussion
La infección de la próstata del ratón con UPEC permite el modelado en vivo de eventos que pueden estar implicados en la patogénesis de la prostatitis bacteriana, CP / CPPS o como un evento predisponente en la inflamación crónica. Los métodos descritos para la preparación bacteriana y el consumo de la instilación en una gran cantidad de literatura sobre modelos UPEC en infección del tracto urinario femenino 7,14. El modelo tiene una amplia aplicabilidad para el estudio de la patogénesis, pr…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Esta investigación fue apoyada por conceder 1K01DK079019A2 (PT) del NIH / NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
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