세균 Prostatitis의 손쥐 모델에 촉각 Allodynia 측정
Summary
전립선의 감염은 만성 prostatitis의 골반 통증을 중재에 기여 요소가 될 수 있습니다. 우리는 표준화 된 박테리아 inoculum, 시간이 지남에 따라 마우스에 촉각 allodynia을 측정하는 남성 마우스 및 방법론의 요도에 박테리아의 기지의 준비에 대한 절차를 설명합니다.
Abstract
Uropathogenic 대장균 (UPEC)는 요로 감염 및 세균 prostatitis 1 중요한 역할을 병원균입니다. 우리는 최근에 UPEC는 만성 골반 통증 2, 만성 prostatitis / 만성 골반 통증 증후군 (CP / CPPS) 3,4의 기능의 개시에 중요한 역할을하는 것으로 나타났습니다. 임상 관련 UPEC하여 전립선의 감염은 조직 손상과 autoimmunity 5 메커니즘의 개시를 포함 할 수 있습니다 메커니즘을 통해 만성 통증을 시작하고 설정할 수 있습니다.
전립선에 UPEC의 pathogenesis를 이해하는 데 도전 조작에 전립선의 상대적 어려움입니다. 우리는이를 통해 전립선의 오름차순 감염을 수립 남성 생쥐에 UPEC의 임상 부담이 제공하는 이전에 설명 intraurethral 감염 방법 6을 활용. 여기, 우리는 학사 학위를 표준화에 대한 우리의 프로토콜을 설명뿐만 아니라 박테리아의 기지에 anesthetized 남성 쥐를 catheterizing 절차 등 cterial inoculum 7.
CP / CPPS는 주로 촉각 allodynia (4)의 존재에 의해 특징입니다. 동작 테스트는 언급 내장 통증 8-10으로 인한 피부 hyperalgesia의 개념을 기반으로했다. 내장 조직에 짜증 초점은 일반적으로 비 고통스러운 자극 (allodynia)에 대한 과장된 반응을 허용하는 피부 통증 임계 값을 감소시킵니다. 기본 내장 고통의 강도를 증가하는 경향이 이상 반응의 피부 결과 정상적인 힘의 응용 프로그램입니다. 우리는 UPEC 박테리아와 하나의 감염에 대한 응답으로 시간이 지남에 촉각 allodynia를 정할 폰 프라이 섬유를 활용 NOD / ShiLtJ 마우스에 방법을 설명합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
UPEC와 마우스 전립선의 감염은 세균 prostatitis, CP / CPPS의 pathogenesis 또는 만성 염증에 predisposing 이벤트로 참여 할 수 있습니다 이벤트의 생체 모델링에서 할 수 있습니다. 방법은 여성 비뇨기의 요로 감염이 7,14에 UPEC 모델에 문학의 큰 몸에 세균 준비 및 떨어 뜨림 조 추첨에 대해 설명했다. 모델은 잠재적 인 백신 후보와 면역 변조의 메커니즘을 테스트 pathogenesis을 공부에 대한 폭 넓…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 NIH / NIDDK에서 부여 1K01DK079019A2 (PT)에 의해 지원되었다.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
Referenzen
- Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
- Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
- Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
- Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
- Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
- Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
- Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
- Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
- Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
- Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
- Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
- Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
- Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
- Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
- Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
- Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).
