Misurazione della tattile Allodinia in un modello murino di prostatite batterica
Summary
L'infezione della prostata può essere un fattore che contribuisce a mediare dolore pelvico in prostatite cronica. Descriviamo la procedura per la preparazione di standard inoculo batterico, l'instillazione di batteri nell'uretra di topi maschi e la metodologia per la misurazione allodinia tattile nei topi nel corso del tempo.
Abstract
Uropatogeni Escherichia coli (UPEC) sono agenti patogeni che svolgono un ruolo importante nelle infezioni delle vie urinarie e prostatite batterica 1. Abbiamo recentemente dimostrato che UPEC hanno un ruolo importante nell'avvio di dolore pelvico cronico 2, una caratteristica di prostatite cronica / sindrome dolorosa pelvica cronica (CP / CPPS) 3,4. L'infezione della prostata da parte UPEC clinicamente rilevante in grado di avviare e definire il dolore cronico attraverso meccanismi che possono comportare danni ai tessuti e l'avvio di meccanismi di autoimmunità 5.
Una sfida per comprendere la patogenesi della UPEC nella prostata è relativa inaccessibilità della prostata alla manipolazione. Abbiamo utilizzato un metodo precedentemente descritto infezione intrauretrale 6 per fornire un ceppo clinico di UPEC in topi maschi stabilendo, quindi un'infezione ascendente della prostata. Qui, descriviamo i nostri protocolli per uniformare le bacterial inoculo 7 nonché la procedura per la cateterizzazione anestetizzati topi maschi per instillazione di batteri.
CP / CPPS è principalmente caratterizzata dalla presenza di allodinia tattile 4. Test comportamento era basato sul concetto di iperalgesia cutanea risultante da cui 8-10 dolore viscerale. Un focus irritabile nei tessuti viscerali riduce la soglia del dolore cutaneo che consentano una risposta esagerata al normalmente non dolorosi stimoli (allodinia). Applicazione della forza normale al risultato pelle in risposte anomale che tendono ad aumentare con l'intensità del dolore viscerale sottostante. Descriviamo metodologia in NOD / ShiLtJ topi che utilizzano fibre di von Frey quantificare allodinia tattile nel tempo in risposta ad una singola infezione con batteri dell'UPEC.
Protocol
Representative Results
Discussion
Infezione della prostata mouse con UPEC consente la modellazione in vivo di eventi che possono essere coinvolte nella patogenesi della prostatite batterica, CP / CPPS o come un evento predisponente infiammazione cronica. I metodi descritti per la preparazione di batteri e instillazione pareggio su un vasto corpo di letteratura sui modelli UPEC nelle infezioni del tratto urinario femminile 7,14. Il modello dispone di ampia applicabilità per studiare la patogenesi, la sperimentazione vaccini candidati…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questa ricerca è stata sostenuta da sovvenzioni 1K01DK079019A2 (PT) dal NIH / NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
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