Mesure de l'allodynie tactile dans un modèle murin de la prostatite bactérienne
Summary
Infection de la prostate peut être un facteur contribuant à la médiation douleur pelvienne chez la prostatite chronique. Nous décrivons la procédure de préparation de l'inoculum bactérien standardisé, l'instillation de bactéries dans l'urètre chez les souris mâles et une méthodologie pour mesurer l'allodynie tactile chez la souris au fil du temps.
Abstract
Uropathogènes Escherichia coli (UPEC) sont des pathogènes qui jouent un rôle important dans les infections des voies urinaires et de la prostatite bactérienne 1. Nous avons récemment montré que UPEC ont un rôle important dans le déclenchement de la douleur pelvienne chronique 2, une caractéristique de la prostatite chronique / syndrome de la douleur pelvienne chronique (CP / CPPS) 3,4. Infection de la prostate cliniquement pertinente par UPEC peut initier et mettre en place la douleur chronique par des mécanismes pouvant entraîner des lésions tissulaires et l'initiation des mécanismes d'auto-immunité 5.
Un défi à la compréhension de la pathogenèse de l'UPEC dans la prostate est l'inaccessibilité relative de la glande de la prostate à la manipulation. Nous avons utilisé une méthode précédemment décrite infection intra-urétrale 6 pour fournir une souche clinique de UPEC dans des souris mâles établissant ainsi une infection ascendante de la prostate. Ici, nous décrivons nos protocoles pour normaliser la bacterial inoculum 7, ainsi que la procédure de cathétérisme sous anesthésie les souris mâles à une instillation de bactéries.
CP / CPPS est essentiellement caractérisé par la présence d'allodynie tactile 4. Test comportement était basé sur le concept de l'hyperalgésie cutanée résultant de visées 8-10 douleurs viscérales. Un accent irritable dans les tissus viscéraux réduit les seuils de douleur cutanée permettant une réponse exagérée à normalement non douloureuses stimuli (allodynie). Application de la force normale à la peau en raison des réactions anormales qui ont tendance à augmenter avec l'intensité de la douleur viscérale sous-jacente. Nous décrivons la méthodologie de NOD / ShiLtJ souris qui utilisent von Frey fibres de quantifier l'allodynie tactile au fil du temps en réponse à une seule infection par des bactéries UPEC.
Protocol
Representative Results
Discussion
Infection de la prostate de souris avec UPEC permet d'en modélisation in vivo des événements qui peuvent être impliqués dans la pathogenèse de la prostatite bactérienne, CP / CPPS ou comme un événement prédisposant à une inflammation chronique. Les méthodes décrites pour la préparation bactérienne et l'instillation tirage sur un vaste corpus de littérature sur les modèles UPEC dans l'infection des voies urinaires femelle 7,14. Le modèle a une large applicabilit?…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche a été financée par la subvention 1K01DK079019A2 (PT) du NIH / NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
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