Meting van Tactiele allodynie in een muizenmodel van bacteriële prostatitis
Summary
Infectie van de prostaat kan een bijdragende factor in het bemiddelen bekken pijn bij chronische prostatitis zijn. We beschrijven de procedure voor het bereiden van gestandaardiseerde bacterieel inoculum, instillatie van bacteriën in de urethra van mannelijke muizen en methode voor het meten tactiele allodynie bij muizen in de tijd.
Abstract
Uropathogene Escherichia coli (UPEC) zijn ziekteverwekkers die een belangrijke rol spelen bij infecties van de urinewegen en bacteriële prostatitis afspelen 1. We hebben onlangs aangetoond dat UPEC een belangrijke rol in de initiatie van chronische pijn in het bekken 2, een kenmerk van chronische prostatitis / chronische bekkenpijn syndroom (CP / CPPS) 3,4 te hebben. Infectie van de prostaat door klinisch relevante UPEC kunnen initiëren en chronische pijn vast te stellen via mechanismen die weefselschade en de start van de mechanismen van auto-immuniteit 05 mei te betrekken.
Een uitdaging voor het begrijpen van de pathogenese van UPEC in de prostaat is de relatieve ontoegankelijkheid van de prostaat voor manipulatie. We gebruik gemaakt van een eerder beschreven intra infectie methode 6 tot en met een klinische stam van UPEC leveren in mannelijke muizen en bepaalt zij aldus een opgaande infectie van de prostaat. Hier beschrijven we onze protocollen voor het standaardiseren van de bacterial inoculum 7 en de procedure voor catheterizing verdoofde mannelijke muizen voor instillatie van bacteriën.
CP / CPPS wordt voornamelijk gekenmerkt door de aanwezigheid van tactiele allodynie 4. Gedrag testen werd gebaseerd op het concept van cutane hyperalgesie als gevolg van genoemde viscerale pijn 8-10. Een prikkelbare focus in viscerale weefsels vermindert huidpijn drempels waardoor een overdreven reactie op normaal niet-pijnlijke stimuli (allodynie). Toepassing van normaalkracht op de huid resultaat abnormale respons die de neiging te stijgen met de intensiteit van de onderliggende ingewandspijn. We beschrijven methode in NOD / ShiLtJ muizen die von Frey vezels gebruiken om tactiele allodynie tijd kwantificeren in reactie op een infectie met bacteriën UPEC.
Protocol
Representative Results
Discussion
Infectie van de muis prostaat met UPEC maakt de in vivo modellering van gebeurtenissen die betrokken zijn bij de pathogenese van bacteriële prostatitis, CP / CPPS of een predisponerende event in chronische ontsteking. De beschreven methoden voor bacteriële voorbereiding en instillatie putten uit een grote hoeveelheid literatuur over UPEC modellen bij vrouwelijke urineweginfectie 7,14. Het model heeft brede toepasbaarheid voor het bestuderen van de pathogenese, het testen van potentiële kandidaat-v…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit onderzoek werd ondersteund door subsidies 1K01DK079019A2 (PT) van de NIH / NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
Referenzen
- Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
- Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
- Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
- Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
- Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
- Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
- Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
- Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
- Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
- Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
- Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
- Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
- Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
- Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
- Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
- Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).
