の飼育とインジェクション<em>たばこスズメガ</em細菌毒性を評価するための>幼虫

一般的にタバコイモムシとして知られているたばこスズメガは 、タバコやトマトなど、ナス科の植物を食べ、重要な農業害虫と見なされます。 Mの感受性昆虫病原性細菌種の多様^1-5、ならびに昆虫の免疫系^6から8に関して入手可能な情報の富、および保留中のゲノム配列^9〜sextaの幼虫は宿主-微生物相互作用を研究に使用するための優れたモデル生物作る発病時。さらに、M. sextaの幼虫は他の感受性の昆虫種に実験室での相対的に操作し、維持するために比較的大きいと簡単です。それらの大きなサイズも、感染に対する宿主応答の解析のための効率的な組織/体液抽出が容易になります。

ここで紹介する方法は、Mの血体腔内細菌の直接注入（血液空洞）を記述するsextaの幼虫。このアプローチ単に注射後に昆虫の死までの時間を監視することによって、様々な細菌種、株、または変異体の毒性の特性を分析し、比較するために使用できます。このメソッドは、通常、昆虫へのエントリを取得するための手段として、線虫ベクトルと関連付けるXenorhabdusとPhotorhabdus種の病原性を研究するために開発されました。昆虫病原性線虫は、通常、天然の消化器や呼吸器の開口部を介して幼虫に感染し、昆虫の体液（血液）、その後すぐに¹⁰にその共生細菌の内容物を放出する。ここで説明した注入法は、このように昆虫に細菌や線虫の影響を脱共役、線虫のベクトルの必要を回避します。この方法は、ニッキング¹¹と経口毒性アッセイ^12を含むentomopathogenesisを分析するための他の既存の方法を使用しては不可能である種菌内感染性物質の正確な列挙型（細胞やタンパク質）を可能に<e直接噴射方式は全細胞接種の病原性に対処する一方で、mは>また、経口毒性アッセイは、幼虫の消化器系に導入され、分泌された毒素の病原性に対処します。

ここで説明したように直接注入法の有用性は、昆虫死亡率を監視することにより、細菌の病原性を解析することである。しかし、この方法は簡単にMに感染の影響を研究に使用するために拡張することができますsexta免疫システム。昆虫は体液性および細胞性応答の両方を介して感染に応答します。体液性応答は細菌関連パターンの認識や各種抗菌ペプチドのその後の生産^7を含み、これらのペプチドをコードする遺伝子の発現をRNA抽出と定量PCR ^13を介して直接感染後に監視することができます。感染に対する細胞応答は根粒形成、カプセル化、および血球⁶による感染性病原体の食作用を伴う</sup>。これらの応答を解析するために、注入された昆虫を切開し、顕微鏡^13,14により可視化することができます。