利用反向遗传学操作的裂谷热病毒MP - 12菌株，以提高疫苗的安全性和有效性的NSS基因

裂谷热病毒（RVFV），从而导致出血热，神经系统疾病，或在人类中的盲目性，以及高利率流产和反刍动物^的胎儿畸形1，已被列为作为HHS /美国农业部重叠选择代理和风险组3病原体。它属于在家庭Bunyaviridae属Phlebovirus，是这个家庭的最致命的成员之一。自2006年以来已开发的RVFV MP – 12疫苗株^2,3以及野生型RVFV ^4-6株，包括ZH548和ZH501，几个反向遗传学系统。 MP – 12株（这是一个危险群2病原体和非选择代理）是由几个突变，其M -和L段高度减毒，但仍带有剧毒分部的S ^– 3，其编码的RNA功能的毒力因素，NSS。 rMP12 C13type（C13type）进行帧删除NSS的ORF 69％缺乏所有已知的NSS功能，而它复制为efficient作为MP – 12在VeroE6细胞缺乏I型干扰素。 NSS包括干扰素（IFN）-βmRNA的^7,8诱导的转录主机关闭，并促进在翻译后水平降解双链RNA依赖的蛋白激酶^{（PKR）9,10} IFN -β转录干扰素调节因子3（IRF – 3），NF – kB和激活蛋白-1（AP – 1），IFN -β结合IFN-alpha/beta受体（IFNAR）上调刺激IFN -α的转录虽然IRF – 3，NF – kB和激活的基因或其他干扰素刺激基因^{（ISGs）11，}诱导宿主的抗病毒活性，而主机包括NSS IFN -β基因的转录抑制阻止病毒复制的基因upregulations这些ISGs蛋白1（AP – 1），可以通过RVFV7激活。 。因此，NSS是一个很好的的目标，以进一步削弱MP – 12，并取消IFN -β的抑制功能，以提高主机的先天免疫反应。这里，我们描述了产生重组MP – 12的编码突变NSS的协议，并提供一种检查方法，找出缺乏的功能，抑制IFN -βmRNA的合成NSS突变体的一个例子。除了 ​​其在先天免疫系统的重要作用，I型干扰素是重要的树突状细胞诱导适应性免疫^反应 12-14的成熟。因此，NSS突变体诱导I型干扰素的进一步减弱，但在同一时间在刺激宿主的免疫反应更有效率比野生型MP – 12，这使得它们接种疫苗的方法理想人选。