マウス大動脈内の免疫細胞のフローサイトメトリー分析

アテローム性動脈硬化症は、泡沫細胞、免疫細胞、血管内皮細胞と平滑筋細胞、血小板、細胞外マトリックス、および広範な壊死を伴う脂質の豊富なコアで構成されたプラークの形成を特徴とされる中規模および大規模血管の慢性炎症性プロセスのことです周囲組織の線維化¹免疫応答の自然免疫と獲得武器がアテローム性動脈硬化の開始、開発と持続性に関与している^。2、3、証拠の重要な体は樹状突起は、マクロファージなどの免疫細胞の異なるサブセットがあるリンクです。細胞、TおよびBリンパ球は^、4健康とアテローム性動脈硬化症を起こしやすいマウスの大動脈内に存在する。さらに、免疫細胞がアテローム発生にこの組織の重要な役割を示唆している周囲の大動脈外膜に記載されています^。2

当分の間、免疫細胞、それらの活性化状態、および大動脈壁内の細胞組成の異なる種類の定量的検出は、アテローム性動脈硬化症の研究のためにRT – PCRと免疫組織化学的方法によって限定されていました。いくつかの試みが、人間の大動脈を用いてフローサイトメトリーを実行するために作られた、そしてこのような高い自家蛍光などのさまざまな問題は^、5,6を報告されている。人間のアテローム性動脈硬化プラークは、コラゲナーゼ1で消化した、と自由な細胞はCD14のために回収し、染色した+ / CD11cは+マクロファージ由来泡沫細胞を強調する。本研究では、"モック"チャネルは、偽陽性染色を避けるために使用された。消化の過程で蓄積する⁶壊死性物質は大動脈の試料で高い自家蛍光を発生する破片が大量に生じさせる。この問題を解決するには、陰性および陽性対照のパネルが提案されているが、唯一の二重染色は、これらのサンプルに適用することができます。我々は、免疫細胞組成を分析し、活性化、増殖、健康とアテローム性動脈硬化症を起こしやすい大動脈の免疫細胞の分化を特徴づけるために新たなフローサイトメトリーベースの方法^7を開発した。このメソッドは、大動脈壁の免疫細胞組成の調査を可能にし、この病気の免疫的側面の調査のための免疫学的方法の広いスペクトルを使用する可能性を開きます。