Shallow Water (Paddeln) Varianten of Water Maze-Tests in Mäuse

1. Die Oxford Planschbecken Das Planschbecken wurde nach drei aufeinander Designs, Mk 1-3 gemacht worden. Alle beschäftigen flach (2 cm) Wasser in einem weißen (auf seine Scheu zu erhöhen) Basis, die durch transparente Wände aus Plexiglas oder Acryl Kunststoff umgeben enthalten ist. Diese haben true / false Ausfahrten in sie gesetzt. Die falschen Ausfahrten werden schwarz lackiert Holzpflöckchen belegt, während der wahre Ausgang ist offen und verbunden mit einem schwarzen Kunststoff-Rohr, das mit der Maus innerhalb entfernt werden kann. Die Maus wird dann schnell und schonend zu seinen eigenen Käfig, während im Inneren des Rohres zurückgegeben. Nach der ersten Veröffentlichung des Planschbecken wurde berichtet, dass die Rückkehr zur eigenen Käfig war auch eine wirksame Motivation für das Erlernen der Lashley III Labyrinth 2. Einer Wassertemperatur von 20-25 ° C verwendet wird. 20-21 ° C ist ideal, es wurde festgestellt, dass einige Mäuse weniger motiviert scheinen bei höheren Temperaturen. content "> Die erste Labyrinth 5 war rund. Aber manchmal Mäusen (insbesondere solche mit Läsionen des Hippocampus) scheint nicht die offene Austrittsrohr bemerken. Ein achteckiger Design, mit den Austrittsrohre in den Ecken angeordnet ist, um die Besucher Aufmerksamkeit der Mäuse, erheblich verbessert dieses Problem. jedoch die Fehlerrate bei Gelegenheit Leistung wäre 4/trial, um 6/trial mit dem 12-Rohr kreisförmig ausgebildet entgegengesetzt. Daher ist eine dodekagonale Pool wird nun mit 11 falsch und 1 verwendet wahren Ausgang in den Winkeln, die durch die Übergänge von den Wänden aus gesetzt. 1.1. Entwicklung und Eigenschaften der Planschbecken Mk 1: ein Rundbecken 85 cm im Durchmesser mit 12 true / false beendet (Abbildung 1). Mk 2: ein achteckiges Becken 86 cm Durchmesser mit 8 true / false-Exits in den Ecken. Mk 3: a dodekagonale (12-seitig) Pool 120 cm Durchmesser mit 12 true / false Ausfahrt in der Mais gesetztERS (Abbildung 4). In allen oben genannten (und Paddeln Y-Labyrinth, siehe unten) die Ausfahrt Röhrchen wurden 40 mm Durchmesser. Es wurde jedoch gelegentlich das Gefühl, dass die Mäuse nur ungern diese Kraft waren, und Regelgüte im Y-Labyrinth manchmal tauchen, nachdem sie gut reagiert hatte. Aus diesem Grund und unter Berücksichtigung, wie leicht sie die grabenden Gerät eingegeben werden (siehe JOVE Publikation "Beurteilung graben, Nestbau und Horten in mice"), auch, dass die Ausfahrt Löcher in der Barnes Labyrinth 50 mm Durchmesser sind, wurde davon ausgegangen, wenn 40 mm war zu klein. Ein Test wurde im Käfig sechs C57BL / 6 Mäusen durchgeführt. (Sie scheinen eher bereit, 40 mm Rohre im Käfig als vermutlich Stress ist hier niedriger als in einem Stück von Geräten geben, damit Sie den Test im Käfig minimieren würden Unterschiede in Eintrag, wenn die kleineren Rohre waren leicht aversive, so dass die testen mehr konservativ). Zwei 40 mm Rohre und zwei 50 mm Rohre wurden auf dem Boden in einem platziertalternierenden Muster. Wie vorhergesagt, gab es mehr Einträge in 50 mm Rohre (28 Einträge) als 40 mm (9 Einträge). Daher Pilotversuchen an einer neuen Y-Labyrinth mit 50 mm Rohren Ausfahrt geplant, wenn dies erfolgreich ist die alte 40 mm Rohre auf dem dodekagonale Pool und Planschbecken Y-Labyrinth mit neuen 50 mm ersetzt werden. Als Kinderbecken, Planschbecken Y-Labyrinth und räumliche Neuheit Y-Labyrinth alle räumlichen Tests sind, die sich auf den Raum Cues, die die Maus sieht durch die transparenten Wände des Gerätes sollte der Raum gut mit markanten Cues (zB Regalen ausgestattet werden, Schränke, schwarzem Kunststoff Formen an den Wänden). 2. Ausführen des Planschbecken Platzieren einer Maus in der Mitte des Beckens gegenüber einer der vier Positionen auf dem Umfang (9, 12 oder 03 Uhr, wenn die Escape-Rohr bei der 6 ist). Die Platzierung ist halbzufällige, maximal drei aufeinander folgende Versuche können in der gleichen Richtung. Dies kann in der Praxis schwierig zu erreichen, weil, wieLernen verläuft die Mäuse neigen dazu, sich auf die richtige Ausfahrt zu orientieren, wie sie in den Pool am Schwanz gesenkt werden. Wenn sie dies tun, nicht stark sollte versucht werden, sie in die geplante Position zwingen, da sie einfach demonstrieren Lernens werden. Lassen Sie sie, wenn sie direkt über dem Wasser sind, da sie dann vorbei und sofort wissen, dass sie nicht mehr gehalten. Langsam veröffentlichen sie Ergebnisse in ihnen kämpfen, um sich zu befreien, und dies kann erste Orientierung beeinträchtigen. Dies gilt auch für das Paddeln Y-Labyrinth. Maximale Länge Studie beträgt 60 sec. Wenn die Maus nicht bis dahin zu entkommen, manuell führen es bis zur Ausfahrt mit ein paar klaren Plexiglas Paddel von je ca. 30 x 20 cm. Die getroffenen Maßnahmen sind die Zeit, um den Ausgang zu finden (Definition: alle den Kopf in der Röhre) und Irrtümer vorbehalten. Fehler wurden als unter einem Kopf der Länge von einem Rohr (einschließlich der realen Ausfahrt) definiert. Vorbei an der Nähe der realen Ausfahrt, ohne Eintrag, tritt in der Regel infrequently nach den ersten Versuchen. Obwohl ein Fall gemacht, dass dies ein Problem ist, ist, ist eine alternative Ansicht, dass Mäuse in der räumlichen Kognition beeinträchtigt dies tun, weil sie nicht wissen, gibt es einen Ausgang um dort. Bedienelemente wissen, und daher vollständig zu untersuchen. Die Obergrenze von 11 Fehler / Studie basiert auf der Anzahl von Fehlern in der Analyse auferlegt, um zu schräg von der Daten zu verhindern. Dies wäre vor einem Defizit in räumlich beeinträchtigt Mäusen verringern, dh es ist ein konservatives. Mäuse, die den Ausgang innerhalb von 60 sec nicht erreichen werden eine Punktzahl von 11 Fehlern für diesen Prozess zugeordnet. So 60 sec mal immer 11 Fehler. 3. Das Paddeln Y-Labyrinth Um das Verfahren zu vereinfachen Planschbecken und der Vorrichtung ist es, zu experimentieren mit einem Y-Labyrinth beschlossen wurde, betrieben nach den gleichen Grundsätzen wie die Planschbecken. Die Apparatur besteht aus drei Armen aus glasklarem Polystyrol oder Plexiglas, die jeweils 30x 8 x 20 cm. Dies wird auf einem weißen Sockel (Abbildung 7) montiert. Weiß wurde gewählt, um die Scheu der Boden Farbe zu maximieren und so ermutigen Flucht aus dem flachen (2 cm tief). Wie in der Wasser-Labyrinth gibt es nur einen wahren Ausgang, wobei die beiden anderen Arme enden in falsche Ausgänge, die gleich aussehen von innen das Labyrinth (Abbildung 8). Ausführen des Paddeln Y-Labyrinth Platzieren einer Maus am Ende einer der geschlossenen Arme abgewandten Zentrum. Die Reihenfolge der Arme als Startposition ausgewählt wird durch ein halb-zufälligen Sequenz definiert, nicht mehr als drei aufeinanderfolgende Versuche mit der gleichen Position, und eine gleiche Anzahl von den linken oder rechten Arm. Jeder Versuch dauert 60 sek. Wenn die Maus nicht zu verlassen (ganzer Kopf in Ableitungsröhre) innerhalb dieser Zeit ermutigen sie, den Arm mit Hilfe von einem Stück aus transparentem Plexiglas geben. Die Ausfahrt Arm der Basis wird durch die Plexiglas blockiert und die Maus erlaubt, findet die Ausfahrt von selbst, diessollte ein besseres Lernen als schieben es richtig in die Röhre zu fördern. Aber dies muss eventuell auf, wenn die Maus nur ungern den Schlauch nach 15 sec geben zurückgegriffen werden. Ergreifung von Maßnahmen der gesamten Zeit zu verlassen und die Anzahl der Fehler (Ganzkörper ohne Schwanz in einen blinden Arm). Scoring das Paddeln Y-Labyrinth Es gibt zwei Definitionen einer korrekten Studie: Erstens, in dem die Maus findet die Ausfahrt in <60 sec und macht selbst keine Einträge in blinde Arme, mit Fehlern wird erzielt, wenn blinde Waffen eingetragen sind und / oder wenn der Ausgang nicht innerhalb von 60 gefunden sec. Diese Analyse verwechselt Ausfälle in Bewegung mit Fehlern in Arm Einträge. Zweitens kann eine Studie Analyse, die kognitiven Fähigkeiten betont durch den Ausschluss durchgeführt werden, für jede Maus, alle Studien, in denen die Maus hat keinen den Start Arm innerhalb von 60 sec (dh löschen Sie alle 0 +60 Punkte) dann die Berechnung der korrekten% der restlichen Studien. 4. Zwei Arten von Y-LabyrinthKombiniert 1. Vorrichtung Beim Bau eines Paddeln Y-Labyrinth, ist es sinnvoll, zwei Türen einzubauen, damit sie als (trocken) räumliche Neuheit Speicher Experiment 6 (Abbildung 13) ausgeführt werden. Eine transparente Falltür deckt die Austrittsöffnung in der Stirnwand des Austrittsarms, während eine lichtundurchlässige Falltür eingesetzt, um von einem Arm von den beiden anderen Dichtung während der Abtastphase des Tests werden. Es ist wichtig, dass die Läufer für diese Türen nicht innerhalb der Reichweite der Mäuse, da sonst können sie ihre Aufmerksamkeit abzulenken, weil sie potenzielle Fluchtwege erscheinen. Im Idealfall sollten sie verlängern 7 cm von der Spitze des Labyrinths Wand. 2. Set-up Legen Sie eine dünne (0,5 cm)-Schicht von Holzspänen Einstreu auf dem Boden des Y-Labyrinth. Dieser ist zwischen den beiden Testphasen für einzelne Mäuse verteilt und zwischen Mäusen. Für Best Practice, um den olfaktorischen Umgebung mowieder ähnlich für den ersten Vergleich nachfolgenden Mäusen Ort ein oder zwei nicht-experimentellen Mäuse im Labyrinth für ein paar Minuten, bevor das Experiment beginnt. 3. Vorgehensweise Mit der Ausfahrt Arm durch die undurchsichtige Tür und ihrer Austrittsöffnung durch die transparente Tür blockiert blockiert, platzieren Sie den Mauszeiger in der Start-Arm (einer der beiden nicht-Ausfahrt Arme des Labyrinths) und lassen Sie es für 5 min zu erkunden. Dann nehmen Sie sie, heben Sie die undurchsichtige Tür Zugang zu allen drei Armen ermöglichen, ersetzen Sie es im Start-Arm und beobachten es für 2 min. Notieren Sie die Anzahl der Einträge und die Zeit in jedem Arm. Kontrollmäusen sollten bedenken, dass die ersten beiden Teile, und verbringen mehr Zeit in der bisher unzugänglichen Arm.