Ondiep water (Peddelen) Varianten van het Water Maze Tests in Muizen

1. De Oxford Pierenbadjes Het plonsbad is gemaakt op basis van drie opeenvolgende ontwerpen, Mk 1-3. Alle dienst ondiepe (2 cm) water in een witte (naar zijn valschuwheid verbeteren) basis, die wordt omgeven door transparante wanden van plexiglas of helder acrylaat. Deze hebben waar / onwaar exits in hen. De valse uitgangen zijn afgesloten door zwart geschilderde houten pluggen, terwijl de echte uitgang is open en verbonden met een zwarte plastic buis die met de muis binnen kan worden verwijderd. De muis wordt vervolgens snel en atraumatisch keerde terug naar zijn kooi, terwijl in de pijp. Na de eerste publicatie van het peuterbad, werd gemeld dat terugkeer naar de kooi was ook een effectieve motivator voor het leren van de Lashley III doolhof 2. Een watertemperatuur van 20-25 ° C wordt gebruikt. 20-21 ° C is ideaal, is geconstateerd dat sommige muizen lijken minder gemotiveerd bij hogere temperaturen. Inhoud "> De eerste doolhof 5 was rond. Soms muizen (met name die met letsels van de hippocampus) lijkt het groen uitlaatbuis niet te merken. een achthoekig ontwerp, met de uitgang buizen geplaatst in de hoeken om het trekken aandacht van de muizen sterk verbeterd dit probleem. Toch zou het foutenpercentage bij toeval prestaties 4/trial zijn, in tegenstelling tot 6/trial met het ontwerp ronde 12 buizen. Daarom is een twaalfhoekige pool wordt nu met 11 valse en 1 true exit in de hoeken door de knooppunten van de muren. 1.1. Evolutie en kenmerken van de peuterbaden Mk 1: een rond zwembad 85 cm in diameter met 12 waar / onwaar exits (figuur 1). Mk 2: een achthoekig zwembad 86 cm in diameter met 8 waar / onwaar exits in de hoeken. Mk 3: een twaalfhoekige (12 dubbelzijdig) zwembad 120 cm in diameter met 12 waar / onwaar exit in de maïsers (Figuur 4). In alle hierboven (en het kinderbad Y-doolhof, zie hieronder) de uitgang buizen waren 40 mm diameter. Er werd af en toe waargenomen dat de muizen waren terughoudend om deze in te voeren en regelgedrag in het Y-doolhof zou soms duik nadat ze goed gereageerd. Daarom, en gezien hoe gemakkelijk ze de gravende apparaat (zie JOVE publicatie 'Het beoordelen van gravende, nest bouw en hamsteren bij muizen "), ook dat de afslag gaten in de Barnes doolhof zijn 50 mm diameter, werd het beschouwd als 40 mm was te kleine. Een test werd uitgevoerd in de kooi van zes C57BL / 6 muizen uitgevoerd. (Ze lijken meer bereid om 40 mm buizen in de kooi in te voeren als vermoedelijk stress is hier lager dan in een stuk van de apparatuur, zodat het doen van de test in de huiskooi verschillen in toegang zou minimaliseren als de kleinere buizen waren iets aversieve, waardoor de testen meer conservatieve). Twee 40 mm buizen en twee 50 mm buizen werden op de grond geplaatst in eenafwisselend patroon. Zoals voorspeld, waren er meer inzendingen in 50 mm buizen (28 inzendingen) dan 40 mm (9 vermeldingen). Piloottesten zijn dan ook gepland op een nieuwe Y-doolhof met 50 mm uitgang buizen, als dit succesvol is de oude 40 mm buizen op de twaalfhoekige zwembad en peuterbad Y-doolhof zal worden vervangen door nieuwe 50 mm degenen. Zoals het peuterbad, peddelen Y-doolhof en ruimtelijke novelty Y-doolhof zijn alle ruimtelijke testen, met een beroep op de kamer signalen die de muis ziet door de transparante wanden van het apparaat, moet de ruimte goed worden ingericht met karakteristieke signalen (bijv. planken, kasten, zwarte plastic vormen op de muren). 2. Het uitvoeren van de Paddling Pool Plaats een muis in het centrum van de pool aan een van vier posities op de omtrek (9, 12 of 03:00 als het ontsnappen buis om 06:00). Plaatsing is semi-random, maximaal drie achtereenvolgende proeven kan in dezelfde richting. Dit kan moeilijk te realiseren in de praktijk, wanthet leren verloopt de muizen hebben de neiging om zich te oriënteren naar de juiste uitgang zoals ze in de pool worden verlaagd door de staart. Als ze dit doen sterk geen poging moet worden gedaan om hen te dwingen de geplande positie, omdat ze gewoon demonstreren leren. Laat ze als ze net boven het water, want dan vallen ze in en meteen weten dat ze niet langer worden vastgehouden. Langzaam vrijgeven van hen resulteert in hen worstelen om zich te bevrijden en deze kan eerste oriëntatie aantasten. Dit geldt ook voor het kinderbad Y-doolhof. Maximale proef lengte is 60 sec. Als de muis niet in slaagt om te ontsnappen door dan, handmatig naar de uitgang met behulp van een paar heldere perspex peddels, elk meet ongeveer 30 x 20 cm. De genomen maatregelen zijn de tijd om de uitgang te vinden (definitie: alle van de kop in de buis) en fouten. Fouten werden gedefinieerd als die binnen lengte van een hoofd van een buis (inclusief de echte uitgang). Passing dicht bij de echte uitgang, zonder vermelding, treedt i algemeennfrequently na de eerste paar proeven. Hoewel een zaak kan worden gesteld dat dit een probleem is, een alternatieve opvatting is dat muizen geschaad in de ruimtelijke cognitie dit te doen omdat ze niet weten dat er een exit rond daar. Controls weet, en daarom onderzoeken vollediger. Een maximum van 11 fouten / proef wordt opgelegd aan het aantal fouten in de analyse te veel scheef van de gegevens te voorkomen. Dit zou verzachten tegen een tekort wordt gevonden in ruimtelijk aangetast muizen, dat wil zeggen het is een conservatieve maatregel. Muizen die niet aan de uitgang binnen 60 seconden bereikt wordt een score van 11 fouten voor die proef toegewezen. Dus 60 sec tijden hebben altijd 11 fouten. 3. De Paddling Y-doolhof Om het peuterbad procedure te vereenvoudigen en het apparaat werd besloten om te experimenteren met een Y-doolhof, geëxploiteerd volgens dezelfde principes als de peuterbaden. Het apparaat bestaat uit drie armen uit doorzichtig polystyreen of perspex, elk 30x 8 x 20 cm. Dit is op een witte ondergrond (figuur 7) bevestigd. Wit werd gekozen om de valschuwheid van de vloer kleur te maximaliseren en zo stimuleren ontsnapping uit de ondiepe (2 cm diep). Zoals in het water doolhof, er ​​slechts een ware uitgang, met de andere twee armen eindigt in false uitgangen die hetzelfde uit vanuit het doolhof (figuur 8). Loopt het peddelen Y-doolhof Plaats een muis aan het einde van een van de gesloten armen, afgekeerd van het centrum. De sequentie van gekozen als startpositie armen wordt door een semi-willekeurige volgorde, niet meer dan drie opeenvolgende onderzoeken met dezelfde positie en evenveel links of rechts armen. Elke proef duurt 60 sec. Als de muis niet in slaagt om af te sluiten (hele hoofd in exit buis) binnen deze tijd aanmoedigen om de arm in te voeren met behulp van een stukje doorzichtig perspex. De uitgangsarm de basis wordt geblokkeerd door de Perspex en de muis mogen vindt de uitgang zelf, ditmoet beter leren dan recht in de buis te duwen moedigen. Maar dit moet mogelijk worden ingeroepen wanneer de muis is terughoudend om de buis te voeren na 15 sec. Maatregelen nemen van de totale tijd om af te sluiten en het aantal fouten (hele lichaam met uitzondering van de staart komt een blinde arm). Scoren het peddelen Y-doolhof Er zijn twee definities van een correcte proef: ten eerste een waarin de muis vindt de uitgang in <60 sec en geeft geen ingangen in blinde armen, met fouten worden gescoord als blinde armen worden ingevoerd en / of indien de uitgang niet wordt gevonden binnen 60 seconde Deze analyse verwart mislukkingen te beginnen met bewegen met fouten in de arm inzendingen. Ten tweede, kan een proef analyse die cognitief vermogen benadrukt worden uitgevoerd door uitzondering, voor elke muis, alle onderzoeken waarbij de muis niet de start arm binnen 60 sec had verlaten, (dwz verwijder alle 0 60 scores) dan is het berekenen van de juiste van de% resterende proeven. 4. Twee soorten Y-doolhofGecombineerd 1. Apparaat Bij het ​​bouwen van een peuterbad Y-doolhof, is het nuttig om twee deuren te nemen om te kunnen worden uitgevoerd als een (droge) ruimtelijk nieuwigheid geheugen experiment 6 (figuur 13). Een transparante guillotinedeur omvat de uitgangsopening in de eindwand van de uitgangsarm, terwijl een opake schuif deur kan worden opgenomen verzegelen van een arm van de twee andere tijdens de bemonsteringsfase van de test. Het is belangrijk dat de lopers voor deze deuren niet binnen het bereik van de muizen, kunnen anders hun aandacht afleiden omdat ze lijken potentiële vluchtwegen. Idealiter moeten zij zich uitstrekken 7 cm vanaf de bovenkant van de muur doolhof. 2. Structuur Plaats een dunne (0,5 cm) laag van houtsnippers strooisel op de vloer van de Y-doolhof. Dit wordt herverdeeld tussen de twee testfases voor individuele muizen, en tussen de muizen. Voor de beste praktijken, om het olfactorische milieu mo makenre vergelijkbaar voor de eerste versus latere muizen, plaats een of twee niet-experimentele muizen in het doolhof een paar minuten voor de proef begint. 3. Procedure Met de uitgangsarm geblokkeerd door de ondoorzichtige deur en de uitgangsopening geblokkeerd door de transparante deur, plaats de muis in het begin arm (een van de twee niet-exit armen van het doolhof) en laat deze exploratie 5 minuten. Verwijder vervolgens het, verhogen de ondoorzichtige deur toegang tot alle drie de wapens laten, plaats het in het begin arm en acht het voor 2 minuten. Let op het aantal inzendingen en de tijd doorgebracht in elke arm. Controle muizen moeten niet vergeten dat de eerste twee armen, en meer tijd doorbrengen in de voorheen ontoegankelijke arm.