طريقة بسيطة لقياس حساسية الايثانول في الذباب
Summary
وفحص بسيط لقياس الآثار المسكنة للإيثانول على<em> ذبابة الفاكهة</emيوصف> الذباب ، واستنادا إلى فقدان المنعكس التقويمي.
Abstract
الجرعات المنخفضة من الذباب تسبب الايثانول ليصبح مفرط ، في حين جرعات عالية من المسكنة. ويرتبط حساسية الإيثانول الناجم عن التخدير من سلالة يطير مع إعطاء أفضلية الايثانول أن سلالة ثانية ، وبالتالي التخدير هو مقياس ذات أهمية كبيرة لدراسة علم الوراثة من الاستجابات الكحول والشرب. نحن يبرهن على وجود طريقة بسيطة للكشف عن الذباب لالإيثانول وقياس آثاره المسكرة. يمكن للمقايسة وصفنا تحديد الحساسية الحادة ، فضلا عن التسامح الإيثانول الناجم عن التعرض للتكرار. أنها لا تتطلب إعداد تشارك من الناحية الفنية ، وبالتالي يمكن تطبيقه في أي مختبر مع الأدوات الأساسية لثقافة الطيران.
Protocol
Discussion
في هذا العرض ، وقد أوجزنا طريقة بسيطة لتحديد الإيثانول التي يسببها التسمم بناء على فحوصات السابقة التي وصفها Bainton آخرون. 2000 1 ، وRothenfluh آخرون. 2006 2. منذ يرتبط الكحول بفعل التخدير مع تفضيل شرب الكحول 3 ، هذا الاختبار هو ذات الصلة لدراسة الاضطرابات الناجمة عن تعاطي الكحول. ويستند في وصفها على مقايسة باغت السلبية الناجمة عن انجذاب بالجاذبية ، وكيف أن التعرض للكحول يتداخل مع هذه الاستجابة الفطرية. قبل البدء في التعرض للتأكد من كل ما تبذلونه من الذباب تظهر استجابة طبيعية لجفل من هذا القبيل ، أي بعد التنصت باستمرار على الذباب في قارورة الغذاء ، فإنها ينبغي أن يتحرك كل من القاع في غضون فترة زمنية 10 الملاحظة الثانية. أمثلة من الذباب وجود انجذاب بالجاذبية السلبية تشمل خفض المسوخ الاستيلاء الانفجار حساسة 5 ، والتي تعاني من نقص تنقل الذباب الناجم عن تنكس الخلايا العصبية الدوبامين 6.
على الرغم من أن الفحص وصف بسيط نسبيا ، المتغيرين تستحق أكبر قدر من الاهتمام لضمان تحقيق نتائج يمكن استنساخه. أولا ، يجب أن تكون كل قارورة من التعرض لنفس الحجم. وهذا يشمل التأكد من أن الجزء السفلي من قنينة تحتوي على نفس الحجم من المواد الغذائية الكرة فيال المكونات / القطن + ، فضلا عن إدراج المكونات التي تحتوي على الإيثانول على مسافة واحدة مقابل كل قنينة. ويمكن استخدام قارورة فارغة تماما لهذا الاختبار ، لكنه يؤدي إلى قيم ST50 أطول ، وانخفاض الإنتاجية للمقايسة.
هذا الاختبار هو أيضا مناسبة لتحديد كمية من الذباب التسامح عند التعرض تطوير الإيثانول تكرار. وينبغي النظر في عدد من المتغيرات عند القيام التعرض للتكرار. الأول ، هو موضح هنا الفاصل الزمني بين التعرض إلى 4 ساعات. يمكن تغيير هذا المتغير ، ولكن من المستحسن ألا يكون أقل من 2 ساعة ، لضمان إزالة الألغام من الايثانول من التعرض الأولى. انظر شولتس وآخرون. 2000 4 لحركية التنمية التسامح الإيثانول والاضمحلال. المتغير الثاني هو أن تنظر إلى مدة التعرض الأولى. هذا ومن الواضح أن تكون هي نفسها لمراقبة والذباب التجريبية. ولكن هذا قد لا يؤدي في نفس المقدار من الايثانول تسليمها الى كل من هذه السلالات يطير. الذباب مخدرا استيعاب المزيد من الايثانول من الذباب النشط 2 ، لذا فإن السلالة التي sedates في وقت سابق قد تتلقى جرعة أعلى من سلالة المسكنة في وقت لاحق ، وبالتالي وضع مزيد من التسامح بسبب جرعة أولية أعلى. اننا نحذر بشدة القارئ عند مقارنة تطور سلالات من التسامح التي تظهر الاختلافات في ST50 الأولي (1).
في مقايسة وصفنا هنا هو أداة مفيدة في تحديد بسهولة وبتكاثر الذباب الاستجابات السلوكية للكحول.
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر Aylin رودان لقراءة نقدية للمخطوطة ، وأعضاء في مختبر للمناقشة مفيدة. ويدعم هذا البحث من قبل المعاهد الوطنية للصحة ، R01AA019526.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Exposure vials | www.flystuff.com | 32-116 | ||
| Plugs | www.flystuff.com | 49-102 | ||
| Acid Blue 9 | Sigma | 861146 |
Referenzen
- Bainton, R. J., Tsai, L. T. -. Y., Singh, C. S., Moore, M. S. . Curr. Biol. 10, 187-194 (2000).
- Rothenfluh, A., Threlkeld, R. J., Bainton, R. J., Tsai, L. T. -. Y. . Cell. 127, 199-211 (2006).
- Devineni, A. V., Heberlein, U. . Curr. Biol. 19, 2126-2132 (2009).
- Scholz, H., Ramond, J., Singh, C. S., Heberlein, U. . Neuron. 28, 261-271 (2000).
- Allen, M. J., Godenschwege, T. A., Tanouye, M. A., Phelan, P. . Semin. Cell Dev. Biol. 17, 31-41 (2006).
- Feany, M. B., Bender, W. W. . Nature. 404, 394-398 (2000).
