Passieve Toediening van monoklonale antilichamen tegen H. capsulatum Ea schimmels

Het doel van het gebruik van deze methodiek is 1) om onze capaciteit verder te gaan naar personen met een antilichaam of vaccin voor het voorkomen of behandelen histoplasmose veroorzaakt door de schimmel Histoplasma capsulatum en 2) de rol van virulentiefactoren te onderzoeken als doelwit voor de therapie te beschermen. Voor het genereren van mAb's, muizen geïmmuniseerd, worden de immuunreacties beoordeeld met behulp van een vaste fase ELISA-systeem ontwikkeld in ons laboratorium, en de beste responder muizen zijn geselecteerd voor het isoleren van splenocyten voor de fusie met hybridoma cellen. C57BL / 6 muizen zijn uitgebreid gebruikt om de H. studie capsulatum pathogenese en bieden het beste model voor het verkrijgen van de vereiste gegevens. Om de rol van de mAbs in infectie te beoordelen, muizen intraperitoneaal toegediend met mAb aan H. capsulatum of isotype gematchte controle mAb en vervolgens geïnfecteerd door een intraveneuze (iv), intraperitoneale (ip) of intranasaal (in) routes. In de wetenschappelijke literatuur, werkzaamheid van mAbs voor schimmelinfecties in muizen is gebaseerd op de sterfte als een eindpunt, in combinatie met kolonie formin eenheden (CFU) taxaties op eerdere tijdstippen. Overleving (tijd tot overlijden) studies zijn nodig omdat zij het best vertegenwoordigen menselijke ziekten. Zo zou doeltreffendheid van onze interventie niet afdoende worden vastgesteld zonder overlevingscurven. Dit geldt ook voor het vaststellen van de werkzaamheid van het vaccin of het testen van de mutanten voor de virulentie. Met histoplasmose, de muizen gaan vaak van die energieke om dode gedurende een aantal uren. De capaciteit van een interventie, zoals het toedienen van een mAb kan een dier in eerste instantie te beschermen tegen ziekte, maar de ziekte kan terugvallen, die niet zou worden gerealiseerd op korte CFU experimenten. In aanvulling op de overleving en schimmels last testen, onderzoeken we de inflammatoire respons op infectie (histologie, cellulair werving en selectie, cytokine responsen). Om te overleven / tijd om dood experimenten, zijn de muizen geïnfecteerd en gecontroleerd minstens tweemaal per dag op tekenen van ziekelijkheid. Voor de beoordeling van schimmel last, histopathologie, en cytokine respons, zijn de muizen gedood op verschillende tijdstippen na infectie. Dierproeven worden uitgevoerd volgens de richtlijnen van het Institute for Animal Studies van de Albert Einstein College of Medicine.