磁気共鳴イメージング(MRI)は、遺伝子組み換えマウスの表現型を調べるために、ますますよく使われる道具となっている。この記事では、複数のマウスMRIを用いて遺伝子組み換えマウスのハイスループット表現型解析を実現するために必要なメソッドを示しています。
磁気共鳴画像(MRI)によるマウスの表現型のフィールドは急速にヒト疾患のマウスモデルを特徴付けると評価するための改良されたツールの必要性によって動機づけ、成長している。 MRIは、遺伝子組み換え動物を調査するための優れたモダリティである。それは、脳全体をカバーすることが可能ですin vivoで使用することができる、とneuranatomyと生理学のさまざまな側面を調査するための複数のコントラストメカニズムを提供します。複数のマウスをスキャンする機能とともに、高磁場スキャナーの登場は同時に小説変異の迅速な表現型解析が可能になります。
効果的なマウスMRIの研究は、実験の設計の多くの側面に注意が必要です。この記事では、シールドの送信/受信電波の周波数で同時に画像をマウス(RF)の一般的な磁石のコイル(ボックら 、2003)そのシステムを使用してマウスの表現型解析のために品質の画像を取得する一般的な方法を説明します。我々は、特に解剖学的表現型、私たちのイメージングセンターで多くのマウスモデルでの影響の可能性が高い示されていることが重要とアクセス可能なアプリケーションに焦点を当てる。我々はそのような画像を取得するために詳細な手順を提供する前に、 生体の脳イメージング(太宰治ら 、2004)と注意すべきex vivoでの脳イメージング(春ら 、2007) の両方のための重要な実用的な考慮事項があります。これらについて以下に説明します。
生体と撮像時間を増やすことなく大幅にイメージング研究のスループットを向上させるために一度にex vivoでのマウスのイメージングシステムの画像を複数の被験者の両方。 生体および生体外で複数のマウスのイメージング技術の両方から脳の画像の品質は高くなりますし、それぞれマウスの脳でメジャーとマイナーの構造を表現型解析に適しています。
複数の検体の動物の準備時間を最小限に抑えるために、プロセスの並列化は最も重要である。例えば、誘導チャンバーの開発は、同時に複数の試料の誘導のために許され、身体の位置を標準化しながらそりは、ECGと温度プローブのアプリケーションを同期しました。さらに、私たちのex vivoでのイメージングシステムは、高スループットの表現型解析の研究に最適です一度に16の固定全体の脳の高解像度の3次元画像を取得することを可能にします。
in vivoイメージングシステムにおける当社の可能な限界は、個別に各マウスの麻酔薬と温度を制御することができないなどがあります。必要に応じて個々の麻酔薬のコントロールは、各マウスに対して排他的な麻酔気化器の追加により実装することができます。 in vivoイメージングシステムでのもう一つの制限は、スキャンが約32グラム未満であるマウスに限定されているということです。しかし、より大きな動物を収容するためにコイルのサイズを大きくするために、現在計画がある。
The authors have nothing to disclose.
この作品は、小児病院、トロント大学のマウスイメージングセンター(MICE)の一部です。
Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Isoflurane, USP (AErrane) | Baxter | CA2L9108 | ||
NAIR | Church & Dwight Canada Corp. | |||
Tears Naturale P.M. | Alcon | DIN 02082519 | ||
Omniscan (gadodiamide injection USP) | GE healthcare | J-110A | ||
Custom Sleds | Dazai Research Instruments | |||
PBS w/o Ca and Mg | Wisent | 311-010-CL | ||
Heparin 10000USP/10ml | Pharmaceutical Partners of Canada | DIN 02264315 | ||
ProHance (gadoteridol injection USP) | Bracco Diagnostics | 11181 | ||
Parafolmadehyde (powder) | Sigma | P-6148-500g | ||
Sodium Azide | Fisher | S227-100 | ||
Formalin 10% | Fisher | SF100-4 |