Electrospinning technieken kan een verscheidenheid van nanofibrous scaffolds voor tissue engineering of andere toepassingen. We beschrijven hier een procedure om de parameters van de electrospinning oplossing en apparatuur te optimaliseren om vezels te verkrijgen met de gewenste morfologie en uitlijning. Veel voorkomende problemen en het oplossen van problemen technieken worden ook gepresenteerd.
Electrospun nanovezel steigers is aangetoond dat de rijping te versnellen, de groei te verbeteren en de migratie van cellen in vitro te sturen. Elektrospinproces is een proces waarbij een geladen polymeer jet is verzameld op een geaarde collector, een snel roterende verzamelaar resultaten in lijn nanovezels tijdens het stilstaan verzamelaars resulteren in willekeurig georiënteerde vezels matten. Het polymeer jet wordt gevormd wanneer een toegepast elektrostatische lading van de oppervlaktespanning van de oplossing overwint. Er is een minimale concentratie voor een bepaald polymeer, aangeduid als de kritische verstrengeling concentratie, waaronder een stabiele jet niet kan worden bereikt en er geen nanovezels zal vormen – hoewel nanodeeltjes kan worden bereikt (electrospray). Een stabiele jet heeft twee domeinen, een streaming segment en een zweep segment. Terwijl de opzwepende jet is meestal onzichtbaar voor het blote oog, de streaming segment is vaak zichtbaar onder de juiste lichtomstandigheden. Observeren van de lengte, dikte, consistentie en de beweging van de stroom is nuttig om de uitlijning en de morfologie van de nanovezels gevormd voorspellen. Een korte, niet-uniform, inconsistent en / of oscillerende stroom is indicatief voor een aantal problemen, zoals een slechte vezels uitlijning, beading, spatten, en grillig motief of golvende patronen. De stroom kan worden geoptimaliseerd door het aanpassen van de samenstelling van de oplossing en de configuratie van de electrospinning apparaat, waardoor het optimaliseren van de afstemming en de morfologie van de vezels wordt geproduceerd. In dit protocol, presenteren we een procedure voor het opzetten van een basis electrospinning apparaat, empirisch onderlinge aanpassing van de kritische verstrengeling concentratie van een polymeeroplossing en optimaliseren van de elektrospinproces. Daarnaast bespreken we enkele veel voorkomende problemen en het oplossen van problemen technieken.
Let op: Het merendeel van de voorbeelden die hier omgaan met electrospinning poly-L-melkzuur (PLLA) nanovezels. Dit komt simpelweg omdat PLLA is de meest voorkomende polymeer gesponnen in ons laboratorium. We hebben echter ook met succes gebruikt deze methoden om andere polymeren (bijvoorbeeld PLGA, PCL, PS) electrospin en dat de hier gepresenteerde technieken gemakkelijk zijn van toepassing op het merendeel van de midden-tot hoog moleculair gewicht polymeer-oplossingen geloven.
The authors have nothing to disclose.
Dit werk werd ondersteund door NIH K08 EB003996 en de Paralyzed Veterans of America Research Foundation Grant 2573.
Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
High voltage DC power supply | Gamma High Voltage | ES40P-5W | ||
Syringe pump | KD Scientific | KDS100 | ||
Aluminum foil | Reynolds | |||
Blunt metal tips, 23ga | Fisher | 13-850-102 | ||
Polypropylene syringe | BD | 309585 | ||
Rotating or stationary collector | Custom built | |||
Various alligator clips and wires | ||||
Dimethylformamide | Fisher | AC11622-0010 | ||
Chloroform | Fisher | AC42355-0040 | ||
PLLA | Boehringer Ingelheim | Resomer L210 | ||
PLGA 85:15 | Sigma | 43471 | ||
Carbon tape | Ted Pella | 13073-1 |