実験的自己免疫性下垂体炎の誘導のためのマウス下垂体免疫原の調製
Summary
自己免疫性下垂体炎は、マウス下垂体タンパク質の抽出物を注入することにより、マウスで再現することができる。
Abstract
自己免疫性下垂体炎は自己免疫1によって引き起こされるかを伴う下垂体の慢性炎症です。それは伝統的に稀な疾患と考えられてきたが、レポートでは、近年著しく増加している。下垂体炎は、実際には、そのようなCTLA – 4 2とPD – 1受容体としてTリンパ球上に発現する抑制性受容体をブロックする抗体を、治療を受けたがん患者の"副作用"として、稀にではない開発しています。自己免疫性下垂体炎はアジュバント3と混合下垂体タンパク質をマウスに注射することによって実験的に誘導することができる。このビデオの記事では、マウスの下垂体腺と方法SJLマウスにおける自己免疫性下垂体炎を誘発するのに適した形でそれらを準備してからタンパク質を抽出する方法を示します。
Protocol
実験的なプロトコルこの実験的なプロトコルの最初のステップは、マウスの下垂体腺の大きい数を集めることです。第二段階は、タンパク質の抽出液を調製するために腺を均質化するためです。第三段階は、油性混合物で、これらのタンパク質を乳化することです。 ステップ1：マウスの下垂体腺の収集と保管マウス下垂体は視…
Discussion
自己免疫性下垂体炎による最初の患者は1962年4に報告されているにもかかわらず、病原体抗原5をまだ明らかにされないままである。動物モデルは、患者のケアに翻訳可能なバイオマーカーの発見を助ける、これらの自己抗原を識別するために非常に便利です。この記事では、実験動物における自己免疫性下垂体炎を誘発するための適切な形式で下垂体タンパク質を調製するた…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作業はPCにNIHの助成金DK080351によってサポートされていました。
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 15-ml Falcon tubes | ||||
| homogenization buffer | ||||
| phosphate buffered saline | ||||
| protease inhibitor cocktail | ||||
| Polytron homogenizer | ||||
| BCA assay | Pierce | 23225 | ||
| Complete Freund’s Adjuvant (CFA) | Sigma | F-5881 | ||
| Mycobacterium tuberculosis | Becton Dickinson | 231141 | ||
| 2.5 mL Hamilton gastight syringe | ||||
| 22-gauge micro-emulsifying needle |
Referenzen
- Caturegli, P., Newschaffer, C., Olivi, A., Pomper, M. G., Burger, P. C., Rose, N. R. . Autoimmune Hypophysitis Endocr Rev. 26, 599-614 (2005).
- Blansfield, J. A., Beck, K. E., Tran, K., Yang, J. C., Hughes, M. S., Kammula, U. S., Royal, R. E., Topalian, S. L., Haworth, L. R., Levy, C., Rosenberg, S. A., Sherry, R. M. Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 blockage can induce autoimmune hypophysitis in patients with metastatic melanoma and renal cancer. J Immunother. 28, 593-598 (2005).
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. 149, 3461-3469 (2008).
- Goudie, R. B., Pinkerton, P. H. Anterior hypophysitis and Hashimoto’s disease in a woman. J Pathol Bacteriol. 83, 584-585 (1962).
- Caturegli, P. Autoimmune hypophysitis: an underestimated disease in search of its autoantigen(s). J Clin Endocrinol Metab. 92, 2038-2040 (2007).
Diesen Artikel zitieren
Tzou, S., Landek-Salgado, M. A., Kimura, H., Caturegli, P. Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis. J. Vis. Exp. (46), e2181, doi:10.3791/2181 (2010).