Deze video beschrijft een micro-injection methode voor de levering van borstkankercellen in de perivitelline ruimte van transgene zebravis embryo’s. Na incubatie visualiseren we het embryo onder een fluorescerende microscoop om kankercelinvasie, verspreiding en metastase te observeren.
Protocol
1. Beeld en analyseer het gemetastaseerde proces Verzamel verschillende verdoofde embryo’s met een brede Pasteur pipet en breng ze over op de glazen bodem van een polystyreenschaal. Verwijder overtollig water en houd een beperkte hoeveelheid eiwater. Manipuleer het embryo in positie met een haarlusgereedschap en plaats een hoes bovenop het glas. Gebruik een omgekeerde confocale microscoop in combinatie met wateronderdompeling of droge langeafstandsdoelen. Plaats het embryo z…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Materials
Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL)
Eppendorf
F276456I
Confocal microscope
Leica
SP5 STED
Stereo microscope
Leica
MZ16FA
Tg (fli:EGFP) zebrafish strain
Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands)
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).