FitC-Dextran Кормление: Метод количественной оценки проницаемости кишечника в C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Le, T. A. N., et al. Измерение воздействия бактерий и химических веществ на проницаемость кишечника Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Это видео вводит метод визуализации и измерения целостности C. elegans кишечника люмена путем кормления червей FITC помечены декстран. Пример протокола показывает анализ, проделанной с 3,3′-diindolylmethane (DIM)-обработанных и патогенных червей.
Protocol
Этот протокол является выдержка из Le et al, Измерение воздействия бактерий и химических веществ на кишечной проницаемости Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). <stro…
Representative Results
Рисунок 1: Влияние ДИМ на проницаемость кишечника C. elegans кормили P. aeruginosa. Микроскопические изображения червей из (A) E. coli OP50 без кормления FITC-декстран, ( B )E.</str…
Materials
| 3,3’-diindolylmethane | Sigma | D9568 | |
| 90×15 mm Petri dishes | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
| Bactor Agar | Beckton Dickinson | REF. 214010 | |
| Formaldehyde solution | Sigma | F1635 | |
| Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
| Cholesterol | Sigma | C3045 | |
| Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene | Corning Incorporated | REF. 3631 | |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2650 | |
| Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
| Fluorescein isothiocyanate – dextran | Sigma | FD10S | |
| Harmony software | PerkinElmer | verson 3.5 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Bioreagents | BP2213-1 | |
| Fluoromount aqueous mounting medium | Sigma | F4680 | |
| Operetta CLS High-Content Analysis System | PerkinElmer | HH16000000 | |
| Peptone | Merck | EMD 1.07213.1000 | |
| Pseudomonas aeruginosa PA01 | Korean Collection for Type Culture | KCTC NO. 1637 | |
| Sodium Chloride | Fisher Bioreagents | BP358-1 | |
| Stereo Microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |
Diesen Artikel zitieren
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).