脲中介代谢物的GC / MS分析的样品制备方法是由它的发明者。该方法允许单步跟进串联质谱新生儿筛查先天的错误量化碳水化合物,有机和氨基酸都在一个单一的过程。
在美国出生的每个婴儿现在筛选长达42罕见遗传性疾病,称为“先天代谢的错误”。基于串联质谱筛查方法和量化有机酸血症的屏幕acylcarnitines还措施氨基酸。所有国家也进行了测试碳水化合物的疾病,如半乳糖的酶。非特异性,后续检测的阳性结果,因为结果可以是使用一个更明确的方法的要求。本报告介绍了“脲”与生俱来的错误检查的样品制备方法。结晶脲酶是用来清除体液中的尿素,允许其他大多数水溶性代谢产物的气相色谱在一个单一的过程中脱水和衍生。在氮气流中蒸发脱水的便利,加入乙腈和二氯甲烷。然后,三甲基硅烷在一个独特的催化剂,三乙基三氟存在。其次是宏观驱动192的代谢物和半定量使用专门的TMS衍生物的生物化合物的质谱库的每一个主要组件的自定义量化的自动注入和色谱。分析可能是执行上广泛使用的化学工作站平台,采用从作者提供的宏和库。在我们的实验室,超过16,000名患者的样本进行了分析,使用了约17%的诊断率的方法 – 也就是说,17%的样品结果显示订货医生应该采取行动后的结果。 ,其中包括超过180确认与生俱来的错误,其中约38%不能使用前面的方法诊断。
尿素酶方法(1)已被引用62次在各种修改的医学文献。松本组(2,3)简化程序,为高通量的新生儿疾病筛查和报告16000例患者的结果。 Kuhara和其他人(4-7)报道与生俱来的错误诊断的几起案件中使用的方法和后续。 Rhead(8)也证实,为临床诊断方法的实用性和后续与生俱来的错误。该方法已应用于熊尿,基因敲除小鼠,大象和整个果蝇和它们的幼虫(9)匀浆。 隐球菌定点突变前后的文化媒体也分析,没有脲(10步) 。该方法已应用到人类的营养评估医学生唐氏综合征患者和老人痴呆症患者的退伍军人,加载后口服剂量的氨基酸色氨酸,蛋氨酸和异亮氨酸(11)科目。所有八个B族维生素评估量化的三个氨基酸,其中,要求在一些点在其降解所有8维生素的分解产物。补充维生素药品和缓解的毒副作用已经报道(12)。从正常和唐氏综合症妊娠的羊水样本进行了分析和报道(13-15)。
The authors have nothing to disclose.
能够安东尼托马斯的技术援助表示感谢。
Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
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MSD 5975 | Agilent | GC/MS/Computer | ||
MSD 5973 | Agilent | GC/MS/Computer | ||
Urease | Calzyme | 116A0100 | Also Sigma C3 | |
Stable Isotope Standards | CDN Isotopes, Isotec, Cambridge Isotope Lab | |||
Solvents | Fisher | |||
Analytes | Sigma, Universidad Autonoma de Madrid, Ernesto Brunet | |||
GC Columns | J&W Scientific | 123-5026 | ||
TEA/TFA | Fluka/Sigma | 09747 | ||
Vials | Supelco/Sigma | Z115088/12EA | ||
Merlin Microseal | Agilent | 5181-8815 | ||
MSTFA | Thermal Scientific | 48913 |