معالجة أرجل الحشرات للتنظير المجهري الفلوري: طريقة للحفاظ على الهياكل العصبية العضلية للتصوير
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: غوان, W., وآخرون تصور Drosophila الساق العصبية الحركية محاور عصبية من خلال كتيكل الكبار. ج. فيس إكسب. (2018).
يصف هذا الفيديو طريقة لتشريح الساق البالغة Drosophila وإصلاحها وتركيبها مع الحفاظ على عضلتها العصبية سليمة لتحليل التصوير.
Protocol
هذا البروتوكول هو مقتطف من غوان وآخرون.، تصور Drosophila الساق العصبية الحركية محاور عصبية من خلال لطيف الكبار، J. Vis. Exp. (2018). 1. تشريح الساق والتثبيت تأخذ لوحة زجاجية متعددة الآبار وملء العدد المناسب من الآبار مع الإيثانول 70٪. إضافة 15-20 CO2-تخدير الذباب (من ?…
Representative Results
الشكل 1: إجراء لتركيب الساقين على الشرائح المجهر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Materials
| Ethanol absolute | Fisher | E/6550DF/17 | Absolute analytical reagent grade |
| nonionic surfactant detergent | Sigma-Aldrich | T8787 | Triton X-100, for molecular biology |
| Fine forceps | Sigma-Aldrich | F6521 | Jewelers forceps, Dumont No. 5 |
| Glass multi-well plate | Electron Microscopy Sciences | 71563-01 | 9 cavity Pyrex, 100 mm x 85 mm |
| PFA | Thermofisher | 28908 | Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free |
| Glycerol | Fisher BioReagents | BP 229-1 | Glycerol (Molecular Biology) |
| Spacers | Sun Jin Lab Co | IS006 | iSpacer, four wells, around 12 μL working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep |
| Square 22 mm x 22 mm coverslips | Fisher Scientific | FIS#12-541-B | No. 1.5-0.16 to 0.19 mm thick |
| Mounting Medium | Vector Laboratories | H-1000 | Vectashield Antifade Mounting Medium |
Diesen Artikel zitieren
Processing Insect Legs for Fluorescence Microscopy: A Method to Preserve Neuromuscular Structures for Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20121, doi: (2023).