El ensayo CApillary FEeder (CAFE): Un método para rastrear el consumo y la preferencia de los alimentos en Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Diegelmann, S., et al. The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster. J. Vis. (2017).
Este video describe el CApillary FEeder, o CAFE, ensayo, un método de comportamiento que mide la ingesta de alimentos y la preferencia de las moscas de la fruta sin restricciones. El protocolo destacado muestra cómo realizar el ensayo con una evaporación mínima de los capilares llenos de líquido utilizados para entregar los alimentos y realizar un seguimiento de su ingesta.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montaje y realización del ensayo CApillary FEeder Si no es necesario ayunar, transfiera las moscas experimentales al ensayo tocando o soplando. Asegúrese de incluir tres viales de control sin moscas para cuantificar la evaporación. Retire cuidadosamente una punta de pipeta (2 – 20 μL de volume…
Representative Results
Figura 1: El ensayo Drosophila melanogaster CApillary FEeder. A) El ensayo de alimentación con moscas. El papel filtrante humedecido proporciona agua en la parte inferior del vial. Durante el experimento se proporcionan cuatro capilares (alimentos de color rojo y azul en capilares opuestos). Tenga en cuenta que los capilares están asegurados en su posición por una segunda punta de pipeta, y la…
Materials
| Vials (breeding) | Greiner Bio-One | 960177 | www.greinerbioone.com |
| Vials (CAFE assay) | Greiner Bio-One | 217101 | www.greinerbioone.com |
| Lid-CAFE assay | Workshop | – | – |
| Plastic box, low wall | Plastime | 353 | www.plastime.it |
| Cover for the plastic box | Workshop | – | – |
| Capillaries | BLAUBRAND | REF 7087 07 | www.brand.de |
| Pipette tips | Greiner Bio-One | 771290 | www.greinerbioone.com |
| Filter paper circles | Whatman | 10 311 804 | www.sigmaaldrich.com |
| D(+)-Sucrose | AppliChem | 57-50-1 | www.applichem.com |
| Ethanol absolute | VWR Chemicals | 20,821,330 | www.vwr.com |
| Food color (red, E124) | Backfun | 10027 | www.backfun.de |
| Food color (blue, E133) | Backfun | 10030 | www.backfun.de |
| Soap solution (CVK 8) | CVH | 103220 | www.cvh.de |
| Digital caliper | GARANT | 412,616 | www.hoffmann-group.com |
| Vials (breeding) | Height 9.8 cm, diameter 4.8 cm | ||
| Vials (CAFE assay) | Height 8 cm, diameter 3.3 cm | ||
| Lid-CAFE assay | Produced in university workshop, technical drawing supplied Please click here to download this file. |
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| Plastic box, low wall | A plastic grid inlay was custom-made for 8 x 10 vial positions | ||
| Cover for the plastic box | Dimensions (37 x 29 x 18 cm) | ||
| Capillaries | DIN ISO 7550 norm, IVD-guideline 98/79 EG, ends polished | ||
| Pipette tips | Pipettes for the outer circle are cut according to the lid | ||
| Filter paper circles | 45 mm diameter works nicely if folded for the vials used | ||
| D(+)-Sucrose | Not harmful | ||
| Ethanol absolute | Highly flammable liquid and vapor | ||
| Food color (red, E124) | Not stated | ||
| Food color (blue, E133) | Not stated | ||
| Soap solution (CVK 8) | Odor neutral soap | ||
| Digital caliper | |||
| Standard fly food | (for 20 L) | ||
| Agar | 160 g | ||
| Brewer's Yeast | 299.33 g | ||
| Cornmeal | 1,200 g | ||
| Molasses | 1.6 L | ||
| Propionic acid | 57.3 mL | ||
| Nipagin 30% | 160 mL |
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The CApillary FEeder (CAFE) Assay: A Method to Track Food Consumption and Preference in Drosophila. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20115, doi: (2023).