O Ensaio CApillary FEeder (CAFE): Um método para acompanhar o consumo e preferência dos alimentos em Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Diegelmann, S., et al. The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).
Este vídeo descreve o CApillary FEeder, ou CAFE, ensaio, um método comportamental que mede a ingestão de alimentos e a preferência de moscas de frutas sem restrições. O protocolo em destaque mostra como realizar o ensaio com evaporação mínima dos capilares cheios de líquido usados para entregar o alimento e acompanhar sua ingestão.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montagem e Execução do Ensaio FApillary FEeder Se o jejum não for necessário, transfira as moscas experimentais para o ensaio tocando ou por cano-de-sopro. Certifique-se de incluir três frascos de controle sem moscas para quantificar a evaporação. Remova cuidadosamente uma ponta de pipeta (2 …
Representative Results
Figura 1: O Drosophila melanogaster CApillary FEeder Assay. A) O ensaio de alimentação com moscas. O papel filtro umedecido fornece água na parte inferior do frasco. Quatro capilares são fornecidos durante o experimento (alimentos vermelhos e azuis em capilares opostos). Observe que os capilares são fixados na posição por uma segunda ponta de pipeta, e as posições não aproveitadas são …
Materials
| Vials (breeding) | Greiner Bio-One | 960177 | www.greinerbioone.com |
| Vials (CAFE assay) | Greiner Bio-One | 217101 | www.greinerbioone.com |
| Lid-CAFE assay | Workshop | – | – |
| Plastic box, low wall | Plastime | 353 | www.plastime.it |
| Cover for the plastic box | Workshop | – | – |
| Capillaries | BLAUBRAND | REF 7087 07 | www.brand.de |
| Pipette tips | Greiner Bio-One | 771290 | www.greinerbioone.com |
| Filter paper circles | Whatman | 10 311 804 | www.sigmaaldrich.com |
| D(+)-Sucrose | AppliChem | 57-50-1 | www.applichem.com |
| Ethanol absolute | VWR Chemicals | 20,821,330 | www.vwr.com |
| Food color (red, E124) | Backfun | 10027 | www.backfun.de |
| Food color (blue, E133) | Backfun | 10030 | www.backfun.de |
| Soap solution (CVK 8) | CVH | 103220 | www.cvh.de |
| Digital caliper | GARANT | 412,616 | www.hoffmann-group.com |
| Vials (breeding) | Height 9.8 cm, diameter 4.8 cm | ||
| Vials (CAFE assay) | Height 8 cm, diameter 3.3 cm | ||
| Lid-CAFE assay | Produced in university workshop, technical drawing supplied Please click here to download this file. |
||
| Plastic box, low wall | A plastic grid inlay was custom-made for 8 x 10 vial positions | ||
| Cover for the plastic box | Dimensions (37 x 29 x 18 cm) | ||
| Capillaries | DIN ISO 7550 norm, IVD-guideline 98/79 EG, ends polished | ||
| Pipette tips | Pipettes for the outer circle are cut according to the lid | ||
| Filter paper circles | 45 mm diameter works nicely if folded for the vials used | ||
| D(+)-Sucrose | Not harmful | ||
| Ethanol absolute | Highly flammable liquid and vapor | ||
| Food color (red, E124) | Not stated | ||
| Food color (blue, E133) | Not stated | ||
| Soap solution (CVK 8) | Odor neutral soap | ||
| Digital caliper | |||
| Standard fly food | (for 20 L) | ||
| Agar | 160 g | ||
| Brewer's Yeast | 299.33 g | ||
| Cornmeal | 1,200 g | ||
| Molasses | 1.6 L | ||
| Propionic acid | 57.3 mL | ||
| Nipagin 30% | 160 mL |
Diesen Artikel zitieren
The CApillary FEeder (CAFE) Assay: A Method to Track Food Consumption and Preference in Drosophila. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20115, doi: (2023).