Grabaciones multielectrodo matriz del epitelio vomeronasal
Summary
Multielectrodo array (MEA) grabaciones de proporcionar un método para estudiar la actividad eléctrica de las grandes poblaciones de neuronas. Aquí se presentan los detalles de una preparación de MEA para grabar desde el epitelio vomeronasal del ratón al mismo tiempo estimular el tejido.
Abstract
Entender los circuitos neuronales requiere de métodos de registro de las neuronas de manera simultánea. Para<em> In vitro</em> Estudios, una tecnología actualmente disponible es amplia plana multielectrodo (MEA) de grabación. Aquí se documenta el uso de los acuerdos ambientales multilaterales para estudiar el ratón órgano vomeronasal (OVN), que desempeña un papel esencial en la detección de las feromonas y señales sociales a través de una diversa población de neuronas sensoriales que expresan cientos de tipos de receptores. La combinación de grabación de MEA con un controlador robótico líquido para suministrar estímulos químicos, las respuestas sensoriales de una gran y diversa población de neuronas se pueden grabar. La preparación que nos permite eliminar el neuroepitelio intacta del VNO en el ratón y estimular con una batería de productos químicos o ligandos potenciales, mientras que el control de la actividad eléctrica de las neuronas durante varias horas. Por lo tanto, esta técnica sirve como un método útil para evaluar la actividad del ligando, así como explorar las propiedades de las neuronas receptoras. Se presentan las técnicas necesarias para preparar el epitelio vomeronasal, grabación de MEA, y la estimulación química.
Protocol
Discussion
Grabaciones multielectrodo conjunto nos permiten la posibilidad de monitorear la actividad simultánea de una gran población de neuronas. Esta es una herramienta útil para probar las propiedades de un sistema sensorial, en concreto el VNO. A diferencia del sistema olfatorio principal, el OVN detecta estímulos en fase líquida. Además, el VNO es un tejido heterogéneo. Hay aproximadamente 300 tipos diferentes de receptores en el ratón 1, presumiblemente con perfiles de respuesta diferente. MEA grabaciones…
Acknowledgements
Nos gustaría agradecer a los miembros del Laboratorio de Santo. Este trabajo fue apoyado por el Instituto Nacional de Enfermedades Sordera y Comunicación (R01 DC005964 de LA) y NSF IGERT 0548890 (HAA).
Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las leyes de los Estados Unidos de Bienestar Animal y de los Institutos Nacionales de Salud directrices y fueron aprobados por el Cuidado de Animales de la Universidad de Washington y el empleo.
Referenzen
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
