Array registrazioni Multielectrode dell'epitelio Vomeronasal
Summary
Multielectrode array (MEA), le registrazioni forniscono un metodo per studiare l'attività elettrica di ampie popolazioni di neuroni. Qui, vi presentiamo i dettagli di una preparazione MEA per registrare dal epitelio del mouse vomeronasale mentre simultaneamente stimola il tessuto.
Abstract
Comprensione circuiti neurali richiede metodi per registrare da molti neuroni contemporaneamente. Per<em> In vitro</em> Studi, una tecnologia attualmente disponibile è planare serie multielectrode (MEA) di registrazione. Qui documentare l'uso di MEA per studiare il mouse organo vomeronasale (VNO), che svolge un ruolo essenziale nella rilevazione dei feromoni e segnali sociali attraverso una popolazione diversificata di neuroni sensoriali che esprimono centinaia di tipi di recettori. Combinando la registrazione MEA con un gestore robotica liquido per fornire stimoli chimici, le reazioni sensoriali di una popolazione vasta e diversificata di neuroni possono essere registrati. La preparazione ci permette di rimuovere il neuroepitelio intatta del VNO dal mouse e stimolare con una batteria di sostanze chimiche o di ligandi potenziali monitorando l'attività elettrica dei neuroni per diverse ore. Pertanto, questa tecnica serve come un metodo utile per valutare l'attività legante così come esplorare le proprietà dei neuroni. Vi presentiamo le tecniche necessarie per preparare l'epitelio vomeronasale, registrazione MEA, e la stimolazione chimica.
Protocol
Discussion
Registrazioni serie Multielectrode ci permette la possibilità di monitorare l'attività simultanea di una grande popolazione di neuroni. Questo è un utile strumento per sondare le proprietà di un sistema sensoriale, in particolare il VNO. A differenza del sistema olfattivo principale, il VNO rileva stimoli in fase liquida. Inoltre, il VNO è un tessuto eterogeneo. Ci sono circa 300 tipi diversi di recettori nel topo 1, presumibilmente con profili di risposta diversa. Registrazioni MEA combinato con il …
Acknowledgements
Vorremmo ringraziare i membri del Laboratorio Santo. Questo lavoro è stato sostenuto dall'Istituto Nazionale per la Sordità ei disturbi della comunicazione (R01 DC005964 a LA) e NSF IGERT 0.548.890 (HAA).
Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con gli Atti del benessere degli animali Stati Uniti e gli Istituti Nazionali di Sanità e le linee guida sono state approvate dalla cura degli animali Washington University e Comitato Usa.
Referenzen
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
