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Un saggio di fluorescenza del calcio "a doppia aggiunta" per lo screening ad alta produttività dei recettori accoppiati a proteine G ricombinanti
JoVE 杂志
生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
A “Dual-Addition” Calcium Fluorescence Assay for the High-Throughput Screening of Recombinant G Protein-Coupled Receptors
DOI:

08:46 min

December 02, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:04Calcium Fluorescence Assay and Data Analysis
  • 07:40Results: High-Throughput, Intracellular Calcium Fluorescence Assay Mediated Screening of Small Molecule Libraries on Recombinant G Protein-Coupled Receptors (GPCRs)
  • 08:08Conclusion

Summary

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In questo lavoro, viene descritto un saggio di fluorescenza di calcio intracellulare ad alto rendimento per piastre a 384 pozzetti per lo screening di piccole librerie di molecole su recettori accoppiati a proteine G ricombinanti (GPCR). Il bersaglio, il recettore della chinina dalla zecca della febbre bovina, Rhipicephalus microplus, è espresso nelle cellule CHO-K1. Questo test identifica agonisti e antagonisti che utilizzano le stesse cellule in un test di "doppia addizione".

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