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T細胞白血病における癌遺伝子研究のためのデルタ様4発現間質細胞上でのマウス胸腺細胞の共培養と形質導入
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癌症研究
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JoVE 杂志 癌症研究
Co-Culture and Transduction of Murine Thymocytes on Delta-Like 4-Expressing Stromal Cells to Study Oncogenes in T-Cell Leukemia
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T細胞白血病における癌遺伝子研究のためのデルタ様4発現間質細胞上でのマウス胸腺細胞の共培養と形質導入

DOI:
10.3791/64271-v

•

09:43 min

•

June 09, 2023

•

, , , , , , ,
1Cytokines and Immunity Section, Cancer Innovation Laboratory, National Cancer Institute,National Institutes of Health, 2Comparative Biomedical Scientist Training Program,NIH, 3Department of Pathobiology and Diagnostic Investigation, Veterinary Diagnostic Laboratory,Michigan State University, 4NCI-Frederick Laboratory Animal Sciences Program

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:47Seeding and Transfecting the Retrovirus-Producer Cells
  • 02:31Thymocyte Preparation and Depletion of CD4+ and CD8+ Cells
  • 04:53Harvesting Retrovirus and Transducing the Thymocytes
  • 07:13Results: Thymocyte Depletion and Thymocyte Retroviral Transduction Efficiency
  • 08:51Conclusion

Summary

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このプロトコルでは、マウス胸腺からのダブルネガティブ胸腺細胞の単離とそれに続くレトロウイルス形質導入、およびさらなる機能分析のためのデルタ様4発現骨髄間質細胞株共培養システム(OP9-DL4)での共培養について説明します。

Tags

Co-cultureTransductionMurine ThymocytesDelta-Like 4Stromal CellsT-cell LeukemiaRetroviral VectorsOP9 DL4In Vitro SystemT-cell DevelopmentCancerThymocyte SuspensionThymusPBSGlass SlidesCell Filtration

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