यह प्रोटोकॉल माउस थाइमस से डबल-नकारात्मक थाइमोसाइट्स के अलगाव का वर्णन करता है, जिसके बाद डेल्टा-जैसे 4-व्यक्त अस्थि मज्जा स्ट्रोमल सेल लाइन को-कल्चर सिस्टम (ओपी 9-डीएल 4) पर रेट्रोवायरल ट्रांसडक्शन और सह-संस्कृति होती है।