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Co-culture et transduction de thymocytes murins sur des cellules stromales exprimant 4-Delta-like pour étudier les oncogènes dans la leucémie à cellules T
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Co-Culture and Transduction of Murine Thymocytes on Delta-Like 4-Expressing Stromal Cells to Study Oncogenes in T-Cell Leukemia
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Co-culture et transduction de thymocytes murins sur des cellules stromales exprimant 4-Delta-like pour étudier les oncogènes dans la leucémie à cellules T

DOI:
10.3791/64271-v

•

09:43 min

•

June 09, 2023

•

, , , , , , ,
1Cytokines and Immunity Section, Cancer Innovation Laboratory, National Cancer Institute,National Institutes of Health, 2Comparative Biomedical Scientist Training Program,NIH, 3Department of Pathobiology and Diagnostic Investigation, Veterinary Diagnostic Laboratory,Michigan State University, 4NCI-Frederick Laboratory Animal Sciences Program

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:47Seeding and Transfecting the Retrovirus-Producer Cells
  • 02:31Thymocyte Preparation and Depletion of CD4+ and CD8+ Cells
  • 04:53Harvesting Retrovirus and Transducing the Thymocytes
  • 07:13Results: Thymocyte Depletion and Thymocyte Retroviral Transduction Efficiency
  • 08:51Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit l’isolement de thymocytes doublement négatifs du thymus de souris, suivi d’une transduction rétrovirale et d’une co-culture sur le système de co-culture de lignée cellulaire stromale de moelle osseuse de type delta 4-exprimant la moelle osseuse (OP9-DL4) pour une analyse fonctionnelle plus approfondie.

Tags

Co-cultureTransductionMurine ThymocytesDelta-Like 4Stromal CellsT-cell LeukemiaRetroviral VectorsOP9 DL4In Vitro SystemT-cell DevelopmentCancerThymocyte SuspensionThymusPBSGlass SlidesCell Filtration

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